Анализ на рецепторы при раке молочной железы

Весь контент iLive проверяется медицинскими экспертами, чтобы обеспечить максимально возможную точность и соответствие фактам.

У нас есть строгие правила по выбору источников информации и мы ссылаемся только на авторитетные сайты, академические исследовательские институты и, по возможности, доказанные медицинские исследования. Обратите внимание, что цифры в скобках ([1], [2] и т. д.) являются интерактивными ссылками на такие исследования.

Если вы считаете, что какой-либо из наших материалов является неточным, устаревшим или иным образом сомнительным, выберите его и нажмите Ctrl + Enter.

Диагностику онкологических заболеваний невозможно представить без сдачи анализов, и анализы при раке молочных желез входят в перечень обязательных исследований, осуществляемых после проведения маммографии.

Но стратегию лечения определяет не анализ крови при раке молочных желез, а иммуногистохимический анализ материала биопсии опухоли.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]

Какую информацию о состоянии здоровья пациента дает врачу общий анализ крови при раке молочной железы? Это объективные данные по:

количеству в крови лейкоцитов и их составу (лейкоцитарная формула);
цветовому показателю крови (относительному содержание гемоглобина в одном эритроците);
количеству тромбоцитов и гранулоцитов;
объему эритроцитов (гематокриту), скорости их осаждения (СОЭ) и уровню молодых эритроцитов (ретикулоцитов);
уровню гемоглобина (HGB).

Как отмечают специалисты, общий анализ крови при раке молочной железы не имеет диагностического значения для оценки возможной онкологии на ранних стадиях, но дает представление о функциональном состоянии костного мозга.

Биохимический анализ крови при раке молочных желез покажет уровень электролитов (калия и кальция) и ферментов (щелочной фосфатазы), которые могут быть аномальными при метастазировании опухолей. Однако изменение их уровней часто наблюдается при многих патологиях, и поэтому диагностика рака молочной железы требует других анализов.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14]

На сегодняшний день диагностический стандарт в онкологии — исследование венозной крови на наличие и уровень продуцируемых раковыми клетками протеинов, воспринимаемых иммунной системой как антигены. Это и есть анализ на онкомаркеры рака молочной железы (CA или опухолевый маркер).

Маркер CA 15-3, согласно диагностическим правилам International Association of Oncologists, не относится к специфичным антигенам для рака груди, поскольку его уровень в крови также повышен у пациентов с недоброкачественными новообразованиями в легких, поджелудочной железе, печени, мочевом пузыре, яичниках и матке.

Как показывает практика, вряд ли можно считать специфичным для рака молочной железы и онкомаркер CA 27.29, так как повышение его содержания в плазме крови может отмечаться при фиброматозных изменениях в груди, при воспалении эндометрия и кисте яичника.

Анализ на онкомаркеры рака молочной железы может включать тест CEA — carcinoembryonic antigen (карциноэмбриональный антиген). Но он определяется не более чем в 30% случаев рака груди. Более того, его содержание в сыворотке крови может вырасти при хронической обструктивной болезни легких, гипотиреозе, язвенном колите, гранулематозном энтерите (болезни Крона), панкреатите и циррозе печени. Так что данный анализ крови при раке молочных желез не является надежным как для диагностики, так и в качестве скринингового теста для раннего выявления рака.

[15], [16], [17], [18], [19], [20], [21], [22], [23]

IHC тест (ImmunoHistoChemistry) – иммуногистохимический анализ рака молочной железы – проводится при исследовании образца ткани опухоли, который получают путем биопсии или после удаления новообразования в груди.

Анализ her2 при раке молочной железы – это определение human epidermal growth factor receptor, то есть тирозинкиназного рецептора эпидермального фактора роста (второго типа), который находится на мембранах клеток ткани опухоли. Если имеется повышенная экспрессия рецепторов her2 (результат анализа 3+), то IHC тест показывает «her2 положительный»: злокачественное образование находится в процессе роста. Если показатель от 0 до 1+, то her2 отрицательный; показатель 2+ считается пограничным.

Также существует иммуногистохимический анализ рака молочной железы (IHC тест) по экспрессии клетками опухоли грудной железы рецепторов к эстрогену (ERS) и прогестерону (PRS). Когда число таких рецепторов большое (показатель 3),значит рост раковых клеток «подпитывается» гормонами. Показатель 0 – рецепторов гормонов нет (то есть опухоль гормон-рецепторного-негативная); 1 – небольшое количество ERS и PRS; 2 – среднее.

Наличие рецепторов эстрогенов (ERS) является слабым прогностическим маркером клинического исхода заболевания, но имеет большое значение для назначения гормональной терапии.

Установлено, что в клетках опухоли синтез рецепторов эпидермального фактора роста (her2) происходит при возросшей активности генов. В клетках биоптата выявить их активность позволяет анализ фиш при раке молочной железы, точнее – FISH-тест (Fluorescence In Situ Hybridization).

Флуоресцентная гибридизация в данном месте (in situ) является цитогенетическим методом, использующим принцип флуоресцентной метки зондов (коротких последовательностей ДНК) и исследования их с помощью люминесцентной микроскопии. Исследование позволяет обнаружить наличие специфических ДНК-последовательностей на хромосомах и установить их локализацию, а также конкретные РНК-мишени в клетках опухолевых тканей.

Данный тест визуализирует конкретные генетические структуры в клетках ткани раковой опухоли. Чем больше дополнительных копий гена her2 имеют клетки, тем больше эти клетки имеют рецепторов her2; рецепторы принимают сигналы, которые стимулируют рост атипичных клеток.

Однако онкологи отмечают значительные расхождения между результатами иммуногистохимического анализа рака молочной железы (IHC тест) и FISH-теста. Хотя анализ фиш при раке молочной железы может быть использован для видовой идентификации опухолей.

Тест Oncotype DХ исследует 21 ген, чтобы оценить риск рецидива эстроген-зависимого рака I или II стадии, а также дает основания для принятия решения об использовании химиотерапии в дополнение к гормональной.

Генетический анализ на предрасположенность к раку молочной железы представляет собой исследование генов BRCA1 (на 17-й хромосоме) и BRCA 2 (на 13-й хромосоме), направленные на выявление их наследственно обусловленных аномалий.

Анализ на риск развития рака молочной железы (на мутацию генов BRCA1 и BRCA 2) проводится на образцах крови или слюны Он может дать несколько возможных результатов: положительный, отрицательный или неопределенный. Но даже положительный результат этого анализа не может дать информации относительного того, заболеет ли человек раком и когда. Например, некоторые женщины с положительным результатом остаются здоровыми.

Кстати, отсутствуют доказательства эффективности двусторонней профилактической мастэктомии в снижении вероятности рака груди, который выявил анализ на риск развития рака молочной железы или семейной истории рака.

Чрезвычайно ответственный этап лабораторных исследований – расшифровка и интерпретация результатов анализов. Принцип, на котором основана расшифровка анализа крови при раке молочной железы, заключается в определении уровня онкомаркеров и сравнения его с нормативными показателями.

Например, нормальным уровнем онкомаркера CA 15-3 признается показатель ниже 30 ед./мл, и об онкологии может свидетельствовать уровень выше 31 ед./мл. Учитывая неспецифичность этого онкомаркера, данный тест используется для контроля заболевания в ходе лечения. Норма опухолевого маркера CA 125 составляет 0-35 ед/мл, CA 27.29 — ниже 38 ед/мл. Вообще, уровни онкомаркеров более 100 ед/мл означают явное наличие онкологии.

Следует иметь в виду, что у трети больных в течение 30-90 дней после лечения результаты анализа на сывороточные онкомаркеры CA 27.29 повышенные, так что для проведения повторного курса химиотерапии следует делать этот анализ только через 2-3 месяца после лечения.

А для карциноэмбрионального антигена CEA нормальным показателем у некурящих является уровень менее 2,5 нг/мл, а у курильщиков – до 5 нг/мл. Как правило, CEA>100 говорит о метастатическом раке (III-IV стадий) либо о рецидиве онкозаболевания после терапии.

источник

Часть опухолей молочной железы состоит из клеток, для которых характерно присутствие рецепторов эстрогенов и других стероидных гормонов, включая прогестоген. Эти рецепторы находятся как в ядре, так и в цитоплазме клеток. Они обнаружены в 65% опухолей, возникающих в период постменопаузы. В то же время лишь 30% опухолей, развивающихся в пременопаузе и связанных с геном BRCA1, обычно не содержат рецепторов эстрогенов и прогестерона (PR).

Однако эти рецепторы присутствуют в опухолях, связанных с геном BRCA2. Гормональная зависимость некоторых опухолей подтверждается клиническими наблюдениями при изменении в организме гормонального фона. В настоящее время показано, что наличие рецепторов эстрогенов (ER) в опухолевых клетках коррелирует с чувствительностью индивидуальной опухоли к гормонам. Это позволяет прогнозировать ее чувствительность к гормональным препаратам, что имеет важное клиническое значение.

Например, пациенткам, у которых обнаружена ER-отрицательная опухоль, можно не удалять яичники. Не совсем ясно, отражает ли статус ER фундаментальные различия между «отрицательным» и «положительным» раком молочной железы, или существует непрерывный переход от опухолей с резко положительной характеристикой ER к опухолям, в которых уровень ER практически не определяется. Современные данные свидетельствуют в пользу второго предположения.

Эстрогеновый рецептор

При этом к положительным обычно относят опухоли, значение ER для которых находится выше определенного уровня, обычно составляющего 5 фмоль/мг цитоплазматического белка, или 25 фмоль/мг ядерной ДНК.

Наличие эстрогеновых рецепторов характерно для хорошо дифференцированных опухолей (особенно трубчатого, дольчатого, лобулярного или сосочкового типа), а также для опухолей с микроскопическими признаками эластоза. Согласно клиническим наблюдениям, медленно растущие опухоли в основном являются ER-положительными. Первичная опухоль и ее метастазы обладают близкими значениями ER, хотя от положительных опухолей иногда наблюдаются ER-отрицательные метастазы. Обратная картина встречается редко.

Насколько успешно измерения ER позволяют прогнозировать чувствительность опухолей к гормонам? Лишь 5-7% ER-отрицательных опухолей проявляют чувствительность к гормонам. Напротив, гормональной чувствительностью характеризуются 55% ER-положительных опухолей. Хотя больных с такими опухолями можно лечить гормональными препаратами, уровень ER нельзя считать достаточно надежным показателем.

Однако существует клиническая закономерность, выявленная эмпирически: опухоли с высоким значением ER в 90% случаев являются гормонально зависимыми. Наряду с этим показано, что опухоли с высокими значениями PR, более чем в 80% случаев также чувствительны к гормонам.

Эстроген (Е) связывается с рецептором (ER), который димеризуется.
Комплекс приобретает активность (АР) и присоединяется к эстроген-зависимым структурам (ERE) клеточного ядра.
Происходит активация таких белков, участвующих в транскрипции (Т), как РНК-полимераза II, что приводит к синтезу белка и делению клетки.
Гозерелин вызывает снижение уровня эстрогенов в плазме крови (1); фульвестран (2) предотвращает процесс димеризации рецептора и его активацию; тамоксифен (3) связывается с активным комплексом, подавляя его способность инициировать транскрипцию.

источник

Раковый антиген СА 15-3 — гликопротеиновый эпитоп муцина (молекулярная масса 300 кДа), представитель класса онкофетальных маркеров.

Плод накапливает СА 15-3 в гепатоцитах, а также в клетках эпителия бронхов.

Организм взрослого человека характеризует экспрессия данного антигена эпителием протоков молочной железы.

Впервые соединение удалось выделить Куфэ в 1983 году. Биологический период полужизни маркера составляет 7 дней.

Физиологическая концентрация СА 15-3 в сыворотке крови здоровых женщин 37 Ед/мл.

Заболевания, при которых комплекс диагностируемых клинико-биохимических нарушений включает повышение концентрации СА 15-3, представлены в ниже (Табл.2).

Таблица 2. Основные заболевания, сопровождающиеся повышением уровня СА 15-3.

Применительно к диагностике рака молочной железы (РМЖ), за антигеном СА 15-3 традиционно сохраняется роль маркера выбора, значение которого предопределяет стадия болезни.

В условиях распространенного опухолевого процесса, повышенный уровень данного антигена регистрируется в 85% случаев, тогда как на фоне I-II стадии РМЖ, подобные изменения отмечены лишь у 15% больных.

Достаточно низкая (15-20%) чувствительность теста делает неэффективным его использование в целях ранней диагностики рака молочной железы и, соответственно, в программах скрининга при указанной патологии.

Вместе с тем, повышенные, особенно сверхвысокие уровни СА 15-3, выявляемые до проведения оперативного вмешательства, обоснованно расцениваются как прогностически неблагоприятный признак.

Известно, что указанные концентрации антигена, как правило, ассоциируются с наличием отдаленных метастазов первичной опухоли. Кроме того, специальные наблюдения свидетельствуют, что повышение уровня СА 15-3 обнаруживается в среднем за 2,7 месяца до появления клинических признаков рецидива РМЖ.

Коэффициент корреляции между уровнем СА 15-3 и массой опухоли молочной железы составляет 75%. Подробная закономерность аргументирует правомерность осуществления мониторинга эффективности проводимого лечения РМЖ, путем динамического контроля концентрации данного антигена в сыворотке крови.

Показания к проведению количественного определения СА 15-3:

• Оценка эффективности проводимого лечения РМЖ.
• Мониторинг послеоперационной активности опухолевого процесса с целью раннего (доклинического) выявления рецидива РМЖ.

Методы количественного определения СА 15-3:

• Иммуноферментный;
• Радиоиммунологический;
• Хемилюминесцентный;
• Электрохемилюминесцентный;
• Молекулярно-генетический.

Перспективным должно явиться применение лабораторной панели, которая интегрирует то или иное сочетание рационально (с максимальным учетом специфики клинической ситуации) подобранных маркеров рака молочной железы.

Муциноподобный раковый антиген (МСА) — гликопротеид с молекулярной массой 350-500 кДа, принадлежит к семейству MUC-1. Референсное значение уровня МСА = 11 Ед/мл, стадиеспецифический маркер рака молочной железы.

Чувствительность теста 60,8%. При распространенном раке молочной железы, уровень МСА повышается в 80% случаев.

Показано, что рост концентрации МСА, как и СА 15-3, особенно характерен для РМЖ с наличием метастазов в кости скелета.

Повышение уровня опухолевых маркеров МСА и СА-125, диагностированное у больного РМЖ одновременно, квалифицируется как неблагоприятный прогностический фактор на любой стадии опухолевого роста.

Неспецифический подъем уровня МСА может регистрироваться при беременности, мастопатии, а также (как проявление) неопухолевых заболеваний печени.

Тканевой полипептидный специфический антиген (TPS) — фрагмент цитокератина 18 — цитоплазматического белка с молекулярной массой 45 кДа.

Цитокератины (кератины) — белки типичные для эпителиальных клеток. В зависимости от изоэлектрической точки и молекулярного веса, им присвоены порядковые номера от 1 до 27. Экспрессия данных белков находится в тесной связи с морфологическим типом эпителия.

Биологический период полужизни TPS 7 дней. Референсное значение уровня = 80 Ед/л. Специфичность теста — 95%, чувствительность — 18-31%. Данный антиген считается одним из показателей агрессивности РМЖ.

Так при условии выраженности последней, даже сравнительно малого размера опухоль, способна обусловить существенное повышение сывороточного уровня TPS.

В этой связи рекомендуется применение данного теста сочетать с определением одного из муцинов (СА 15-3 или МСА), уровень которых более адекватно отражает распространенность опухолевого процесса.

Маммологическое цитологическое исследование (ЦИ) представляет собой объективное изучение структуры клеточных элементов в цитологическом препарате, с целью диагностики наличия и характера опухолевых и/или неопухолевых поражений молочной железы.

Как правило, материалом для проведения ЦИ являются следующие субстраты:

• диагностические пунктаты (опухолевидных образований молочной железы, уплотнений в области рубца после хирургических манипуляций на ней, региональных лимфатических узлов);
• отпечатки и соскобы, полученные с эрозированной поверхности соска молочной железы;
• отпечатки с поверхности разрезов и клеточного материала, полученного при эксфолиативной биопсии.

Общепринятым критерием достоверности ЦИ являются результаты сопоставления его данных и данных планового гистологического исследования. Последнее при этом следует расценивать в качестве основополагающих.

Выраженная пролиферация клеточных элементов представляет собой типичный источник гипердиагностических ошибок в условиях имеющихся подозрений на РМЖ.

Характерны в этом плане морфологические изменения протоков и долек молочной железы, которые сопутствуют ее фиброаденоме и пролиферирующему аденозу.

Дополнительные затруднения в постановке на основе ЦИ, адекватного (исключающего наличие опухолевой болезни) диагноза, могут в данном случае быть обусловлены укрупнением клеточных ядер.

Не вызывает сомнения тот факт, что носительство мутаций определенных генов сопряжено с увеличением риска РМЖ. Вместе с тем, прогностическая значимость ряда геномных нарушений, нуждается при данной патологии в уточнении (группа генов-кандидатов). Соответствующие представления обобщены в Табл. 3.

Таблица 3. Гены и гены-кандидаты, связанные с РМЖ.

Тесная взаимосвязь множества клеточных генов в процессах регуляции пролиферации, дифференцировки и апоптоза объясняет роль их гиперэкспрессии в канцерогенезе при раке молочной железы. Соответствующий комплекс генов включает: BCL2, D94, Cathepsin D, CCNE, CD63, Claudin-7, CRABP2, CTSD, GATA3, GZMH, hTERT, IGF1R, Ki-67, Lactoferrin, Lipocalin2, MDM2, MUS1, MYBL2, Neurosin, PAI1, PAI2, POH1, PS2, Rantes, SIX1, SMARCD2, STMY3, VEGF (24).

Значительное внимание маммологов привлечено сейчас к ферменту теломеразе. Основная функция теломераз состоит в том, что они препятствуют укорочению теломер (концевых участков хромосом) в процессе деления клеток. Тем самым удается обеспечить неограниченных резерв пролиферации последних.

Теломеразная активность присутствует исключительно в половых клетках, постоянных клеточных линиях и опухолях, в противоположность интактным клеткам.

Установлено, что для многих типов опухолей в частности, для низкодифференцированных карцином, наличие активной теломеразы коррелирует с неблагоприятным прогнозом.

Ген CHEK2 являющийся опухолевым супрессором локализуется на 22-й хромосоме. Мутация 1100 delC гена CHEK2, приводящая к синтезу неполноценного укороченного белка со сниженной экспрессией, встречается в странах Европы с частотой от 0,2% до 1,4% и определяет 2-10-кратное увеличение риска РМЖ.

Эта мутация также ассоциируется с повышением риска опухолей других локализаций (яичника, простаты, толстого кишечника, желудка) и может встречаться в «раковых семьях» с отсутствием генетических дефектов ВRCA1 и BRCA2.

В Санкт-Петербурге и Ленинградской области рассматриваемая мутация обнаруживается у 2/294 (0,7%) пациентов с раком яичников и у 1/448 (0,2%) здоровых женщин.

Таким образом, в отличие от мутаций в гене BRCA1 и BRCA2, данный аллельный вариант специфически ассоциирован с РМЖ (14/660; 2,1%; p

План лечения составляют с учётом стадии опухолевого процесса, морфологической структуры опухоли, возраста больной, сопутствующих заболеваний, общего состояния пациентки. Применяют следующие методы лечения: хирургический, комбинированный (сочетание операции с лучевой или лекарственной терапией) и ком.

По данным многочисленных публикаций, этиология и патогенез РМЖ сложны и определяются сочетанием многих факторов. Гормональная регуляция функции молочных желез значительно сложнее, чем эндометрия. Помимо эстрогенов и прогесторона, развитие молочных желез в пубертатном периоде, их функция во время бер.

источник

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы – это анализ, который позволяет определить чувствительность новообразования злокачественного характера к некоторым веществам. С его помощью диагностируют стадию патологии и узнают, правильно ли было назначено лечение.

Если говорить о том, что такое ИГХ онкологии, то это исследование, позволяющее выявить взаимодействие между белками и антигенами. Дело том, что клетки, пораженные онкологией, синтезируют белок. Он имеет связь с антителами. Учитывая это, специалисты с помощью анализа определяют форму и структуру опухоли.

ИГХ при раке молочной железы проводят с целью:

определения вида заболевания для назначения терапии;
раскрытия наличие метастаз, идущих от опухоли, и их границы;
обнаружения источника метастаз;
диагностирования стадии патологии при ее выявлении;
оценки эффективности терапии;
установления скорости развития метастаз при наличии таковых;
выявления чувствительности клеток крови к тем или иным препаратам и методам лечения, чтобы оставить эффективные средства и исключить те медикаменты и способы терапии, которые не влияют на опухоль.

Иммуногистохимия рака молочной железы проводится путем забора ткани, пораженной онкологией. Биоматериал добывается с помощью биопсии или в процессе оперативного вмешательства. После этого выполняется анализ по следующим этапам:

биоматериал помещается в формалин, после чего переправляется в лабораторию для проведения дальнейших манипуляций;
специалисты обезжиривают ткань;
в материал добавляется специальный жидкий парафин, который помогает выявить структуру клеток опухоли;
выполняется микротравмирование – процедура срезания тонкого слоя парафина, толщиной в 1 мм;
взятые образцы размещаются на специальных стеклах;
выполняется окрашивание материала с помощью реактивов;
образцы оставляют на 12 дней, после чего оценивают результат.

Для проведения анализа используют несколько видов маркеров. Если в ходе исследования в биоматериале обнаружена повышенная концентрация эстрогенов и прогестеронов, делают заключение о развитии опухоли. Это также говорит о появлении метастазов от новообразования. Если анализ показал средние результаты, то говорят о слабом росте опухоли. Это говорит о том, что больной после соответствующей терапии имеет все шансы на выздоровление.

Чисто рецепторов HER2 влияют на цветовую гамму реакторов с клетками, которые поражены раком. Чем их больше, тем ярче тон. В этом случае гистология проявляется себя, как неточная наука, поскольку восприятие оттенков образцов субъективное и зависит только от ощущений специалиста, выполняющего анализ.

При расшифровке результатов учитывают рецепторы к прогестерону – PR и эстрогену – ER. ИГХ в онкологии также показывает содержание рецептора человека эпидермального фактора роста (HER2-белка) в биоматериале, который взят как образец для проведения исследования. У женщин с карциномой молочной железы наблюдается повышенный HER2.

Расшифровка результатов по эстрогену и прогестерону – если в опухоли обнаружены рецепторы к мужским и женским гормонам, то рост образования происходит под их воздействием, если PR и ER в организме присутствуют в норме или их концентрация увеличена. При своевременном квалифицированном лечении пациент может рассчитывать на благоприятном исходе.

Расшифровка результатов ИГХ выполняется в зависимости от оттенка образцов по специальной шкале:

0-1+. Такой результат говорит о том, что концентрация белка не превышена. Терапия патологии не требуется.
2+. Значение указывается на среднюю концентрацию белка. Это говорит о наличии отрицательной опухоли (карциномы) груди. В этом случае рекомендуется выполнить еще один анализ, поскольку первое исследование не всегда дает точный результат. Для уточнения диагностики выполняют тест FISH. Такое исследование определяет концентрацию белка в каждой клетке. При нормальном содержании HER2 анализ покажет положительный результат, а при повышенном – отрицательный.
3+. Белок превышает нормальное значение. Диагностируется положительная опухоль груди.

Если анализ показал положительную опухоль, значит, патология имеет агрессивный характер развития. Она растет в несколько раз быстрее, чем при отрицательном значении.

После изучения исследования, расшифровывается результат, исходя из показателя маркера Ki67. Если его значение находится в пределах нормы, то есть 15-17%. При повышении его уровня до 35% опухоль начинает быстро расти. Замедлить процесс помогает химиотерапия. Если анализ показал 85%, врачи отказываются от лечения пациента, поскольку снизить маркер в таком случае невозможно и смертельного исхода не избежать.

люминальный А – рецепторы к ER положительные, к белку отрицательные, Ki67 менее 14%;
люминальный Б – рецепторы к ER, к HER2 – отрицательные, Ki67 более 15%;
Erb В2 сверхэкспрессирующий — PR и ER – отрицательный, белок – положительный;
Базальноподобный – отрицательное значение к прогестерону и остальным факторам.

Такие факторы демонстрируют возможное поведение опухоли на момент анализа. Лечение не оказывает влияние на исследование. Врач благодаря ИГХ видит, как ведет себя опухоль. Прогнозом специалист пользуется для определения подходящей терапии для каждого пациента.

Исследования ИГХ рака молочной железы позволяют определить эффективность лечения. Если анализ показал положительный рак, то назначают химиотерапию. При отрицательном значении – прием медикаментозных препаратов.

ИГХ – это исследование, которое позволяет определить вид рака молочной железы и назначить адекватное лечение, что позволяет спасти пациентке жизнь, а в некоторых случаях – избавиться от патологии.

источник

Давайте для начала мы разберем, что же такое иммуногистохимическое исследование. Под ним подразумевается микроскопическое исследование ткани, которое основано на выявлении антител на патологические вещества.

прямой (прямая реакция антител непосредственно на патологическое вещество);
непрямой метод (патологические вещества, распознаются с помощью вторичных антител).

ферменты — белковые молекулы, они же молекулы РНК. Так например: щелочная фосфатаза (фермент гидролаза);
флуоресцентные — тот же физический процесс, например — флуоресцеин — органическое соединение;
электроно-плотные частицы, к таким относится золото.

изучения и исследования секреторных процессов, в том числе синтетических;
распознавания гормонов рецепторов;
выявления различных типов, родов клеток по их свойствам.

В области исследования грудной железы данное исследование используется в качестве предварительной диагностики для установления точного диагноза, в том числе при злокачественных образованиях. Данное исследование дает возможность определить следующее:

Точное образование (доброкачественное или злокачественное) и назначение правильного лечения.
Точное месторасположение (наличие метастаз в организме и их дислокацию).
Первоначальный очаг заболевания.
Стадию заболевания (например, степень рака).
Пролиферацию клеток (распознать скорость размножения и развития раковых клеток).
Ответ раковых клеток на медикаменты, их чувствительность, также можно отследить чувствительность к химиотерапии, к лучевой терапии.

Исследование способно детально изучить заболевание, что дает возможность полностью диагностировать заболевание и подобрать правильное лечение. Это играет не маловажную роль в диагностике, лечении, продолжительности жизни онкологических больных. Также можно сказать, что с помощью данного метода можно:

Иммуногистохимия при раке молочной железына более раннем сроке диагностировать заболевание;
выяснить непосредственный очаг заболевания;
найти границы заболевания;
определить точное место образования;
определить точный вид новообразования;
определить точную стадию развития;
определить рост патологических клеток;
узнать реакцию на препараты (в частности, на гормоны, на лучевую терапию и так далее);
определить необходимость операции;
помогает точно оценить качество лечения.

В основном данная диагностика используется для изучения (исследования) любой ткани человеческого организма. Основа для проведения данного исследования — это любое новообразование, которое предполагает развитие рака. Также исследование проводится для изучения эндометрия:

при метастазах;
при бесплодии;
после неудачных попыток ЭКО;
при различных заболеваниях матки;
при различных видах патологий органов малого таза;
при постоянных невынашивания плода;
при заболевания эндометрия.

Исследование не имеет абсолютных противопоказаний. Препятствием для ИГХ может быть, только невозможность по каким либо причинам забора материла на исследование.

Данный вид исследования может проводится только в специализированных лабораториях, при этом врач должен иметь специальную квалификацию, пройти специальное обучение.

Забор проходит непосредственно пораженного участка кожи с помощью биопсии. Также забор материала может происходить во время хирургического вмешательства на молочной железе.

Потом полученный материал специально обрабатывается и консервируется. Для этого она заливается парафином. В таком виде, в парафине, материал может правильно храниться в течении многого времени.

Следующим этапом является микротомирование. Материал нарезают на тонкие пласты при помощи специального аппарата.

В дальнейшим нарезанные пласты окрашиваются с определенными антителами и все это изучается под микроскопом. В некоторых лабораториях изучается окрашенный материал на автоматическом приборе.

две-три неуспешных процедур ЭКО;
не первое (постоянное) невынашивание плода на ранних сроках;
бесплодие.

Во время исследования могут выявить такие заболевания как:

эндометрит,
гиперплазия,
неполную трансформацию эндометрия,
нарушение фаз развития
и другие заболевания.

Как показывает практика, именно заболевания, связанные с эндометрием на 73% являются причиной бесплодия.

Данное исследование проводится в определенный день менструального цикла, обычно на 5-7 день смотрят воспалительные процесса эндометрия, на 20-24 день цикла — оценивают секрецию, смотрят рецепторную функцию.

Для этого пациентке рекомендуют:

не принимать гормоны за неделю до анализа;
не принимать кровоостанавливающих препаратов;
правильная интимная гигиена.

Процедура происходит на гинекологическом кресле. Женщину обезболивают специальными препаратами и вводят зеркало. Делается санация половых органов. Вводится специальный прибор — система гистероскопа и проводится забор. Далее убирают прибор, проводя санацию органов.

Потом женщина находится под наблюдением врача до полного восстановление, примерно 1-2 часа.

Результаты примерно готовятся 3-5 дней. Оценить результаты может только специалист.

HER2neu или, по-другому говоря, человеческий рецептор эпидермального фактора роста. Несет ответственность за продукцию белка. При поражении раковых клеток усиливается беспорядочный рост.

Если результат пишется 1 (+), то это говорит о том, что избытка белка нет, следствие — нехорошее состоянии опухоли.

При 2 (++) обычно назначают повторное исследование.

При 3 (+++) рассматривают как положительную опухоль, которую обычно подвергают медикаментозному лечению.

ER uPR данный вид гормонов способствует стимуляции роста патологических тканий. Если данные показатели увеличены, то это говорит о правильном лечении, что опухоль реагирует на гормонотерапию. Следовательно, если данные показатели понижены, то можно говорить о неправильном подборе лекарств. Опухоль развивается дальше.

Ki — 67, по данному показателю оценивают стадию опухоли и её характеристики. Если результат дает повешенные цифры, то это говорит о быстром течении заболевания, наличии метастаз и, к сожалению, совсем не хороший прогноз. Данный результат отмечается в процентах. Так например:

11% — вполне хороший прогноз (выздоровление 93%);
21 % — говорят о нем как 50% на 50%, все зависит от организма человека;
все показатели за 30% — оценивают как тяжелая стадия — высокоагрессивная;
90% — неизлечимо, приводит к смерти.

Так же данный индекс способствует к определению выбора лечения.

Ген p53 — способствует предотвращению роста патологической ткани. Данный ген является барьером для заболевания. Для начала заболевания служит мутация гена, например, наследственность или нарушение белковой матрицы.

VEGF — обозначается белок, которой несет функцию контроля жизнедеятельности ткани при условии недостаточного кровообращения. Высокие показатели данного белка говорит о росте опухолевой ткани, в следствии «хорошего» питания ткани.

В основном выделяют 4 типа рака:

Люминальный А — при этом: к женским гормонам рецепторы положительны, к HER2- отрицательные, показатель ki- 65-13% меньше.
Люминальный В — при этом: к женским гормонам рецепторы положительны, к HER2- отрицательные, показатель ki- 65-15% меньше.
Erb — B2 — при этом: реакция рецепторов к прогестерону (эстрогену) отрицательная, к HER2- положительная.
Базальноподобный — отрицательный показатель по всем категориям.

Принято считать, что отвечают за саму опухоль — PD-1, PDL-1 и PDL-2. Но они могут присутствовать не во всех патологических тканях. Для точного определения и назначения правильной терапии всем пациенткам, которым непосредственно показана иммунотерапия проводится такое исследование, как экспрессия белков PD-1, PDL-1 и PDL-2.

Данное исследование проводят с помощью флуоресцентной гибридизации FISH. В результате наличия экспрессии иммунотерапия назначается такими препаратами, как: Ниволумаб, Атезолизумаб, Пембролизумаб.

Иммуногистохимическое исследование очень сложный анализ, в котором используются множественное количество онкомаркеров.

Стоимость исследования зависит от количества проверяемых факторов. Цена исследования начинается от 4 тысяч рублей и до 20 тысяч рублей.

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы представляет собой метод морфологического диагностирования, позволяет установить восприимчивость опухолевых клеток к специфическим веществам и служит стопроцентным методом определения злокачественности либо доброкачественности новообразования.

Предметом проверки является строение пораженных опухолью тканей. При помощи микроскопа на предметном стекле изучают биоматериал, который предварительно обрабатывают специфическими белками.

Клетки новообразований для организма являются чужими элементами — антигенами (от англ. antibody-generator — создатель антител).

Он реагирует на них, вырабатывая протеиновые частички (иммунный ответ), способные вступать в связь и обезвреживать инородных агентов.

При иммуногистохимии применяется сыворотка, включающая белковые антитела, реагирующие с чужими элементами.

Это взаимодействие указывает на наличие или отсутствие новообразования, его малигнизацию, а также восприимчивость к половым гормонам.

Помимо того, этот метод позволяет подбирать наиболее эффективную тактику ведения больного, наглядно оценивать ее результативность и давать прогноз в каждом конкретном случае.

На бытовом уровне наглядно представить суть ИГХ можно, проведя клеевым прозрачным карандашом по листу. При осмотре он почти неприметен, но если присыпать его, к примеру, речным мелким песочком, то благодаря прилипшим частичкам след проступит явственно.

Исследование ИГХ назначается, если имеется опасение развития злокачественного образования молочной железы, и преследует цели:

обнаружить болезнетворный процесс возможно раньше;
выяснить местоположение больных клеток и определить, захвачены ли ими соседние ткани — очертить границы;
найти источник метастазов, изначальный очаг болезни;
уточнить вид опухоли и стадию ее развития;
установить биологический резерв больных клеток: темпы разрастания, быстроту метастазирования; реакцию на гормоны, противоопухолевые препараты, лучевую терапию;
определить надобность в хирургическом вмешательстве;
оценить эффективность проводимого лечения.

Главными достоинствами данного метода является возможность обнаружения больных клеток и опухолевых факторов, чего нельзя достичь при гистохимическом анализе, и вероятность подбора максимально результативного варианта безоперационного лечения новообразований.

Противопоказаний данный метод не имеет и не проводится только в случае невозможности забора исследуемого материала (больной ткани).

При обследовании пациенток с проблемами репродуктивной сферы, помимо случаев злокачественных новообразований молочной железы, ИГХ будет информативен при онкологических заболеваниях матки и бесплодии.

Иммуногистохимическое исследование проводится в медицинских лабораториях автоматизированно либо мануальным способом, специально обученным врачом-патологоанатомом, обладателем сертификата на право его проведения.

Забор биологического материала для изучения — пораженной болезнью ткани — производится методом биопсии (прокола иглой) или во время операции на молочной железе.
На следующем этапе образец обрабатывают и консервируют, заливая парафином, чтобы избежать повторных заборов ткани. В виде парафинового блока биоматериал может храниться в течение нескольких лет.
Далее проводится микротомирование — нарезание на тончайшие пласты, не толще 1 микрона — специальным аппаратом.
Эти срезы впоследствии окрашиваются сывороткой с помеченными особым образом антителами и отправляются для изучения под микроскоп либо в автоматический прибор, в зависимости от выбора красителя-маркера.

По интенсивности окрашивания либо при фиксации измерителем реакции судят о результате. При работе вручную на точность выводов может влиять человеческий фактор — субъективное цветовосприятие врача-лаборанта.

Полный цикл иммуногистохимического исследования укладывается в двухнедельный срок.

Главными объектами изучения являются HER2/HER2neu, ER и PR, ki-67, p53, VEGF, Bcl-2.

HER2neu в переводе с английского означает «человеческий рецептор эпидермального фактора роста», он ответствен за продукцию белка HER2. Соединяясь с нервными окончаниями пораженных раком клеток HER2, вынуждает их усиленно делиться, бесконтрольно разрастаясь.

Показатель количества 1 (+) свидетельствует о HER2-негативном состоянии опухоли, избытка белка нет, встречается в двух третях случаев.

Индекс 2 (++) — пограничное значение, рекомендуется проведение повторного исследования.

Знак 3 (+++) характеризует новообразование как HER2-позитивное. У четверти пациенток с раком молочной железы отмечено избыточное вырабатывание этого белка. Течение имеет более динамичное, но дает положительный отклик на лечение специфическими онкопрепаратами.

ER и PR — рецепторы, чувствительные к эстрогену (ER) и прогестерону (PR), также расположены на клеточных оболочках и при образовании комплексов с этими гормонами способны стимулировать рост больной ткани.

Высокие показатели ER и PR в опухолевых клетках достоверно указывают на возможность адекватного отклика на гормонотерапию. При низких их значениях проведение подобного лечения не целесообразно.

Ki-67 характеризует стадию развития и степень динамичности новообразования; высокий ее показатель свидетельствует об агрессивности опухоли, скорости метастазирования и неутешительном прогнозе.

Выражается в процентном отношении. Показатель до 10 % обещает весьма благоприятный исход (выживаемость 95 %), пограничным считается индекс 20 %, значения более 30 % характеризуют опухоль как высокоагрессивную. 90-процентная отметка свидетельствует о критичном состоянии (смерть во всех случаях).

Помимо того, индекс Ki-67 во многом определяет тактику лечения.

Например, динамичные опухоли лучше поддаются химиотерапии, а коэффициент менее 15 % предполагает использование гормонов (при положительных ER и PR).

Ген p53 является своеобразным охранником, предотвращающим рост больных клеток. Мутация этой единицы наследственности или повреждение ее белковой матрицы выступает главным фактором возникновения ракового новообразования.

VEGF — белок, отвечающий за жизнеобеспечение тканей в условиях недостаточности кровообращения. Избыток его способствует улучшению питания опухоли и благоприятствует ее росту.

Различают четыре молекулярных подтипа рака молочной железы:

А-люминальный — ER и PR положительные, HER2 отрицательный, Ki-67 менее 15 %, прогноз наиболее благоприятен.
В-люминальный — ER и PR положительные, HER2 отрицательный, Ki-67 15 % и более.
Сверхэкспрессирующий — ЕR и PR отрицательные, HER2 положительный.
Базальноподобный — трижды негативный — все факторы отрицательные, прогноз наименее благоприятен.

Иммуногистохимическое исследование — сложный и многоэтапный метод, использующий множество онкомаркеров.

Разумеется, расшифровкой и интерпретацией результатов должен заниматься врач, прошедший специальное обучение ИГХ.

Как правило, при выявлении злокачественного образования молочной железы участие в диагностировании и разработке тактики лечения принимает консилиум докторов.

ER и PR – протеиновые рецепторы на поверхности опухолевых клеток.

В организме человека постоянно вырабатываются гормоны – эстроген и прогестерон. Эти гормоны воздействуют на ER и PR рецепторы, что приводит к стимуляции роста опухолевых клеток.

Определение Эстрогеновых и Прогетестероновых рецепторов является одним из важнейших моментов, определяющих чувствительность опухоли к терапии гормональными препаратами.

Чаще всего наличие рецепторов ER/PR определяют при раке молочной железы . Их наличие дает возможность, помимо стандартных методов лечения, применить гормональную терапию.

При гормон позитивном раке молочной железы, назначаются препараты: Тамосксифен, Экземестан (Аромазин), Летрозол (Фемара), Анастразол (Аримидекс), Гексэстрол (Синестрол) и другие.

Также, считается, что гормонально-зависимый рак молочной железы отличается спокойным течением и редким метастазированием.

Чувствительность опухолевых клеток к гормональной терапии выражается в баллах от 0 до 10. Опухоль считается гормонозависимой, начиная с 2-х баллов. и требует добавления к лечению гормональной терапии.

Her2Neu – это рецептор эпидермального фактора роста раковой клетки. Это – ген, который воздействует на мембранные рецепторы клетки, и стимулирует её к усиленному делению.

В некоторых опухолях (чаще всего рак молочной железы, рак пищевода, рак желудка) присутствует гиперэкспрессия (повышенная активность) Her2Neu, что вызывает быстрое деление опухолевой клетки и её повышенную активность.

Также снижается эффективность химиотерапии, лучевой терапии, гормональной терапии. Из-за этого опухоли с Her2neu позитивным статусом отличаются агрессивным течением.

Существует две методики определения наличия у опухоли гена Her2neu:

1. Иммуногистохимическое исследование

Результаты иммуногистохимического исследования выражаются в баллах:

0-1 означает, что опухоль без гиперэкспрессии Her2neu.
3 означает, что опухоль с гиперэкспрессией Her2neu.

2. Метод FISH (Флуоресцентная гибридизация in situ)

В отличие от иммуногистохимического исследования, при котором определяются белки, при методе FISH определяется наличие генов, кодирующих протеины Her2neu. В зависимости от их наличия, определяется гиперэкспрессия Her2neu.

Определение гиперэкспрессии рецептора Her2neu в опухоли молочной железы является очень важным для дальнейшего назначения лечения.

В современной онкологии гиперэкспрессию Her2neu определяют, чтобы понять, необходимо ли добавление к лечению ингибиторов Her2neu.

Эти препараты прицельно блокируют рецепторы Her2neu, тем самым останавливая активный рост опухолевых клеток и повышая их чувствительность к химиопрепаратам.

Добавление таргетной терапии к стандартной химиотерапии при лечении Her2neu позитивных опухолей, серьезно увеличивает общую выживаемость и результат противоопухолевого лечения.

Ki-67 – это маркер пролиферативной активности опухолевой клетки. Данный параметр оценивается в процентах и показывает, сколько процентов опухолевых клеток активно делятся.

Если Ki-67 меньше 15%, опухоль считается слабоагрессивной, при показателе Ki-67 от 30 до 50% опухоль считается агрессивной, а при показателе Ki-67 выше 50% опухоль является высокоагрессивной.

Также Ki-67 является фактором прогноза течения опухолевого заболевания и ответа опухоли на химиотерапевтическое лечение. Определяется это простым способом: чем ниже показатель Ki-67, тем хуже опухоль реагирует на химиотерапевтическое лечение.

И наоборот – чем выше показатель Ki-67, тем лучше опухоль будет отвечать на химиотерапию.

Белок p53 – это транскрипционный фактор, регулирующий клеточный цикл. В быстро делящихся клетках обнаружено увеличение концентрации белка р53 по сравнению с клетками, делящимися медленно, что обусловлено высоким риском их онкогенности.

Белок p53 предотвращает образование злокачественных опухолей в нашем организме. В норме, антионкоген р53 находится в неактивном состоянии, а при появлении повреждений ДНК в здоровой клетке – активируется.

Функция белка р53 состоит в удалении тех клеток, которые являются потенциально онкогенными. Это называется – индуцированный апоптоз, уничтожение потенциально опасной клетки.

При иммуногистохимическом исследовании, повышенное содержание белка p53 обнаруживается в 50% злокачественных клеток, что позволяет им беспрепятственно делиться и избегать апоптоза (уничтожения).

Количество белка p53, определяют в дополнение к показателю Кi67, для того, чтобы понять насколько агрессивна опухоль и определить дальнейшее течение болезни.

Если уровень белка p53 высокий, значит опухоль не агрессивная и не склонна к метастазированию и быстрому росту.

Если же, показатель белка p53 низкий, то значит опухоль агрессивна и склонна к быстрому росту в окружающие ткани и метастазированию .

Иммуногистохимическое исследование: как проводится анализ при раке молочной железы, расшифровка результатов, показания и противопоказания

Иммуногистохимический анализ молочной железы относится к современным видам диагностики, позволяющим получить обширную информацию о раковой опухоли.

Рассмотрим особенности гистохимии, как преимуществами обладает, при каких патологической ситуации назначается, как проводится, и о чем говорят результаты исследования.

Иммуногистохимия – высокоточное микроскопическое тестирование взятого биоматериала, помогающее специалистам обнаружить и провести идентификацию особых веществ, характерных для раковых клеток.

На сегодняшний день гистохимия используется с целью:

Уточнения предполагаемого диагноза.
Установления вида или подвида опухоли.
Определения стадии злокачественного процесса.
Выявления степени распространенности единичного ракового новообразования.
Установления патологического очага, провоцирующего метастазы, если исследуемый образец получен из вторичного злокачественного источника.
Определения особенности ответной реакции на лечение.
Подтверждения результатов предыдущих анализов.
Исключения вероятного присутствия других злокачественных процессов.
Уточнения скорости роста опухоли.

Основная суть иммуногистохимической диагностики состоит в следующем:

Изучение клеток биоптата злокачественного новообразования с применением реактивов, содержащих особые белки (или антитела), помеченные специальными веществами, поддающимися детектированию.
Иммуноглобулины обладают пространственным строением, которое разрешает им соединяться с отыскиваемым веществом (антигеном) в онкологических клетках. Подобный химический процесс называется «антиген-антитело», позволяющий подтвердить присутствие в исследуемом материале веществ, характерных для рака.

При проведении ИХГ может быть осуществлено выявление отдельных рецепторов к определенным гормонам, как прогестерон, эстроген, а также ферментов интенсивного роста злокачественных клеток, онкологические маркеры и прочие антигены.

Гистохимическая методика исследования полученного образца тканей груди может проводиться двумя способами:

Способ	Особенности
Прямой	Строится на специфической реакции, проявляемой в момент соединения маркированных тел непосредственно с обнаруженным антигеном.
Непрямой	Является более популярным, чем прямой вариант. Отличается высокой чувствительностью, при этом его основной особенностью является то, что немаркированные первичные антитела сначала соединяются с выявляемым веществом, и лишь потом осуществляется установление их присутствие вторичными мечеными антителами. К тому же начальные вещества выступают антигенами для вторичных антител.

Стоит подчеркнуть, назначаемые медикаментозные средства для лечения онкологии должны получить подтверждение ИХГ.

Сколько стоит выполнение ИХГ молочной железы? В большинстве регионов РФ при наличии направления специалиста данный тест можно сделать бесплатно. Однако в случае обращения пациентки в коммерческие лаборатории, представляющие платные услуги, цена анализа зависит от применяемого количества антител.

В основном при проведении исследования используется от двух до пяти антител, но могут выявляться около десятка антигенов. Исходя из этого, и определяется стоимость процедуры:

От 2 до 5 антител – 4000-5000 рублей.
До 10 антител – от 15000 рублей.

Иммуногистохимическое исследование молочной железы обладает существенными преимуществами перед другими лабораторными видами диагностики:

Не требует большого количества биоматериала и химреагентов для своего выполнения.
Результат теста готов за очень короткое время, в срочных ситуациях — через 3 часа.
Исследуемый образец хранится в парафине достаточно длительное время, что позволяет произвести его повторное тестирование.
Возможность установить тип раковых клеток и стадию болезни.
Помогает обнаружить первичный очаг злокачественной опухоли.
Результаты исследования отличаются максимальной достоверностью – 99%.

Кроме этого данная методика лабораторной диагностики способна устанавливать присутствие некоторых факторов, которые не может показывать гистологический анализ:

Рецепторы к половым гормонам женского организма.
Степень чувствительности к препаратам противоопухолевого действия.
Сосудистый фактор развития злокачественной опухоли.
Активные маркеры онкологического новообразования.

Хотя ИХГ и отличается высокой информативностью по сравнению с гистологией, в отдельных клинических ситуациях анализ может оказаться малоинформативным либо показать неверный результат:

«Не умеет» отличать невус от меланомы вследствие одинакового окрашивания их клеток.
Если женщина придерживается безглютеновой диеты, то результат чаще всего является ложноотрицательным.
Дороговизна исследования.

Данный вид диагностической методики обладает способностью протестировать любые ткани организма человека. Если врач назначает пациентке прохождение иммуногистохимии при раке молочной железы, то решение объясняется следующими моментами:

Необходимо определить нозологическую и гистологическую природу патологического очага.
Требуется установить класс опухоли.
Нужно выявить место расположения первичного образования. Если локализация не выявлена, то его нахождение определяется по отдельному метастазу.
Необходимо определиться с прогнозом дальнейшего течения злокачественного процесса.
Возникает необходимость уточнить либо откорректировать дальнейшую терапию.
Надо подтвердить либо исключить присутствие болезнетворных микроорганизмов.

Помимо этого, иммуногистохимический метод диагностики позволяет:

Узнать степень восприимчивости раковых клеток к медикаментам таргетной группы либо химиотерапии.
Определить резистентность новообразования к отдельным группам химиопрепаратов (для раковых опухолей МЖ, имеющих рецепторы к эстрогену в схему лечения добавляются гормональные лекарства).
Посредством теста на фермент пролиферации узнать степень агрессивности злокачественной опухоли.

Необходимо отметить, данный лабораторный метод назначается не только при онкологии молочных желез — он может быть порекомендован и в тех ситуациях, когда в анамнезе присутствует:

Бесплодие.
Рак матки.
Целиакия.
Туберкулез.
Гастрит хронической формы.
Почечная недостаточность.
Болезни репродуктивных органов.
Системное заболевание соединительных тканей.

Иммуногистохимический анализ не имеет существенных противопоказаний к своему проведению. Невозможность его выполнения отмечается только в той ситуации, когда присутствуют непреодолимые сложности с взятием образца ткани из патологического очага.

К тому же относительным запретом к процедуре на этапе проведения биопсии является:

Некорректная свертываемость крови.
Аллергия на анестезирующие препараты.
Патологии крови.
Прием лекарств антикоагулянтов.

В какой период менструального цикла лучше сдавать гистохимический анализ для исследования патологического образования в молочной железе? По мнению специалистов, самым оптимальным временем для проведения процедуры является:

19-22 день месячного цикла при 28-дневном менструальном цикле.
23-26 день менструального цикла при 35-дневном месячном цикле.

В первую очередь осуществляется взятие частицы ткани опухоли, так называемая биопсия, имеющая несколько вариаций своего выполнения. Зачастую требуемый кусочек биоптата извлекается посредством очень тонкой иглы. В отдельных случаях нужный биоматериал берется в ходе хирургического вмешательства после выполнения надреза тканей груди.

Иммуногистохимия молочной железы выполняется поэтапно, в такой последовательности:

Добытый образец материала фиксируется, а для предотвращения его преждевременного высыхания перекладывается в раствор формалина.
Подготовленный биоматериал отправляется на исследование
На данном этапе процедуры исследуемый материал обезжиривается и заливается медицинским парафином.
Затем биоптат нарезается тонкими пластинками толщиной не более 1 мкм, а затем перекладывается на медицинские стекла для исследования.
Подготовленный образец поддается окрашиванию реактивами обусловленной концентрации.
Степень окраски химических реактивов со злокачественными клетками зависит от присутствия определенных рецепторов. Чем ярче получается цвет, тем большее количество рецепторов имеется в исследуемом материале.

Сколько ждать результат ИХГ? Сроки выполнения анализа зависят от количества используемых маркеров:

Применение до 5 ферментов – в течение 7 дней.
Использование более 5 маркеров – не больше 15 дней.
При необходимости срочного получения результата – через 3 часа.

Как расшифровывать данные иммуногистохомического теста? Интерпретация добытой в ходе анализа информации осуществляется врачом-онкологом. На бланке заключения в непременном порядке указываются:

Параметры Ki 67(фермент пролиферативной активности), которым определяется степень злокачественного процесса.
Уровень онкопротеина (обозначается как HER2NEY).
Показатели некоторых гормонов, от которых зависят особенности поведения опухоли, интенсивность развития и скорость проявления метастазов, где ER — рецептор эстрогенов, а PR — рецептор прогестерона.

Результат окрашивания сопоставляется со специальной шкалой:

Показатель шкалы	Расшифровка
0-1+	Норма, то есть, раковые клетки отсутствуют.
2+	Средняя концентрация HER2-белка в исследуемом образце и наличие отрицательного тела.
3+	Повышенное присутствие HER2-белка, онкология – положительная.

Исходя из полученной информации, определяется приемлемый вариант лечения:

Позитивный HER2 свидетельствует о присутствии опухоли способной к прогрессированию и быстрому увеличению в размере. В данной ситуации назначается прохождение медикаментозной терапии.
Отрицательный либо негативный характер HER2 требует применения более агрессивных препаратов – курс химиотерапии.

К тому же специалисты обращают внимание на следующее:

Завышенный показатель эстрогена и прогестерона в исследуемом материале указывает на активное прогрессирование новообразования и возможное присутствие метастазов.
Средний уровень гормонов свидетельствует об умеренном формировании раковой опухоли, поэтому присутствует шанс избавиться от нее при помощи медикаментозной терапии.

При анализе учитывается и степень показателя на онкогенность, который обозначается знаком Ki-67:

Меньше 10% — выживаемость составляет 95%.
15-17%– исход благоприятен.
До 35%– стремительное развитие опухоли.
Выше 85-95% – 100% летальный исход.

Необходимо подчеркнуть, заключение иммуногистохимии не является диагнозом, а выступает как информационный источник для лечащего врача.

Иммунногистохимическая методика диагностики грудных желез не провоцирует никаких отрицательных последствий для здоровья пациентки. Неприятными моментами является:

Возникновение боли на этапе проведения биопсии, однако практически всегда область груди для проведения манипуляции обезболивается анестезирующим средством.
Занесение инфекции при игнорировании правил антисептики, что может привести к воспалительному процессу.
Проявление мигрени, как реакция на анестетик. В данной ситуации головная боль носит временный характер и купируется обезболивающими средствами

Иммуногистохимия назначается в тех случаях, когда невозможно произвести дифференцирование патологического очага в груди при помощи гистологического исследования либо возникает необходимость уточнения некоторых молекулярных нюансов опухоли.

Суть методики заключается в установлении присутствия определенных белков, которые характерны для раковых клеток того или иного вида образования.

Иммуногистохимическое исследование в онкологии – это разновидность исследования ткани с помощью специальных реактивов по принципу антиген-антитело.

При иммуногистохимическом исследовании используются реактивы, которые содержат антитела, отмеченные специальными веществами.

Антитело – это белок, который связывается в тканях с определенными молекулами — антигенами, после чего возникает реакция. Если же таких молекул нет, то и реакции не будет.

По этому признаку можно судить, присутствует в ткани интересная нам молекула или нет. Это похоже на то, если нанести на белый стол бесцветный клей.

Невооруженным глазом на белом фоне он практически незаметен, но стоит насыпать на стол мелкого песка, как клей становится виден за счет прилипших песчинок.

По правилам иммуногистохимическое исследование при раке всегда проводится в специализированной лаборатории.

Для его проведения необходима опухолевая ткань, полученная в результате биопсии или операции.

Иммуногистохимическое исследование проводится для определения наличия в опухолевых клетках различных точек приложения, например, наличие рецепторов эстрогенов (ER) и прогестеронов (PR).

Также иммуногистохимия выполняется для определения показателя Ki-67 (индекс пролиферативной активности опухолевых клеток), гиперэкспрессии белка Her2neu, VEGF (сосудистый фактор роста), р53.

Иммуногистохимическое исследование при раке выполняется для того, чтобы понять, какими препаратами можно лечить злокачественную опухоль, и к каким видам препаратов она чувствительна.

Самый распространённый анализ, определяемый при иммуногистохимическом исследовании, это наличие рецепторной чувствительности к гормонам у опухоли.

ER и PR — протеиновые рецепторы на поверхности опухолевых клеток.

В организме человека постоянно вырабатываются гормоны — эстроген и прогестерон. Эти гормоны воздействуют на ER и PR рецепторы, что приводит к стимуляции роста опухолевых клеток.

Чаще всего наличие рецепторов ER/PR определяют при раке молочной железы. Их наличие дает возможность, помимо стандартных методов лечения, применить гормональную терапию.

При гормон позитивном раке молочной железы, назначаются препараты: Тамосксифен, Экземестан (Аромазин), Летрозол (Фемара), Анастразол (Аримидекс), Гексэстрол (Синестрол) и другие.Также, считается, что гормонально-зависимый рак молочной железы отличается спокойным течением и редким метастазированием.

Чувствительность опухолевых клеток к гормональной терапии выражается в баллах от до 10. Опухоль считается гормонозависимой, начиная с 2-х баллов. и требует добавления к лечению гормональной терапии.

Her2Neu — это рецептор эпидермального фактора роста раковой клетки. Это — ген, который воздействует на мембранные рецепторы клетки, и стимулирует её к усиленному делению.

В некоторых опухолях (чаще всего рак молочной железы, рак пищевода, рак желудка) присутствует гиперэкспрессия (повышенная активность) Her2Neu, что вызывает быстрое деление опухолевой клетки и её повышенную активность.

Также снижается эффективность химиотерапии, лучевой терапии, гормональной терапии.

Из-за этого опухоли с Her2neu позитивным статусом отличаются агрессивным течением.

Существует две методики определения наличия у опухоли гена Her2neu:

Результаты иммуногистохимического исследования выражаются в баллах:

0-1 означает, что опухоль без гиперэкспрессии Her2neu.
3 означает, что опухоль с гиперэкспрессией Her2neu.

Метод FISH (Флуоресцентная гибридизация in situ).

В отличие от иммуногистохимического исследования, при котором определяются белки, при методе FISH определяется наличие генов, кодирующих протеины Her2neu. В зависимости от их наличия, определяется гиперэкспрессия Her2neu.

В современной онкологии гиперэкспрессию Her2neu определяют, чтобы понять, необходимо ли добавление к лечению ингибиторов Her2neu.

Для лечения опухолей с гиперэкспрессией рецептора Her2Neu активно и успешно используются таргетные препараты Трастузумаб (Герцептин), Пертузумаб (Перьета), Трастузумаб-эмтанзин (Кадсила), Бейодайм (Трастузумаб+Пертузумаб). Эти препараты прицельно блокируют рецепторы Her2neu, тем самым останавливая активный рост опухолевых клеток и повышая их чувствительность к химиопрепаратам. Добавление таргетной терапии к стандартной химиотерапии при лечении Her2neu позитивных опухолей, серьезно увеличивает общую выживаемость и результат противоопухолевого лечения.

Ki-67 — это маркер пролиферативной активности опухолевой клетки. Данный параметр оценивается в процентах и показывает, сколько процентов опухолевых клеток активно делятся.

Если Ki-67 меньше 15%, опухоль считается слабоагрессивной, при показателе Ki-67 от 30 до 50% опухоль считается агрессивной, а при показателе Ki-67 выше 50% опухоль является высокоагрессивной.

Также Ki-67 является фактором прогноза течения опухолевого заболевания и ответа опухоли на химиотерапевтическое лечение.

Определяется это простым способом: чем ниже показатель Ki-67, тем хуже опухоль реагирует на химиотерапевтическое лечение. И наоборот — чем выше показатель Ki-67, тем лучше опухоль будет отвечать на химиотерапию.

Белок p53 — это транскрипционный фактор, регулирующий клеточный цикл. В быстро делящихся клетках обнаружено увеличение концентрации белка р53 по сравнению с клетками, делящимися медленно, что обусловлено высоким риском их онкогенности.

Белок p53 предотвращает образование злокачественных опухолей в нашем организме. В норме, антионкоген р53 находится в неактивном состоянии, а при появлении повреждений ДНК в здоровой клетке — активируется.

Функция белка р53 состоит в удалении тех клеток, которые являются потенциально онкогенными.

Это называется — индуцированный апоптоз, уничтожение потенциально опасной клетки.

При иммуногистохимическом исследовании, повышенное содержание белка p53 обнаруживается в 50% злокачественных клеток, что позволяет им беспрепятственно делиться и избегать апоптоза (уничтожения).

Количество белка p53, определяют в дополнение к показателю Кi67, для того, чтобы понять насколько агрессивна опухоль и определить дальнейшее течение болезни. Если уровень белка p53 высокий, значит опухоль не агрессивная и не склонна к метастазированию и быстрому росту.

Если же, показатель белка p53 низкий, то значит опухоль агрессивна и склонна к быстрому росту в окружающие ткани и метастазированию.

VEGF – это сигнальный белок, вырабатываемый клетками для активного роста новых сосудов в уже существующей сосудистой системе.

Есть несколько видов белка VEGF, и каждый воздействует на определенный рецептор VEGFR (Vascular endothelial growth factor receptor). Для того чтобы активно делиться, опухоли нужно питание, а для этого нужны сосуды, по которым это питание будет поступать.

Именно по этой причине в опухолевых клетках содержится повышенное содержание белка VEGF — для того, чтобы в короткие сроки строить сосудистые сети.

Наличие белка VEGF в опухоли говорит о возможности применения таргетной терапиитакими препаратами, как Бевацизумаб (Авастин), Рамуцирумаб (Цирамза), Афлиберцепт (Залтрап). Они перестраивают сосудистую сеть опухоли, тем самым лишая её питания.

Иммунотерапия в онкологии появилась сравнительно недавно, но уже успела показать удивительные результаты в лечении опухолей. Механизм иммунотерапии рака заключается в том, что препарат позволяет иммунитету увидеть опухоль и уничтожить её. Ответственные за «видимость» опухоли белки PD-1, PDL-1 и PDL-2 в достаточном количестве присутствуют не во всех опухолях. Именно поэтому одним пациентам иммунотерапия помогает, а другим нет.

Чаще всего определение гиперэкспрессии белка PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2 необходимо при меланоме, немелкоклеточном раке легкого, раке желудка и раке почки.

Для того чтобы отобрать пациентов, которым показана иммунотерапия, проводится определение наличия экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, при помощи флюоресцентной гибридизации in situ (FISH). При наличии экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, показано применение иммунотерапии препаратами Пембролизумаб (Кейтруда), Ниволумаб (Опдиво), Атезолизумаб (Тецентрик).

В современной онкологии иммуногистохимическое исследование играет очень важную роль, так как при помощи этого исследования онкологи определяют наличие тех или иных факторов в опухоли, которые позволяют грамотно и адекватно составить дальнейшее лечение пациента и говорить о прогнозах заболевания.

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы (ИГХ) – лабораторный способ изучения тканей, полученных с помощью биопсии. Методика иммуногистохимии применяется чтобы:

определить характер и тип патологии;
выявить чувствительность, а также устойчивость клеток опухоли к тем или иным вариантам химиотерапии или радиотерапии;
обнаружить источник рака, если имеются метастазы неясного генеза;
установить степень распространения ракового процесса;
узнать гистогенетическое происхождение заболевания;
оценить успешность проведённого лечения;
диагностировать пролиферацию новообразования;
определить нозологический вариант раковой опухоли.

Противопоказаний процедура ИГХ практически не имеет. Проблемы с проведением анализа возникают лишь при невозможности забора образцов повреждённых клеток по причине труднодоступной локализации онкообразования.

Для проведения иммуногистохимического исследования нужна поражённая опухолью ткань. Обычно ее получают при выполнении биопсии или после проведения операции.

Взятый образец помещают в формалин и отправляют в лабораторию. Там его обезжиривают, заливают специальным парафином. Потом выполняют микротомирование – делают тонкие срезы до 1 мкм с парафиновых блоков.

Их раскладывают на специальных стёклах. Лишь потом начинают процедуру.

Выполняется окрашивание исследуемого материала определёнными реактивами в необходимой концентрации. Для анализа может применяться малая панель – с набором из 5 разновидностей антител или большая панель – насчитывающая от 6 типов маркеров.

От количества HER2 рецепторов зависит цветовая комбинация реактивов с опухолевыми клетками. Чем их больше имеется в исследуемом образце, тем интенсивнее окраска. Результаты анализа ИГХ обычно готовы в течение 1-2 недель. Точность иммуногистохимии зависит от субъективного восприятия результатов гистологом.

Иммуногистохимия отображает концентрацию HER2-белка (рецептора человеческого эпидермального фактора роста) в патологическом образце. Благодаря ему в здоровом организме контролируется нормальный процесс деления и самовосстановления клеток.

Почти у 25 % женщин с карциномой молочной железы рецептор человеческого эпидермального фактора роста производит чрезмерное количество HER2. Потом клетки начинают неконтролируемо расти и делиться. Итоги иммуногистохимического исследования HER2 статуса при карциноме грудной клетки интерпретируют в зависимости от интенсивности окраски по специальной шкале:

0-1+ обозначает, что HER2-белок обнаружен в нормальном количестве и раковая опухоль негативная (75% ситуаций). Необходимости на этом этапе заболевания в медикаментозных препаратах нет;
2+ подтверждает среднюю концентрацию HER2-белка в исследуемом материале и наличие отрицательной карциномы груди;
3+ сигнализирует, что фиксируется превышение выработки HER2-белка, а онкологическое образование положительное (25%).

HER2 позитивный рак груди характеризуется агрессивным вариантом течения. Опухоль увеличивается намного быстрее, чем при HER2 негативной карциноме. В 30% случаев HER2-положительный вариант с течением времени преобразовывается в HER2 — отрицательный.

Если после исследования подтверждается положительный HER2, то доктор может назначить лечение препаратами Лапатаниб и Герцептин. Эти медикаменты используются лишь при позитивной форме HER2. Они прикрепляются к белку HER2, не позволяют ему достичь злокачественных клеток и стимулировать их рост. Не рекомендуется применение Лапатаниба и Герцептина для лечения негативной карциномы груди.

Если опухоль оценена на 2+, то желательно провести ещё один анализ. Полученный результат не всегда правдиво обозначает превышение показателей HER2-белка.

Для уточнения информации дополнительно выполняют тест FISH. Он показывает уровень HER2-белка в каждой клетке и отвечает за его перепроизводство.

FISH-тест бывает либо положительный (нормальное количество HER2) либо отрицательный (амплификация генов).

При выполнении ИГХ учитывается также процентное соотношение Ki-67, характеризующее злокачественность ракового процесса. Если при диагностированной карциноме груди Ki-67 – 15%, то прогноз, скорее всего, будет благоприятным. Если Ki-67 достигает 30% и более, то опухоль считается высокоагрессивной.

Только специалист должен ставить точный диагноз на основании результатов расшифровки иммуногистохимии и при необходимости, итогов других анализов.

Иммуногистохимическое исследование – эффективная, высокоинформативная и достаточно новая методика дифференциального диагностирования онкологических опухолей, которая помогает определить её гистогенез на клеточном уровне.

источник