Видовой состав микрофлоры при мастите

Авторы работы:

Научный журнал:

работу при широком диапазоне изменения температуры наружного воздуха; должна быть компактной за счет эффективного сочетания 3 способов отвода тепла от охлаждающей жидкости: путем непосредственного обдувания холодным воздухом потока охлаждающей жидкости; за счет охлаждения холодным воздухом поверхностей, с которыми соприкасается охлаждающая жидкость; с помощью предварительного намораживания льда, с которым будет соприкасаться охлаждающая жидкость при циркуляции.

В соответствии с этими требованиями нами разработана экспериментальная холодильная установка с использованием холодного наружного воздуха для районов Крайнего Севера.

Холодильная установка имеет бак для ледяной воды, представляющий собой 4 емкости малой ширины из стали, внутренние полости которых сообщаются друг с другом с помощью отрезков труб. Емкости расположены горизонтально внутри утепленного вентиляционного короба. К вентиляционному коробу подведены входной и выходной утепленные

воздуховоды, по которым вовнутрь вентиляционного короба попадает холодный наружный воздух и уходит отепленный воздух. К входному воздуховоду присоединен вентилятор. Для регулирования количества входящего холодного наружного воздуха во входном и выходном воздуховодах смонтированы заслонки. Вентиляционный короб имеет крышку и переднюю стенку с открывающимися створками. Вода из трубопровода отепленной воды по желобу попадает в первую из емкостей и, проходя через остальные емкости, попадает в трубопровод холодной воды.

В установке сочетаются все способа отвода тепла: стекая по желобу, подогретая вода непосредственно обдувается холодным воздухом, проходя через емкости, соприкасается с предварительно намороженным льдом и стенками емкостей, отрезков труб, охлаждаемых холодным воздухом.

Интенсификация работы установки при относительно высоких температурах наружного воздуха достигается за счет работы вентилятора и предварительного намораживания

льда на стенках емкостей в холодное время суток.

Чтобы не допустить перебоев в работе установки при очень низких температурах наружного воздуха, уменьшается доступ воздуха в вентиляционный короб с помощью заслонок. Во время аккумуляции холода толщина намораживаемого на боковых стенках емкостей льда контролируется визуально через открытую створку крышки. При необходимости уменьшения толщины намороженного льда с помощью заслонок прекращается доступ в вентиляционный короб наружного воздуха и открываются створки крышки и передней стенки. Через открытые створки поступает тепло, и толщина льда уменьшается.

Применение этой холодильной установки позволяет: сэкономить расходы электроэнергии в год на 3 тыс. квтч; увеличить срок службы электрической во-доохлаждающей установки на 66 %.

The author shows the advantages of new ехрепте^а! refrigerating plant with use of cold outside air Far North regions.

Видовой состав микрофлоры молочной железы при маститах

Л.А. Коростелева, кандидат сельскохозяйственных наук С.В. Кристойть

Самарская государственная сельскохозяйственная академия

С.В. Котенкин, председатель СПК «Прогресс», Волжского района Самарской области

В настоящее время известно около 90 видов условно патогенных микроорганизмов -возбудителей мастита. В молочную железу микроорганизмы проникают через сосковые каналы (галактогенный путь), раны (лимфогенный путь), и по крови (гематогенный путь) из других органов при развитии в них воспалительных процессов

(эндометриты, гастроэнтериты) (Свирденко Г.М., 2003). По мнению Ивашуры А.И., в подавляющем большинстве случаев основную роль играет галактогенный путь. Наиболее важным и частыми возбудителями мастита являются стафилококки, стрептококки, эшерихии, псевдомонады, коринебактерии, ми-коплазмы, кампилобактерии и

др. Однако принято считать, что основные возбудители мастита — патогенные стафилококки и стрептококки, наиболее часто выделяемые из молока и секрета вымени больных коров. Основным возбудителем мастита (28-85 % случаев) оказался именно Str. agalactiae, отнесенный к серологической группе В. Str. Agalactiae, по сравнению с другими стрептококками он значительно лучше приспособился к условиям существования в молочной железе больных маститом коров, где хорошо размножается по сравнению с обычным молоком (M/ Maikaineski и др. 1968). Но основным резервуаром стрептококков группы В являются трещины кожи сосков и их каналы, откуда они передаются от соска к соску, от коровы к корове, прежде всего в процессе доения (А.И. Иваруша,

1991), больное животное считается основным источником заражения. Кроме Str. agalactiae, при мастите выделяются также стрептококки групп С (Str. dis-galactiae), E (Str. uberis), A (Str. pyogenes) и др.

Так, Оксамитный Н.К. (1982) в исследованиях выделил из молока больных маститом коров 226 штаммов стрептококков, причем 78,32 % из них принадлежали к группе В, 10,62 % — С и 9,28 % — к группе А.

Все группы стрептококков, которые могут вызывать болезнь у животных, у людей вызывают заболевания дыхательных путей (ангина, скарлатина, фарингиты и др.), септические процессы (септицимия и пиемия, эндокардит), а также раневые и гнойные инфекции. Стрептококки группы В — специфические возбудители мастита коров — также имеют отношение к возникновению таких болезней человека, как эндокардиты, менингиты у новорожденных, заболевания печени и др. До 50-х годов ХХ века считалось, что крупный рогатый скот крайне не восприимчив к стафилококковым инфекциям. Позже это мнение резко поменялось. По данным ряда авторов золотистый стафилококк — наиболее частый возбудитель среди всех стафилококков: на его долю приходится от 9,6 до 89 % случаев, причем мастит, вызываемый золотистым стафилококком наиболее опасен, поскольку его трудно ликвидировать из-за его устойчивости к действию антибиотиков, к тому же он способен паразитировать внутри клеток. St. aureus вызывает мягкое воспаление и понижение молочной продуктивности, без проявления явных признаков болезни (субклиническая форма), что опасно в плане бесконтрольного поступления золотистых стафилококков в молоко. В отличие от стрептококка он содержится в окружающей среде, на коже сосков вымени, руках дояров и при соответствующих условиях способен проникать в молочную железу. Маститы

этой этиологии возникают как в лактационный, так и в сухостойный периоды. Стафилококки выделяют энтеротоксины, вызывающие стафилококковый энтеротоксический гастроэнтерит. А.Ф. Билибин отмечает, что после приема пищи, зараженной стафилококками, заболевает до 9о % людей. При этом пищевые продукты, обсемененные стафилококком и содержащие энтеротоксин, по органолептическим характеристикам не отличаются от доброкачественных.

Последнее время у крупного рогатого скота часто возникают маститы, причиной которых является кишечная палочка. Имеются работы, которые свидетельствуют о том, что молоко и молочные продукты, обсемененные кишечной палочкой, вызывают пищевые токсикоинфек-ции. Поэтому крупной рогатый скот считают одним из основных источников колиинфекции человека.

Из представителей семейства Enterobacteriaceae воспаление вымени коров чаще всего вызывают микроорганизмы, относящиеся к родам Escherichia и Klebsiella. Колиформные маститы возникают при проникновении возбудителя галактогенным путем. Внешняя контаминация имеет более важную роль, чем перенос возбудителя от коровы к корове. Воспалительный процесс обычно развивается быстро, иногда в течение 4 ч.

Процент заболеваний вымени, вызываемый дрожжами и дрожжеподобными организмами, в последнее время значительно увеличился. Это, по мнению многих исследователей, связано с широким применением антибиотиков для лечения маститов. Впервые в России из молока пораженных долей вымени выделили грибы из рода Candida.

Кроме перечисленных выше возбудителей, мастит могут вызывать листерии, атипичные микобактерии, лучистые грибки, хламидии, кампилобакте-рии, гемофильные микроорганизмы.

семененность проб молока от здоровых и больных маститом коров определяли в научно-исследовательской лаборатории животноводства СГСХА в соответствии с ГОСТ от 9225-84 «Молоко и молочные продукты. Методы микробиологического анализа». Бактериальную обсе-мененность молока определяли по продолжительности изменения окраски резазурина. Результаты исследований представлены в таблице 1.

Согласно проведенным исследованиям, пробы молока, полученные от здоровых коров, соответствовали высшему классу, пробы секрета из больных долей вымени коров с субклинической формой мастита

— первому и третьему классу, от коров с клинической формой

проб молока от здоровых и больных маститом коров был проведен в Самарской областной ветеринарной лаборатории. Изучение микрофлоры молока проведено в соответствии с Методическими указаниями №115-63 по бактериологическому исследованию молока и секрета вымени коров от 1983 г. и методическим рекомендациям по микробиологическому исследованию молока и секрета вымени коров для диагностики мастита от 1994 г. Данные проведенных исследований представлены в таблице 2.

Проведенные бактериологические исследования проб секрета от коров с различными формами мастита показали, что все они были контаминированы различными микроорганизмами. Таким образом, из проб секрета, полученного из больных долей, выделили стрептококки серологических групп В и С, золотистый стафилококк, энтеробактерии вида Escheri-chia coli серотипов 01 и 0117 и грибы рода Candida. Причем в пробах от коров с субклинической формой мастита были выделены Str. agalactiae, Str. disgalactiae, Staph. аureus, а в пробах от коров с клинической формой мастита Staph. аureus, Staph. intermidium, Staph. eped-

1. Определение качества молока по резазуриновой пробе

Пробы молока от коров Продолжительность обесцвечивания резазурина (ч) Окраска молока Количество бактерий в 1 л молока Класс

Здоровых 1,5 Серо-сиреневая со слабым серым оттенком до 300 тыс. Высший

С субклинической формой мастита 1 Бледно-розовая от 4 до 20 млн III

1 Сиреневая от 300 до 500 тыс. I

С клинической формой мастита 1 Бе

Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.

BAIMISHEVA D.SH., БАЙМИШЕВА Д.Ш., КОРОСТЕЛЕВА Л.А., КОТЕНКОВ С.В. — 2007 г.

БОЕВ ВЯЧЕСЛАВ ЮРЬЕВИЧ, КОЦАРЕВ ВЛАДИМИР НИКОЛАЕВИЧ, ПАПИН НИКОЛАЙ ЕФИМОВИЧ — 2015 г.

источник

Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему: Характеристика микрофлоры и патоморфологические изменения молочной железы при маститах у свиноматок

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Характеристика микрофлоры и патоморфологические изменения молочной железы при маститах у свиноматок

СЕМЕНОВ АНАТОЛИЙ ВЛАДИМИРОВИЧ

ХАРАКТЕРИСТИКА МИКРОФЛОРЫ И ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ПРИ МАСТИТАХ У СВИНОМАТОК

16.00.03 — ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

16.00.02 — патология, онкология и морфология животных

степени кандидата ветеринарных наук

Работа выполнена на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии Института ветеринарной медицины Омского государственного аграрного университета.

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук

Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ,

доктор ветеринарных наук, профессор Н.М. Колычев

доктор биологических наук, профессор Т.Н. Сидоров

доктор ветеринарных наук, профессор Л.И. Дроздова

Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО РОССХ

Зашита диссертации состоится 20 декабря 2004 года в 1000 часов на заседании диссертационного совета Д 220.050.03 при ФГОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет» в Институте ветеринарной медицины ОмГАУ по адресу:

644122, г. Омск- 122, ул. Октябрьская, 92, тел./факс 24-15-35,25-05-49

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Омского государственного аграрного университета

Автореферат разослан 2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

кандидат ветеринарных наук, доцент ^Ц-я>ЖабинН.П.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Свинина занимает первое место в объеме мирового производства мяса. Свиноводство является одной из наиболее высокоэффективных и рентабельных отраслей животноводства, успешное развитие которой зависит от получения жизнеспособного приплода и здорового молодняка (Кононов В.Н., 2000).

Перевод свиноводства на промышленную технологию резко изменил условия содержания животных, а воздействие разнообразных неблагоприятных факторов привело к снижению резистентности и увеличению числа послеродовых болезней свиноматок, среди которых значительное место занимает мастит (Селиванов А.В., Ивановский Э.В., Борисевич Ю.Ф., 1984). Вследствие мастита у свиноматок снижается или полностью прекращается секреция молока, ухудшается качество единственного и незаменимого источника питания поросят в первые дни жизни — молозива. Это приводит к высокой заболеваемости новорожденных поросят диспепсией и гибели приплода (до 80%). Мастит является одной из основных причин выбраковки свиноматок и достигет 25% от общего числа случаев (Спиридонов B.C., 1978; Черкасова А.В., Данилко Л.М., Понамарева М.И., Гладун Н.П., 1978: Мисайлов В.Д.. Шахов А.Г.. Лесных В.И., 1985: Мисайлов В.Д., Коновалов Н.Н., Сотников А.В., 1994: Шахов AT., 2001; Bertschinger H.U., Burgi E., Eng V., Wegmann P., 1990).

Одним из ведущих этиологических факторов в возникновении маститов принято считать контаминацию молочной железы условно-патогенной микрофлорой. Серьезную проблему представляют ассоциации условно-патогенной микрофлоры, где этиологическую основу составляют несколько видов возбудителей (Вербитский П.И., 1995; Шахов А.Г., 2001).

При гнойно-воспалительном процессе, обусловленном условно-патогенной микрофлорой, в молочной железе свиноматок происходят необратимые изменения, причем одни и те же виды возбудителей могут вызывать различные формы мастита (Черкасова А.В.. Пономарева М.И., 1965).

До настоящего времени нет единого мнения о том, какие условно-патогенные микроорганизмы играют ведущую роль в патологии молочной железы у свиноматок. Недостаточно данных о роли ассоциаций микроорганизмов в развитии послеродовых осложнений и влиянии этой микрофлоры на функцию молочной железы свиноматок.

Все вышеизложенное послужило основанием для выбора темы научно-исследовательской работы, определения цели и задач исследования.

Диссертационная работа является самостоятельным разделом комплексной темы кафедры

ИВМ ОмГАУ «Разработка методов и средств диагностики, профилактики и лечения инфекции мочеполовой системы и молочной железы у свиней» (№ гос. регистрации 01.2.00100603).

Цель исследования — определить видовой состав и основные биологические свойства микроорганизмов, выделенных от свиноматок при послеродовых маститах, а так же патоморфологические изменения в молочной железе.

1. Установить распространение маститов в послеродовой период среди свиноматок в хозяйствах Омской. Тюменской и Томской областей:

2. Определить видовой состав и биологические свойства выделенных культур микроорганизмов;

3. Определить устойчивость выделенных культур к ряду химио-терапевтических препаратов;

4. Установить патоморфологические изменения в тканях молочной железы у свиноматок при маститах;

5. Разработать методы диагностики послеродовых маститой у свиноматок.

Научная новизна. Установлено, что послеродовые маститы свиноматок имеют широкое распространение. В хозяйствах Омской, Тюменской и Томской областей количество свиноматок заболевших маститом после опороса варьирует от 3,4% до 86,9% животных. Результаты исследований расширяют и дополняют сведения о видовом составе микрофлоры молочной железы свиноматки. Так, наиболее часто при мастите свиноматок выделяются S.aureus (28,1%) и E.coli (15,3%). в удельном весе ассоциативной микрофлоры преобладают Staphylococcus и Streptococcus (35.7%). Гнойно-катаральный, серозный, геморрагический и фибринозный воспалительные процессы в молочной железе свиноматок чаще обусловлены ассоциациями Staphylococcus + Streptococcus, абсцедируюший мастит — ассоциациями, включающими микроорганизмы — E.coli, P.vulgaris и Ps. aeruginosa.

Проведенные патоморфологические исследования молочной железы свиноматок показали, что преобладают хронически протекающие, смешанные формы мастита, характеризующиеся гнойно-катаральным и ката-рально-геморрагическим воспалением.

Т^р?™»»?«« и «рятгнческая значимость работы.

Результаты исследований положены в основу методических рекомендаций «Диагностика маститов бактериальной природы у свиноматок» (утверждены ГУСХ адм. Омской области 26.06.03, пр. № 5).

Основные материалы диссертационной работы используются в учебном процессе Ижевской государственной сельскохозяйственной академии: Уральской государственной академии ветеринарной медицины:

Томского государственного сельскохозяйственного университета: Санкт Петербургской Государственной Академии ветеринарной медицины

Материал, изложенный в диссертации, может быть использован при составлении соответствующих разделов учебников и руководств по микробиологии для студентов ветеринарных специальностей, а так же для практической работы специалистов районных и областных ветеринарных лабораторий.

Апробация работы. Основные материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы диагностики, профилактики и терапии болезней животных в современных условиях» (Барнаул, 2001); Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии (Казань, 2002); Российской научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины» (Новосибирск, 2003); Международной научно-производственной конференции по актуальным проблемам агропромышленного комплекса (Казань. 2003); ежегодных научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов ИВМ ОмГАУ (2002, 2003).

Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано шесть научных статей.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 139 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Работа иллюстрирована 15 таблицами. 37 рисунками. Список литературы включает 191 источник, из них 34 зарубежных авторов.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Характеристика микрофлоры при маститах свиноматок в послеродовой период.

2. Устойчивость выделенных микроорганизмов к химио-терапевтическим препаратам.

3. Патоморфологические изменения в молочной железе свиноматок при маститах.

4. Диагностика послеродовых маститов свиноматок обусловленных ассоциациями микроорганизмов.

Работа выполнена в 2001-2004 гг. на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии Института ветеринарной медицины Омского государственного аграрного университета в рамках НИР «Разработка методов и средств диагностики, профилактики и лечения бактериальных инфекций мочеполовой системы и маститов свиноматок (№ гос. регистрации 01.2.00100603).

Первичный материал для микробиологического исследования был получен от свиноматок пород ландрас и крупная белая с клиническими признаками мастита в хозяйствах Омской, Тюменской и Томской областей.

Для прижизненного бактериологического исследования молочный секрет сдаивали в стерильные пробирки, после предварительного обмывания пакета железы теплой водой и обработки 70% раствором этилового спирта.

Культуральные свойства микроорганизмов изучали на обычных и специальных питательных средах, учитывая скорость и характер роста, форму, размер, края колоний, рельеф, поверхность, структуру колоний, прозрачность и блеск. Консистенцию и пигментообразование определяли на плотных средах. В жидких питательных средах определяли наличие или отсутствие поверхностной пленки и пристеночного кольца, прозрачность среды, образование осадка и его характер.

Морфологические и тинкториальные свойства выделенных микроорганизмов изучали в мазках-препаратах, окрашенных по Граму, Цилю-Нильсену, Шефферу-Фултону, Ольту. Подвижность микроорганизмов определяли в препаратах «висячая капля». Наличие цитоплазматических включений выявляли окраской мазков-препаратов по методу Нейссера. Измерение микробных клеток проводили в мазках, окрашенных по Граму. с помощью светового микроскопа фирмы «Jenaval» и микрометра окулярного винтового (МОВ-1).

В зависимости от морфологических и культуральных свойств выделенные культуры пересевали на элективные среды: Эндо, Сабуро, ЖСА. КБА, МПБ с содержанием 6.5% NaCl. Для идентификации выделенных культур микроорганизмов использовали биохимические методы.

Ферментативную активность определяли путем посева культур в полужидкие углеводные среды Хью-Лейфсона с индикатором Андреде.

По результатам микроскопического, бактериологического и биохимического исследований делали заключение о родовой и видовой принадлежности выделенных микроорганизмов, используя «Определитель бакте-

рий Берджи» (1997) и «Определитель зоопатогенных микроорганизмов» (Сидоров М. А. и др.. 1995).

Резистентность выделенных культур микроорганизмов к химиотера-певтическим средствам изучали дискодиффузионным методом.

Патогенность выделенных культур микроорганизмов изучали постановкой биологической пробы на белых мышах. Для эксперимента было сформировано семь групп, по шесть животных в каждой. Животных заражали внутрибрюшинно. взвесью односуточных агаровых культур, в дозе 1,0х109 и 1,5ХЮ9 м.т., в объеме 1 мл. Животным контрольной группы вводили внутрибрюшинно физиологический раствор в том же объеме. Определение LDso/^ проводили по методу Рида-Менча в модификации Троицкого В.Л.( 1950).

Для гематологических исследований брали кровь у здоровых (n=10) и с клиническими признаками мастита (n=10) свиноматок после опороса. Исследования проводили по общепринятым методикам.

Для цитологического исследования молочного секрета использовали окраску мазков-препаратов азур-эозином по Романовскому-Гимзе, с фиксацией в 0,25% растворе метилового спирта.

Материал для гистологического и гистохимического исследований фиксировали в 12%-ном растворе нейтрального формалина и жидкости Карнуа. Обезвоживание проводили в спиртах возрастающей концентрации. Уплотнение и заливку тканей проводили, с использованием парафина. Срезы толщиной 7-8 мкм изготавливали на санном микротоме марки МС-2. Морфологические исследования проводили на срезах, окрашенных гематоксилином-эозином, коллагеновые волокна выявляли окраской по Маллори (Меркулов ГА. 1961). С целью дифференциальной характеристики углеводов использовали ШИК-реакцию по Шабадашу (1947). реакцию с альциановым синим — по Стидмену (Э. Пирс. 1962), основным коричневым — по Шубичу (1961).

Статистическую обработку полученного цифрового материала проводили на ПК с помощью программы Microsoft Excel 98.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Распространение и некоторые клинические аспекты проявления маститов у свиноматок в хозяйствах Омской, Тюменской и Томской областей.

В результате проведенных исследований нами установлено, что количество свиноматок, с клиническими признаками мастита в послеродовой, в хозяйствах разных районов варьирует. Так, максимальное количество заболевших было в ЗАО «Цветнополье», Азовского района — 86.95%

животных, а минимальное — в ЗАО «Племзавод-Юбилейный». (г. Ишим) -3.74%. Заболеваемость свиноматок клинически выраженным маститом составила 21.5 на 100 животных (табл. 1).

При клиническом исследовании 862 свиноматок, было выявлено 186 больных маститом. У 29 (15.59%) животных мастит классифицирован как серозный, у 98 (52.68%) — катарально-гнойный. у 46 (24.73%) -абсцедирующий. у девяти (4.8%) — геморрагический, и у четырех (2.15%) —фибринозный.

Результаты клинического исследования свиноматок после опроса

Количество Выявлено с клиниче-

Наименование хозяйств исследованных скими признаками

ЗАО «Племзавод-Юбилейный» 455

ЗАСХО «Племзавод Северо- 9 5

ЗАО «свинокомплекс Томский» 100 20

У свиноматок, больных маститом чаще воспалению подвержены задние брюшные пакеты (52,14% случаев). 32% случаев приходится на единичное поражение пакетов. Первая пара грудных пакетов молочной железы поражается в меньшей степени (2,15%) (рис. 1).

Свиноматки наиболее подвержены заболеванию маститом в возрасте от 2-х до 3-х лет — количество заболевших в этом возрасте составило 24,92 %. менее от 3-х до 4-х лет (15.41%), от 4-х лет и старше количество заболевших маститом возрастает и составляет 23,98%.

Цитологические исследования показали, что микроскопическая картина молочного секрета от здоровых свиноматок характеризуется умеренным количеством жировых шариков, преимущественно средних размеров, которые располагаются чаще скоплениями, особенно по краям мазка В молочном секрете, отмечали небольшое количество нейтрофильных лей-

коцитов (5 — 10), которые так же располагались скоплениями. Среднее количество лейкоцитов в поле зрения составляло 8.7±1,76, некоторые из них содержали жировые включения различного размера. У большинства лейкоцитов ядра находились в состоянии распада, в виде отдельных фрагментов.

У свиноматок, больных маститом, микроскопическая картина молочного секрета характеризовалась большим количеством, равномерно расположенных нейтрофильных лейкоцитов, (30-80 в поле зрения), в среднем 61,6±18,87 клеток в поле зрения. Лейкоциты имели различную структуру: они либо сохраняли присущие им морфологические признаки, либо представляли разрушающиеся клетки. Кроме того, в молочном секрете резко снижалось количество жировых шариков, до 3-5 в поле зрения.

Частота поражений молочных пакетов при мастите у свиноматок

Первая пфа Вторая пара Передние Средние брюшше Задние брючпюе грудных пакетов грудных пакетов брюшные пакеты пакета пакеты

В результате гематологического исследования периферической крови здоровых свиноматок после опороса, установлено небольшое снижение количества эритроцитов (5.91±0.123 10п/л). При этом содержание гемоглобина в крови составило 109.23±3,11 г/л. У свиноматок с клиническими

признаками мастита наблюдали значительное снижение количества эритроцитов (3.75±0,31 1012/л), а содержание гемоглобина уменьшалось до 62,84 ±5.67 г/л. СОЭ у всех больных животных была увеличена 25.6±1,51 мм/ч.

У здоровых, супоросных свиноматок количество эозинофилов составляло 2.1% 1,1. тогда как у животных с клинически выраженными признаками мастита этот показатель был значительно выше — 10.8% ±1,48.

Изменения лейкоцитарной формулы крови у свиноматок с признаками мастита, характеризовались увеличением количества палочкоядер-ных нейтрофилов до 6.42%±0,34, и незначительным изменением количества сегментоядерных — 43,4%±2,46, тогда как у здоровых животных количество сегментоядерных составляло — 42,7%±2.66. В крови больных свиноматок выявлен лейкоцитоз 20,45±1.16″109/л и снижение количества лимфоцитов до 44,14% ±0,63.

Содержание моноцитов в крови больных животных уменьшалось до 1,19%±0,307.

Морфологические показатели крови здоровых и больных маститом

Видовой состав микрофлоры молочного секрета при мастите у свиноматок

Из 305 проб молочного секрета от 186 свиноматок больных маститом было изолировано 587 культур микроорганизмов. В микробном пейзаже преобладали ассоциации микроорганизмов — 519 культур из 587.

Изучение микрофлоры молочной железы выявило преобладание грамположительных микроорганизмов 72.23%. Из молочного секрета преимущественно выделяли S.aureus (54.09%). St.agalactiae (22.29%). St.pyogenes (18.03%). S.aureus выделяли как в ассоциациях (84.85%). так и в монокультуре (15.15%). Стрептококки изолировали в основном в ассоциациях и реже в монокультурах.

Грамотрицательная микрофлора была представлена в основном Kcoli (29,05%) и P.vulgaris (17,37%), которые чаще выделяли в ассоциациях (26,22% и 14,09% соответственно).

В удельном весе ассоциативной микрофлоры молочного секрета больных маститом свиноматок ассоциации Staphylococcus + Streptococcus составили 35,73%, Exoli + Proteus 6,55%. Staphylococcus + Е.coli 5.57%, Staphylococcus + Streptococcus + ß.coli 4,26%.

Количественное соотношение культур микроорганизмов, выделенных при маститах у свиноматок

Микроорганизм Общее кол-во выделенных культур % от 305 проб Выделено

в монокультуре в ассоциациях

S. aureus 165 54,09 25 15,15 140 84,85

S.epidermidis 46 15,08 — — 46 100

S.haemoHticus 48 15,73 5 10,41 43 89,59

St.agalactiae 68 22,29 2 2,94 66 97,06

Stpyogenis 55 18,03 8 14,54 47 85,46

Stdysgalactiae 41 13,44 4 9,75 37 90,25

Rcoli 90 29,05 10 11,11 80 88,89

P. vulgaris 53 17,37 10 18,86 43 81,14

P. mirabilis 4 1,31 — — 4 100

Ps.aeruginosa 12 3,93 3 25 9 75

Kb. pneumoniae 4 1.31 — — 4 100

Анализ полученных данные свидетельствуют, о том что в молочной железе серозный, гнойно-катаральный, геморрагический и фибринозный воспалительные процессы обусловлены ассоциациями грамположительной кокковой

микрофлоры, при абсцедирующем мастите в ассоциациях преобладает грамот -рицательная микрофлора, в частности E.coli и Proteus.

У животных с гнойно-катаральным маститом было выделено 79 ассоциаций Staphylococcus + Streptococcus, восемь — Staphylococcus — Streptococcus + E.coh, шесть ассоциаций Staphylococcus + Streptococcus + Proteus, Streptococcus + E.coli и Staphylococcus + Staphylococcus, пять — Staphylococcus + E.coli, четыре — E.coli + Proteus, в единичных случаях было выделено еще десять различных ассоциаций. При абсцедирующем мастите наиболее часто изолировали Staphylococcus + E.coh (14), E.coli + Proteus (13), Staphylococcus т E.coli + Proteus (8), по четыре ассоциации — Staphylococcus + Streptococcus + E.coli, Streptococcus + E.coh и Staphylococcus + Streptococcus + Pseudomonas. При серозном мастите было выделено всего 18 ассоциаций, из них десять Staphylococcus + Streptococcus, пять Staphylococcus + Pseudomonas. Геморрагическая и фибринозная формы мастита в 90% случаев характеризовались наличием в молочном секрете ассоциации Staphylococcus + Streptococcus.

Ассоциации микроорганизмов выделенных при различных формах мастита у свиноматок

Выделено культу р (форма мастита) [

Ассоциации Общее количество Серозный 1 ! i : ж I , I ° 5 i 1 S S , о 2 5 £

Staphylococcus-rStreptococcus 109 10 ! 79 •ч 3 13 4 t

Staphylococcus+Streptococcus+E coli 13 — ■ 8 4 1 1 1

Staphylococcus+ Proteus 3 3 _ i

Staphylococcus* E.coh 20 — 5 14 — i I

Staphylococcus+E.coh+ Proteus И — з 8

Staphylococcus+Streptococcus+ Proteus 7 I ‘ 6

Streptococcus+ E.coh 10 — 6 4 — ! — 1

Staphylococcus^ Pseudomonas 5 5 — ! — 1

Staphylococcus+Streptococcus+Pseudomonas 4 — — 4 — i — 1

Streptococcus+■ Klebstella 4 — 3 1 * ! » t

Streptococcus+E coli- Prteus 1 „ — 1 . 1 _ .

Staphylococcus+Streptococcus+Klebsiella I 1 — i — :

Staphylococcus-r Klebsiella 1 1 —

Staphylococcus ^Staphylococcus 6 6 — -i.i

Патогенность выделенных культур микроорганизмов при экспериментальном заражении лабораторных животных

Для эксперимента были взяты шесть культур микроорганизмов, которые мы наиболее часто высевали при микробиологическом исследовании молочного секрета желез больных маститом свиноматок Staphylococ-cus aureus. Streptococcus agalactiae, E.coli. Proteus vulgaris. Pseudomonas aeruginosa. Klebsiella pneumoniae.

Результаты проведенных исследований показали, что для S.aureus LDso/ыл = 0.5: для St.agalactiae LDso/мл = 1.75: для E.coli LD50„j, = 1: для P. vulgaris LDjoxm = 2; для Ps.aeruginosa LDjo-w, = 1.25; для Kb. pneumonia LDso/мл = 1,75 x 109 м.т./мл

При патологоанатомическом вскрытии трупов мышей, зараженных культурой S.aureus, обнаруживали точечные кровоизлияния в подкожной клетчатке. увеличение селезенки и печени, острое расширение сердца. В селезенке, печени, легких, почках наблюдали множество мелких абсцессов.

У мышей, зараженных культурой St.agalactiae обнаруживали обезвоживание организма, кровоизлияния в подкожной клетчатке и на паренхиматозных органах, увеличение селезенки и дистрофию печени.

При вскрытии трупов мышей зараженных культурой E.coli.. обнаруживали кровоизлияния в подкожной клетчатке и кишечнике, увеличение печени и селезенки, острое расширение сердца, абсцесс в месте введения суспензии и в паренхиматозных органах (печень, легкие, селезенка, почки).

Кровоизлияния в подкожной клетчатке и кишечнике, наличие крови в брюшной полости, увеличение селезенки, единичные абсцессы в кишечнике и почках, отмечали при вскрытии трупов мышей зараженных культурой P.vulgaris.

У мышей зараженных культурой Ps.aeruginosa, при вскрытии обнаруживали кровоизлияния в подкожной клетчатке и на паренхиматозных органах. Селезенка и печень были увеличены, обнаруживали множественные абсцессы.

При вскрытии мышей, зараженных, культурой КЬ.рпеитота отмечали обезвоживание организма животного, кровоизлияния в подкожной клетчатке. В печени, легких и кишечнике обнаруживали единичные абсцессы. Так же, отмечали увеличение селезенки, расширение сердца и дистрофию печени.

Устойчивость микрофлоры к химиотерапевтическим препаратам

Для определения устойчивости микрофлоры секрета молочных желез, больных маститом свиноматок использовали химиотерапевтические препараты, наиболее часто применяемых в ветеринарной практике.

Результаты исследований свидетельствуют о том. что большинство выделенных культур микроорганизмов высокочувствительны к цефопера-зону и офлоксацину резистентны к оксацилину, линкомицину и эритромицину и слабочувствительны к пенициллину.

Резистентность к некоторым химиотерапевтическим препаратам микрофлоры молочной железы выделенной в лактационный период у свиноматок больных маститом

X X x X г X X X X а Я X о X

Микроорганизмы Ж о x я X x л 1 h & si s s я X s X —f 3 X ч ц X 5 X а. и> 3 О, ZS X s

с? s Л x x S ь н s о s s 3 о и S =г г; X •© £ и 1 о a Семенов, Анатолий Владимирович :: 2004 :: Омск

1.1 Морфофункциональные особенности молочной железы v свиноматок.

1.2 Микрофлора секрета молочной железы при маститах у свиноматок.

1.3 Факторы, способствующие развитию послеродовых маститов.

1.5 Клиническое проявление маститов у свиноматок.

1.6 Патоморфогистологические изменения тканей молочной железы при маститах.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Распространение и некоторые клинические показатели маститов у свиноматок Омской, Тюменской и Томской областей.

3.2 Соотношение и удельный все микрофлоры в этиологии мастита у свиноматок.

3.3 Характеристика родов микроорганизмов.

3.4 Устойчивость микрофлоры к химиотерапевтическим препаратам.

3.5 Патогенность микрофлоры при маститах у свиноматок.

3.6 Патоморфологические и гистохимические изменения молочной железы при маститах у свиноматок.

3.7 Диагностика клинически выраженных маститов у свиноматок.

4. Обсуждение полз’ченньгх результатов.

6. Практические предложения.ТТ

Введение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Семенов, Анатолий Владимирович, автореферат

емя свшшна занимает первое место в объеме мирового производства мяса. Свиноводство является одной из наиболее высокоэффективных и рентабельных отраслей животноводства, успешное развитие которой зависит от получения жизнеспособного приплода и здорового молодняка (Кононов В.Н., 2000).

Перевод свиноводства на промышленную технологию резко изменил условия содержания животных, а воздействие разнообразных неблагоприятных факторов привело к снижению резистентности и увеличению числа по-^ слеродовых болезней свиноматок, среди которых значительное место занимает мастит (Селиванов А.В., Ивановский Э.В., Борисевич Ю.Ф., 1984). Вследствие мастита у свиноматок уменьшается или полностью прекращается секреция молока, ухудшается качество единственного и незаменимого источника питания поросят в первые дни жизни — молозива (Мисайлов В.Д., Коновалов Н.Н., Сотников А.В., 1994). Это приводит к высокой заболеваемости новорожденных поросят диспепсией и гибели приплода (до 80%) или отставанию их в росте и развитии от здоровых поросят аналогичного возраста на 3-4 кг (Черкасова А.В., Пономарева М.И., 1966; Черкасова А.В., Данилко * JI.M., Понамарева М.И., Гладун Н.П., 1978; Мисайлов В.Д., Гридяев Е.П.,

Сотников А.В., 1981; Мисайлов В.Д., Шахов А.Г., Лесных В.И., 1985; Шахов А.Г., 2001; Bertschinger H.U., Burgi Е., Eng V., Wegmann P., 1990).

По данным Шахова А.Г. (2001), послеродовой мастит у свиноматок считается преобладающим заболеванием и наносит экономический ущерб, исчисляющийся десятками миллиардов рублей. Так, на крупных свинофермах зарубежных стран заболевание маститом составляет до 70%, а в условиях российских свиноводческих хозяйств мастит регистрируется у 30-50% и более опоросившихся свиноматок (Пономарева М.И., 1965; Гыльбинов Г.Н., Божкова Г.П., Джурова Й.В., 1983; Лалов II.А., Наков С.Г., 1983; А Волынец Л.К., 1995; Шахов А.Г., 2001; Armstrong С.Н., Hooper В.Е.,

Martia C.E., 1978; Lutter К., 1983). Мастит является одной из основных причин выбраковки свиноматок и достигает 25% от общего числа случаев (Спиридонов Б.С., 1978; Черкасова А.В., 1978).

Причины послеродовых маститов у свиноматок многообразны, но, в конечном счете, они сводятся к тесному взаимодействию трех факторов: резистентности животных, микробного пейзажа и функционального состояния молочной железы.

Одним из ведущих этиологических факторов в возникновении послеродовых маститов принято считать контаминацию молочной железы условно-патогенной микрофлорой. Серьезную проблему в последние годы приобрели ассоциации условно-патогенной микрофлоры, где этиологическую основу составляют несколько видов возбудителей (Вербитский П.И., 1995; Шахов А.Г., 2001).

При гнойно-воспалительном процессе, обусловленном условно-патогенной микрофлорой, в молочной железе свиноматок происходят необратимые изменения, причем одни и те же виды возбудителей могут обуславливать различные формы мастита (Черкасова А.В., Пономарева М.И., 1966).

До настоящего времени нет единого мнения о том, какие условно-патогенные микроорганизмы играют ведущую роль в патологии молочной железы у свиноматок. Недостаточно данных о роли ассоциаций микроорганизмов в развитии процессов послеродовых осложнений и влияния этой микрофлоры на молочно-секреторную функцию свиноматок.

Диссертационная работа является самостоятельным разделом комплексной темы кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ИВМ ОмГАУ «Разработка методов и средств диагностики, профилактики и лечения инфекции мочеполовых путей и молочной железы у свиней» (№ гос.рсгистрации 01.2.00100603).

Цель и задачи исследования. Целью работы является определение видового состава и основных биологических свойств микроорганизмов, выделенных от свиноматок при различных клинических формах мастита, а так же патоморфологических изменений в молочной железе.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить распространение маститов в послеродовой период среди свиноматок в хозяйствах Омской, Тюменской и Томской областей.

2. Определить видовой состав и биологические свойства микроорганизмов, выделенных из секрета молочной железы здоровых и больных клинически выраженными формами мастита свиноматок.

3. Определить устойчивость выделенных культур к ряду химио-терапевтических препаратов.

4. Изучить патоморфологические и гистохимические изменения в тканях молочной железы у свиноматок при маститах.

5. Разработать средства диагностики послеродовых маститов у свиноматок.

Научная новизна. Установлено, что послеродовые маститы свиноматок имеют сравнительно большое распространение. В хозяйствах Омской, Тюменской и Томской области количество свиноматок заболевших маститом после опороса варьирует от 3,4% до 86,9% животных. Результаты исследований расширяют и дополняют сведения о видовом составе микрофлоры молочной железы свиноматки, так, наиболее часто при мастите свиноматок выделяются S.aureus (28,1%) и E.coli (15,33%), в удельном весе ассоциативной микрофлоры преобладают Staphylococcus и Streptococcus (35,73%). Гнойно-катаральный, серозный, геморрагический и фибринозный воспалительные процессы в молочной железе чаще обусловлены ассоциациями Staphylococcus + Streptococcus, абсцедирующий мастит ассоциациями включающие микроорганизмы — E.coli, Proteus vilgaris и Pseudomonas aeruginosa.

Проведенные сравнительные патоморфологнческие и гистохимические исследования молочной железы свиноматок показали, что преобладают хронически протекающие, смешанные формы мастита, характеризующиеся гнойно-катаральным и гнойно-геморрагическим воспалением.

Практическое значение работы. Результаты исследований положены в основу методических рекомендаций «Диагностика маститов бактериальной природы у свиноматок» (утверждены ГУСХ адм. Омской области от 26.06.03, пр. № 5).

Основные материалы диссертационной работы используются в учебном процессе Ижевской государственной сельскохозяйственной академии; Уральской государственной академии ветеринарной медицины; Томского государственного сельскохозяйственного университета.

Апробация работы. Основные материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы диагностики, профилактики и терапии болезней животных в современных условиях», (Барнаул, 200 J); Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии (Казань, 2002); Российской научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины», (Новосибирск, 2003); Международной научно-производственной конференции по актуальным проблемам Агропромышленного комплекса (Казань, 2003); ежегодных научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов ИВМ ОмГАУ (2002, 2003).

Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано шесть научных статей, методические рекомендации «Диагностика маститов бактериальной природы у свиноматок».

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 138 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов собственных исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Работа иллюстрирована 15 таблицами, 37 рисунками. Список литературы включает 191 источник, га них 34 зарубежных.

источник

Идентификация и репликация для вечного и безопасного хранения
информации в открытом доступе

Ассоциация интернет издателей и НП «Викимедиа РУ» при поддержке компании Яндекс проводят хакатон по использованию свободных данных и свободного контента

Для пользователей и организаций

Научная литература, учебные работы и произведения в свободном доступе

Открытые данные, открытое ПО, 3D-модели и других объекты в свободном доступе

Художественная литература, музыка, кино, изображения и публикации в СМИ в свободном доступе

Для историков и не только: около 300 000 оцифрованных страниц исторических документов доступно на сайте библиотеки Гарварда

Сумма вложений в разработку составит $10 млн со стороны каждой корпорации. Социальная сеть планирует привлечь больше организаций-спонсоров, чтобы в.

Поступившие за первые три месяца 2019 года 12 млрд рублей фактически уплатили сами же россияне, поскольку после введения данного налога он был вклю.

Музей оцифровал и выложил на Google Arts & Culture значительную часть своей коллекции

Что вы знаете об авторском праве и открытом доступе?

Ответьте на 12 вопросов и выясните, что вы знаете об авторском праве

Настоящее методическое пособие адресовано сотрудникам библиотек, музеев, архивов и галерей. Пособие содержит базовые сведения о всемирной энциклопедии Википедия и других проектах Викимедиа. В издании обобщён российский и мировой опыт взаимодействия движения Викимедиа с учреждениями культуры. Прив.

Опубликованы видеозаписи докладов российских и международных экспертов на тему открытого доступа и открытой науки

Опубликованы видеозаписи докладов российских и международных экспертов на тему открытого доступа и открытой науки.

В исследовании приведен обзор практики публикации выпускных квалификационных работ студентов и организации университетских репозиториев российскими вузами. В результате исследования было выявлены лучшие практики университетов, которые подробно описаны в соответствующем разделе книги, включая особ.

Производство и распространение электронных книг в России: структура, проблемы, перспективы

Анализ преимуществ и пути перехода к новой модели обмена знаниями

Требования к участникам системы и описание вариантов подключения к ней

Узнайте больше о портале Ноосфера, его целях и принципах работы.

Дополнительная информация для банков знаний и других организаций о партнёрстве и участии в проекте.

База данных с информацией о датах жизни авторов, их реабилитации и другой полезной информации о персонах.

Сервис для расчёта срока охраны авторских прав произведений науки и литературы.

Поддержка сайта осуществляется в рамках проекта «Ноосфера. Запуск». При реализации проекта используются средства государственной поддержки, выделенные в качестве гранта в соответствии c распоряжением Президента Российской Федерации от 05.04.2016 №68-рп и на основании конкурса, проведенного Общероссийской общественной организацией «Российский Союз Молодежи».

Поддержка и развитие платформы осуществляются в рамках проекта Цифровая платформа «Ноосфера» с использованием гранта Президента Российской Федерации на развитие гражданского общества, предоставленного Фондом президентских грантов.

Интернет-издание «Общественное достояние». Свидетельство о регистрации СМИ ЭЛ № ФС 77 — 70649.
Учредитель: Ассоциация интернет-издателей. Главный редактор: Трищенко Н.Д.

Содержимое сайта, если не указано иное, опубликовано в соответствии с лицензией Creative Commons «Attribution» («Атрибуция») 4.0 Всемирная (CC BY 4.0)

источник

Влияние введения орбенина дс запускаемым коровам на видовой состав и чувствительность микрофлоры секрета вымени после отела Ключникова я.С., Ефанова л.И., Климов н.Т., Шевелева е.Е.

ГНУ Всероссийский НИВИ патологии, фармакологии и терапии, Воронеж, Россия, e-mail: vnivipat@mail.ru

Профилактика и терапия мастита у коров в сухостойный период в пос-леднее время получила широкое распространение, так как в этот период не производится браковка молока. В период перестройки молочной железы более эффективно действуют антимикробные средства, можно достичь санации молочной железы, излечить хронически протекающий мастит.

Цель исследований – установить влияние интрацистернального введения Орбенина ДС запускаемым коровам на видовой состав и чувствительность микрофлоры секрета вымени после отела.

Материал и методы. Исследования проведены на 40 коровах красно-пестрой породы при классическом запуске коров. По результатам клинического обследования коров (температура, частота сердечных сокращений, частота дыхательных движений), молочной железы (симметричность четвертей, консистенция тканей), бактериологического исследования секрета вымени, определения в нем количества соматических клеток и учета реакции с 2% раствором масттеста все животные были разделены на две группы: клинически здоровые (n=20) и больные субклиническим маститом (n=20). Каждую группу животных распределили на две подгруппы. Коровам первой подгруппы (каждой группы) после последнего доения интрацистернально в каждую долю молочной железы ввели по 4,5 мл орбенина ДС (500 мг клоксациллина бензатиновой соли), животные второй подгруппы остались интактными и служили контролем. Перед введением препарата от 5 коров каждой группы взяли секрет молочной железы для лабораторного анализа. Повторные исследования секрета молочной железы выполнили на 4-6, 30-40 дни сухостойного периода и через 24 часа после отела.

Результаты и обсуждение. Микробная обсемененность секрета вымени клинически здоровых и больных маститом коров в запуске, в сухостойный период и после отела представлена в таблице.

Проведенными бактериологическими исследованиями секрета молочной железы больных субклиническим маститом животных первой подгруппы были выделены 4 вида микроорганизмов: Staph. aureus (20,0%), Ent. faecium (40,0%), Е. соli (20,0%), Staph. epidermidis (100,0%).

Выделенные культуры были в разной степени (40,0-100,0%) чувствительны к 8 испытанным лекарственным средствам: неомицину (100,0%), ампициллину, энрофлоксацину, рифампицину и стрептомицину (60,0%), фуразолидону, линкомицину и тетрациклину (40,0%), при этом усиление роста вызывали рифампицин и ампициллин в 40,0%, а линкомицин – в 20,0% случаев.

От больных субклиническим маститом животных второй подгруппы из секрета вымени изолировано 4 вида микроорганизмов: Staph. aureus (40,0%), Ent. faecium (40,0%), Е. соli (20,0%), Staph. epidermidis (40,0%).

Выделенная микрофлора была чувствительна к неомицину (100,0%), энрофлоксацину (80,0%), линкомицину (80,0%), тетрациклину (80,0%), стрептомицину (60,0%), фуразолидону (40,0%), ампициллину (40,0%), рифампицину (40,0%), при этом усиление роста (Еnt. faecium) вызывали: ампициллин, рифампицин, фуразолидон.

Следовательно, микрофлора, изолированная от больных субклиническим маститом коров, в 80,0% случаев представлена патогенными (Staph. aureus) и условно-патогенными (Е. соli, Еnt. faecium) возбудителями.

Из секрета молочной железы клинически здоровых животных первой подгруппы в конце запуска изолировано 3 вида микроорганизмов: Ете. faecium (20,0%), Cit diversus (20,0%), Staph. epidermidis (80,0%),

Видовой состав микроорганизмов, выделенных из секрета вымени запускаемых коров и после отела

Сроки и результат исследования

Больные субклиническим маститом с применением Орбенина ДС

Больные субклиническим маститом без применения Орбенина ДС

Клинически здоровые с введением Орбенина ДС

Клинически здоровые без введения Орбенина ДС

Выделенная микрофлора была чувствительна к неомицину (100,0%), энрофлоксацину (80,0%), линкомицину (80,0%), тетрациклину (80,0%), стрептомицину (60,0%), фуразолидону (40,0%), ампициллину (40,0%), рифампицину (40,0%), при этом усиление роста (Е. faecium) вызывали: ампициллин, рифампицин, фуразолидон.

Из секрета вымени клинически здоровых животных второй подгруппы выделены только спорообразующие сапрофитные микроорганизмы, чувствительные к восьми испытанным лекарственным средствам.

Следовательно, молочная железа клинически здоровых коров, уходящих запуск, лишь в 10% случаев обсеменена условно-патогенной микрофлорой (Еnt. faecium), а в остальных случаях (90,0%) выделена сапрофитная микрофлора, что может свидетельствовать о низкой естественной резистентности животных, уходящих в запуск.

При исследовании секрета вымени коров первой подгруппы на 4-6 и 30-40 день сухостойного периода только от одного животного был выделен Citrobacter diversus с множественной лекарственной устойчивостью к 8 испытанным лекарственным средствам, включая и неомицин, при этом три антибиотика (рифампицин, ампициллин, тетрациклин) усиливали его размножение.

Следовательно, введение Орбенина ДС приводит к санации молочной железы уже на 4-6 день сухостойного периода. В то же время, появление Citrobacter diversus, обладающего множественной лекарственной устойчивостью, на 4-6 день сухостойного периода и сохранение его в секрете молочной железы до отела может свидетельствовать о низкой естественной резистентности животного и возможности заселения молочной железы, циркулирующими в окружающей среде микроорганизмами.

При исследовании секрета вымени от клинически здоровых животных, подвергнутых обработке Орбенином ДС, установлено отсутствие роста микрофлоры на 4-6 и 30-40 дни сухостойного периода у трёх животных (60,0%), а от двух животных (40,0%) изолированы 2 грамположительных микроорганизма (Ent. faecium, Staph. epidermidis).

Чувствительность выделенной микрофлоры при этом увеличилась к рифампицину и ампициллину – с 40,0 до 100,0%, фуразолидону – с 40,0 до 66,7%, стрептомицину – с 60,0 до 66,7%, незначительно уменьшилась только к энрофлоксацину – с 80,0 до 66,7% и линкомицину – с 60,0 до 33,3%.

У больных субклиническим маститом животных и клинически здоровых животных, не подвергавшихся обработке антимикробным препаратом, в эти сроки существенных изменений в составе и чувствительности микрофлоры не произошло.

После отела у выздоровевших животных первой подгруппы из секрета молочной железы, также как и на протяжении сухостойного периода выделен только Cit. diversus, обладающий множественной лекарственной устойчивостью к антимикробным препаратам.

При исследовании молозива, взятого от коров, оставшихся больными субклиническим маститом на протяжении всего опыта, установлено, что через 24 часа после отела существенных изменений в составе и чувствительности микрофлоры не произошло.

У клинически здоровых животных, подвергнутых в запуске обработке Орбенином ДС, через сутки после отела из секрета молочной железы изолированы 2 вида микроорганизмов, в том числе: Staph epidermidis (60,0%), Ent. faecium (40,0%). Результаты проведенных исследований позволяют заключить, что выделение сапрофитной микрофлоры из всех проб секрета молочной железы через сутки после отела свидетельствует о низкой естественной резистентности организма новотельных коров, что подтверждается более низким уровнем в сыворотке крови, по сравнению с интактными животными, содержания общих иммуноглобулинов на 19,2%, бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови – на 18,4 и 34,9% соответственно.

Микробный пейзаж молозива клинически здоровых животных, не подвергавшихся обработке, был представлен 3 видами микроорганизмов, в том числе: Staph epidermidis (80,0%), Ent. faecium (20,0%), Ent. faecalis (20,0%). Данные микроорганизмы были слабо чувствительны к 13 из 16 испытанных лекарственных средств, эффективностью свыше 50,0% обладали только гентамицин (80,0%) и рифапицин (60,0%).

Следовательно, в первые сутки после отела, когда становится открытым соковый канал происходит заселение молочной железы сапрофитной и условно-патогенной микрофлорой, что может быть связано как с невысоким уровнем естественной неспецифической резистентности, так и с возросшей устойчивостью циркулирующей в окружающей среде микрофлоры.

Выводы. Коровы, заболевшие субклиническим маститом во время запуска и не обработанные Орбенином ДС по окончании лактации, в 90,0% случаев оставались больными на протяжении всего сухостойного периода и после отела, без существенного изменения видового состава микрофлоры. Введение больным субклиническим маститом коровам по окончании лактации Орбенина ДС приводит к санации молочной железы сухостойных коров в 80,0% случаев, в то же время не предохраняет от повторного заражения Citrobacter diversus. Обработка пролонгированным антимикробным препаратом клинически здоровых коров привела к санации молочной железы в сухостойный период 60,0% животных. У коров, ушедших в запуск клинически здоровыми и не подвергнутыми обработке Орбенином ДС, видовой состав микрофлоры на протяжении сухостойного периода практически не менялся (спорообразующие сапрофитные микроорганизмы). Однако в 1-е сутки после отела из секрета молочной железы этих животных выделена в основном сапрофитная (Staph. epidermidis – 80,0%, Ent. faecalis – 40,0%) и условно-патогенная (Ent. faecium – 20,0%) микрофлора. Введение Орбенина ДС запускаемым коровам приводит не только к санации молочной железы больных субклиническим маститом коров, но и к возрастанию чувствительности изолированной микрофлоры, что, по-видимому, связано с ликвидацией патогенной и условно-патогенной микрофлоры, обладающей множественной лекарственной устойчивостью.

INFLUENCE OF INTRODUCTION OF ORBENIN ДС TO STARTED COWS ON SPECIFIC STRUCTURE AND SENSITIVITY OF MICROFLORA OF THE SECRET OF THE UDDER AFTER OTEL

Klyuchnikova Ya.S., Efanova L.I., Klimov N. T., Sheveleva E.E.

All-Russian Veterinary Pathology, Pharmacology and Therapy, Research Institute, Voronezh, Russia

Introduction by sick subclinical mastitis to cows upon termination of Orbenin’s DC lactation of leads to sanitation of a mammary gland of cows after lactation endcows in 80,0 % of cases, at the same time doesn’t protect from repeated infection of Citrobacter diversus. Orbenin’s DC introduction of to started cows leads not only to sanitation of a mammary gland of patients by subclinical mastitis of cows, but also to increase of sensitivity of the isolated microflora that is apparently connected with elimination of the pathogenic and opportunistic microflora possessing multiple medicinal stability.

источник

МИКРОФЛОРА МОЛОКА И ПОЛОВЫХ ПУТЕЙ КОРОВ, БОЛЬНЫХ МАСТИТОМ И ЭНДОМЕТРИТОМ

Ефанова Л.И., Климов Н.Т., Давыдова В.В., Рубцова Ю.А., Крутских Ю.Ю.

ГНУ Всероссийский НИВИ патологии, фармакологии и терапии

Патология молочной железы, половых путей у коров имеет широ-кое распространение и нередко проявляется одновременно, либо одна сменяет другую. Причины развития этих поражений у животных много-образны, при этом, способствующие, предрасполагающие факторы за-частую имеют не меньшее значение, чем инфекционные.

Эффективная антибактериальная терапия, как одна из составляю-щих комплексной, не возможна без знания этих инфекционных патоге-нов, учёта их чувствительности к антибактериальным препаратам.

Целью исследований было сравнительное изучение видового со-става микроорганизмов, микроскопических грибов, контаминирующих молоко больных маститом и эндометритом коров, и их чувствительно-сти к препаратам.

Материал и методы. Проведено бактериологическое исследова-ние 71 пробы молока коров с клиническими и субклиническими форма-ми мастита из 13 хозяйств и 36 проб влагалищных смывов больных эн-дометритом животных из 8 хозяйств; микологическому исследованию подвергнуто 22 пробы молока и 21 проба влагалищных смывов. Бакте-риологические, микологические исследования, определение чувстви-тельности выделенных микроорганизмов, микроскопических грибов проводили по общепринятым методам.

Результаты исследования. Из 71 пробы молока выделено 112 культур микроорганизмов 13 видов и 5 видов микроскопических грибов из 22 исследованных проб. Из числа выделенных культур 61% пред-ставлены грамположительными микроорганизмами, остальные 39% — представителями семейства Enterobacteriaceae и Ps.aeruginosa (табл. 1). Доминирующими были Staphylococcus spp. – 38,7%, энтерококки – 22,3% (Ent.faecalis, Ent.faecium); доля энтеробактерий (E.coli, C.diversus, C.freundi, Ent.aerogenes, Pr.vulgaris) составила 28,4%, Ps.aeruginosa – 10,6%, Streptococcus гр. В – 7,1%.

Характер контаминации молока и влагалищных смывов больных коров

Монокультуры выделены из 23 проб молока (32,4%), в т.ч. в 30,4% изолирован Staph.aureus; 26,2%-Staph. epidermidis; 4,3%-Staph.haemolyticus, т.е. доля стафилококков составила в целом 60,9%, стрептококков-30,5% (Ent.faecalis-13,1%, Ent.faecium-13,1%, Streptococ-cus гр. В-4,3%), энтеробактерий-8,6% (E.coli-4,3%, C.diversus-4,3%).

Такие микроорганизмы, как Ps.aeruginosa, Pr.vulgaris, Staph. sap-rophyticus, Ent.aerogenes, C.freundi выделены в ассоциациях со стафило-, стрептококками, реже друг с другом; доля ассоциаций составила 79,5% от числа изолированных культур (67,6% от исследованных проб моло-ка).

В 81,7% от числа подвергнутых микологическому исследованию проб молока выделены микроскопические грибы, среди которых доми-нировали Asp.fumigatus и рода Candida (по 31,8%); доля A.flavus, Peni-cillium, Mucor в целом составила 18,1%.

Из 24 проб влагалищных смывов коров выделено 36 культур 5 видов микроорганизмов, среди которых доля E.coli составила 44,5% En-terococcus faecalis–25%, Ent.faecium–19,5%, C.diversus, Pr.vulgaris по 5,5% (табл. 1).

Ent. faecalis и Ent. faecium, Pr.vulgaris выделены только в ассоциа-циях, тогда как E.coli, C.diversus – в виде монокультур (37,5% и 50% соответственно) и ассоциаций (62,5% и 50%). В целом монокультуры изолированы в 29,2% исследованных проб, в остальных 70,8% — ассоци-ации.

Микологическими исследованиями 21 пробы влагалищных смывов в 66,6% случаев изолированы микроскопические грибы 5 видов: A. fumigatus (19%), Candida (28,6%), Penicillium (9,6%), Alternaria, Mucor (по 4,7%). Из 112 культур микроорганизмов, выделенных из молока больных коров, 25,9% были устойчивыми к 18 испытанным антибакте-риальным препаратам; чувствительными лишь к 1-му препарату было 16,1% культур, к 2-м – 7,1%, к 3 – 12,5%, к 4 и больше – 25,9% (табл. 2).

Множественной лекарственной устойчивостью обладали микроор-ганизмы, выделенные из 14 (19,7%) исследованных проб молока. Т.е. из одной пробы молока во многих случаях были изолированы 2-3 вида микроорганизмов, обладающих устойчивостью ко всем препаратам. В присутствии линкомицина, канамицина, ампициллина, пенициллина, ле-вомицетина у отдельных культур отмечалось усиление роста.

Микрофлора, изолированная из влагалищных смывов больных эндометритом коров, в 16,7% была устойчива ко всем испытанным пре-паратам, т.е. частота выявления таких резистентных видов микроорга-низмов была несколько меньше в сравнении с микрофлорой молока. Однако, если учесть, что чувствительными к 1 препарату было 22,2%, к 2-м – 25% культур из влагалищных смывов, то выбор препаратов для лечения был не менее ограничен, чем при лечении больных маститом коров. В целом из 24 проб в 4 (16,7%) выделенные микроорганизмы об-ладали множественной лекарственной устойчивостью. Микрофлора вла-галищных смывов в 100% случаев была устойчива к пенициллину, ка-намицину, эритромицину, рифампицину, линкомицину (из молока такие культуры не выделены).

Наиболее эффективными в отношении микрофлоры половых путей больных коров были норфлоксацин – 52,8% (от 44,4% в отношении Ent. faecalis до 75-100% у E.coli и Pr. vulgaris), гентамицин – 41,7% (от 0 — Pr. vulgaris до 50% у E.coli), энрофлоксацин – 33,3% (от 0 — Pr. vulgaris до 43,8% у E.coli). Около 20% культур были чувствительными к фурагину, неомицину, левомицетину, полимиксину, цефалексину.К остальным (тетрациклин, доксициклин, фуразолидон, ампициллин) чувствительны-ми было от 11 до 16% культур, к стрептомицину – 6,25%.

Чувствительность микрофлоры молока и влагалищных смывов коров к антибактериальным препаратам (%)

Примечание: Испытана чувствительность к фуразолидону, фурагину, пенициллину, неомицину, канамицину, тетрациклину, доксициклину, левомицетину, эритромицину, рифампицину, полимиксину, энрофлоксацину, норфлоксацину, ампициллину, линко-мицину, гентамицину, цефалексину, стрептомицину.

Микрофлора молока больных маститом коров была чувствительна в разной степени (от 17,9% до 55,4%) ко всем испытанным препаратам; наиболее эффективными были энрофлоксацин – 55,4% культур (от 25% Ps.aeruginosa до 100% Staph. aureus), гентамицин – 44,6% (от 8,3% Ps.aeruginosa до 62,5% Streptococcus гр. В), доксициклин – 38,4% (от 0% Ps.aeruginosa, Pr. vulgaris до 85,7% у E.coli), фуразолидон – 32,1-33%, фурагин, левомицетин, от 17,9% до 20,5% культур были чувстви-тельны и к остальным испытанным антибактериальным препаратам.

Выделенные из влагалищных смывов коров микроскопические грибы в 63,6% были чувствительны к нистатину, клотримазолу; 45,5% — кетоконазолу; 36,4% — амфотерицину В; 18,2% — интраконазолу. Из мо-лока больных маститом коров все выделенные микроскопические грибы были устойсивы к амфотерицину В; в 71,4% чувствительны к клотрима-золу, в 57,1% — нистатину, в 14,3% — кетоконазолу, интраконазолу.

Заключение. Стафилококки (Staph.aureus, Staph. epidermidis, Staph.haemolyticus, Staph. saprophyticus), стрептококки (Ent. faecalis, Ent. faecium, Streptococcus гр. В) играют доминирующую роль в разви-тии не осложненных маститов у коров; доля таких маститов по резуль-татам проведенных исследований 32,4%. В 67,6% маститы были вызва-ны ассоциациями микроорганизмов 13 видов, среди которых 39% со-ставляют грамотрицательные.

Действие микробных патогенов в 66,6% случаев дополняется мик-роскопическими грибами 5 видов. A. fumigatus, занимающий по частоте выделения 1-ое место, изолирован из молока коров с субклинической формой мастита, что позволяет рассматривать этот патоген, как один из пусковых факторов в развитии патологии вымени в хозяйствах, где ис-пользуют для коров недоброкачественный подстилочный материал. Грибы рода Candida выделены из молока, микрофлора которого была устойчива к действию антибактериальных препаратов, что указывает на их длительное использование без учёта чувствительности этой микро-флоры.

В развитии эндометритов у коров доминирующую роль играют энтеробактерии (E.coli, C.diversus, Pr. vulgaris), доля которых 55,5% от всех изолированных культур. Энтерококки (Ent. faecalis, Ent. faecium) выделены только в ассоциации с энтеробактериями.

Среди культур, выделенных из молока и влагалищных смывов ко-ров, 25,9% и 16,7% соответственно устойчивы к действию 18 испытан-ных антибактериальных препаратов.

Наиболее эффективными в отношении микрофлоры молока боль-ных маститом коров оказались энрофлоксацин – 55,4% чувствительных культур, гентамицин – 44,6%, доксициклин- 38,4%, неомицин, фурагин – по 33%, фуразолидон, левомицетин – по 32,1%, тетрациклин – 29,5%; эффективность остальных 10 испытанных препаратов была от 17,9% до 22,3%.

Микрофлора влагалищных смывов больных эндометритом коров чувствительна лишь к 13 из 18 испытанных препаратов; наиболее эф-фективны в отношении этой микрофлоры норфлоксацин (52,8%), гента-мицин (41,7%), энрофлоксацин (33,3%), неомицин, цефалексин (22,2%), полимиксин (19,4%), фурагин (19,4%), левомицетин (19,4%).

Микроскопические грибы, изолированные из молока, оказались более устойчивыми к действию противогрибковых препаратов, в срав-нении с грибами, изолированными из влагалищных смывов больных животных.

Таким образом, учитывая всё возрастающую лекарственную устойчивость инфекционных агентов, участвующих в развитии патоло-гии молочной железы, репродуктивных органов у коров, а также пре-имущественно ассоциативных характер этой патологии, необходима разработка новых композиций антибактериальных препаратов, исполь-зование с лечебной целью только эффективных комплексных препара-тов.

MICROFLORA OF MILK AND SEXUAL WAYS OF THE COWS SICK OF THE MASTITIS AND ЭНДОМЕТРИТОМ

Efanova L.I., Klimov N.T., Davydova V.V., Rubtsova J.A., Krutskih J.J.

Russian Research Veterinary Institute of Pathology, Pharmacology and Therapy, Voronezh, Russia

Of 71 test of milk of sick with mastitis cows are isolated 13 forms of microbes and 5 microscopic fungi; of 16 sheathed washings of the cows of 5 forms of microbes and 5 varieties of fungi sick with endometritis. The cul-tures of the microorganisms of milk in 25,9% of cases possessed stability to 18 tested preparations; from the sheathed washings — in 16,7%. Most effec-tive with respect to the chosen microflora proved to be phtorchinolon prep-arations -52,8-55,4% of sensitive cultures, gentamicin — 41,7-44,6%. The mi-croscopic fungi, isolated from the milk, are more resistant to the action of antifungal preparations, in the comparison with the fungi, isolated from the sick with endometritis cows.

источник