Генетические аспекты рака молочной железы

Клинические и генетические аспекты наследственного рака молочной железы (РМЖ) Бит-Сава Елена Михайловна

480 руб. | 150 грн. | 7,5 долл. ‘, MOUSEOFF, FGCOLOR, ‘#FFFFCC’,BGCOLOR, ‘#393939’);» onMouseOut=»return nd();»> Диссертация — 480 руб., доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников

Автореферат — бесплатно , доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников

Бит-Сава Елена Михайловна. Клинические и генетические аспекты наследственного рака молочной железы (РМЖ) : диссертация . кандидата медицинских наук : 14.00.14 / Бит-Сава Елена Михайловна; [Место защиты: ГУН «Научно-исследовательский институт онкологии им. Профессора Н.Н. Петрова»»].- Санкт-Петербург, 2005.- 90 с.: ил.

Глава 1. Современные аспекты наследственного рака молочной железы (обзор литературы) 9

Глава 2. Материалы и методы исследования 28

2.1. Анализ наследственных аспектов больных РМЖ 29

2.2. Генетическое исследование мутаций генов BRCA1 (5382insC, 185delAG),BRCA2(6174 delT) 34

Глава 3. Результаты исследования 38

3.1. Частота мутаций BRCA1 (5382 insC,185 delAG), BRCA2 (6174 delT) у больных с косвенными признаками наследственного РМЖ 41

3.1.1 Билатеральный рак молочной железы и BRCА-статус 42′

3.1.2. Рак молочной железы у молодых женщин и BRCА-статус 51

3.1.3 .BRCА-статус у больных раком молочной железы и раком яичников 54

3.1.4.Онкологический семейный анамнез (РМЖ и/или РЯ) HBRCA-статус 60

3.1.5 .Сочетание косвенных признаков наследственного рака молочной железы 63

3.2. Клинические и морфологические особенности BRCA-ассоциированного рака молочной железы 66

Практические рекомендации 82

Экспериментальные и клинические исследования в значительной мере объясняют причины и механизмы возникновения рака молочной железы (РМЖ), как результат накопления генетических повреждений на протяжении определенного промежутка времени. На сегодняшний день известно, что гормоны, в частности эстрогены, являются важным, но не единственным звеном в патогенезе РМЖ, вызывая усиление репликации клеток, гены которых подверглись мутации. Два варианта нарушений на молекулярном уровне отвечают за развитие злокачественной опухоли: мутации ДІЖ и индукция клеточной пролиферации (Wemstein I., 1988). Под воздействием мутаций ключевые гены, регулирующие хромосомную репликацию, рост, развитие, дифференцировку и гибель клетки, либо инактивируются, либо активируются (Wemstein L, 1990). Каждый из этих генов (EGFR, Her2/neu, erbB2, с-тус, циклин D1) амплифицируется при РМЖ, и способен усиливать клеточное деление (Pearson О., 2000). Пролиферация вызывает «опухоль-формирующий» эффект, путем усиления экспансии клеток (Cohen S., 1990) Характеристика генетических повреждений позволяет отчетливее рассмотреть общую картину патогенеза РМЖ и разработать более целесообразные меры профилактики, ранней диагностики и лечения.

На сегодняшний день выделяют «семейный» и «наследственный» рак молочной железы. Под семейным РМЖ подразумевается аккумуляция нескольких случаев данного заболевания в пределах одной семьи. Подобный феномен может, в частности, быть ассоциированным с воздействием общего канцерогенного фактора. Следует оговориться, что ни один из подобных канцерогенов пока не идентифицирован. В других случаев, семейная агрегация РМЖ определяется наследованием специфического генетического дефекта, обусловливающего резко увеличенный риск возникновения новообразования. В настоящее время считается, что не менее 5 % случаев рака молочной железы имеют наследственную природу. Некоторые из т.н. «высокопенетрантных» генов РМЖ уже идентифицированы. Наиболее часто упоминаются гены BRCA1 и BRCA2, отвечающие за репарацию двунитевых разрывов ДНК. Носительство мутаций в BRCA1 и BRCA2 увеличивает индивидуальный риск развития РМЖ до 85-100%. Мутации в генах BRCA ассоциированы не только с РМЖ, но и с раком яичников (РЯ). Пенетрантность BRCA-дефектов по отношению к РЯ несколько ниже, и составляет примерно 30-60%. Относительно редко наследственные формы РМЖ связаны с наличием мутаций в других генах, таких как р53, ATM, СНЕК-2 и т.д.

Диагноз «наследственного» РМЖ позволяет выделить группы повышенного (иногда почти фатального) риска возникновения РМЖ и РЯ. Для подобных относительно небольших групп женщин представляется целесообразным создавать специальную систему диспансеризации, гарантирующую доступность и высокую надёжность ранней диагностики РМЖ и РЯ. В исключительных случаях диагноз наследственного ракового синдрома предполагает обоснование не только определенной схемы диагностических мероприятий, но также и обоснованность профилактического хирургического вмешательства.

К сожалению, диагностика и, тем более, скрининг наследственного РМЖ затруднен, из-за высокой стоимости соответствующих лабораторных тестов. Широкий генетический скрининг наследственных форм РМЖ представляется пока невозможным по соображениям экономического характера. В подавляющем большинстве стран, ДНК-диагностика применяются только в отношении тех женщин, у которых имеются косвенные клинические признаки наследственного ракового синдрома. К таковым относят: 1) случаи РМЖ и/или РЯ у ближайших кровных родственников пациентки (прежде всего, у матери и сестёр); 2) ранний возраст возникновения заболевания (до 35-40 лет; при более свободной трактовке этого критерия — до 50 лет); 3) первично-множественный характер онкологического процесса (синхронные и метахронные билатеральные РМЖ; сочетания опухолей молочной железы и яичников) 4) национальная принадлежность (еврейская, польская, эстонская, литовская).

Как упоминалось выше, полноценная диагностика BRCA мутаций пока остаётся малодоступной для практической медицины. Действительно, секвенирование примерно 20 000 пар нуклеотидов, необходимое для определения статуса генов BRCA, подразумевает наличие соответствующего дорогостоящего оборудования, большие расходы на лабораторные реагенты (примерно 2000-3000 долларов США на 1 анализ) и огромные трудозатраты (примерно 2 человеко-месяца на одно исследование). Однако,, некоторые «паллиативные» подходы могут быть предложены для широкого внедрения уже сегодня. В частности, большого внимания заслуживает тот факт, что некоторые BRCA-мутации обнаруживаются с повышенной частотой практически во всех популяциях. Например, мутации 185deIAG (BRCA1), 5382insC (BRCA1), 6174deIT (BRCA2), первоначально обнаруженные у женщин-евреек европейского происхождения, обнаруживаются с повышенной частотой у больных РМЖ в странах Западной Европы, России, Польше, странах Прибалтики, Испании и т.д., причём не только у пациенток еврейской национальности.

В отличие от полномасштабного анализа всей нуклеотидной последовательности генов BRCA, диагностика подобных «горячих» мутаций представляется вполне реалистичной задачей.

В Российской Федерации генетическое консультирование онкологических больных пока развито несколько хуже, чем в промышленно развитых странах Европы и США. Остаётся неясным, какая доля пациентов нуждается в подобном дополнительном обследовании (т.е. какова встречаемость клинических признаков, ассоциированных с наследственными онкологическими синдромами). Предстоит также выяснить, в какой мере относительно простые и доступные лабораторные тесты, в частности анализ «горячих» мутаций в РМЖ-ассоциированных генах, могут улучшить ситуацию в отношении профилактики и ранней диагностики РМЖ. Остается также неясным характер клинического течения наследственного РМЖ, его чувствительность к эндокринотерапии, химиотерапии и другим лечебным мероприятиям.

Целью настоящей работы является изучение клинических особенностей BRCA-ассоциированного РМЖ, и их взаимосвязь с носительством «founder» мутаций в генах BRCA1 и BRCA2.

1. Определить частоту BRCA-ассоциированных характеристик РМЖ (семейный анамнез РМЖ, РЯ, молодой возраст при выявлении заболевания, первично-множественный характер онкологического процесса) у больных, проходящих лечение в НИИ онкологии им. проф. Н.Н. Петрова.

2. Оценить ассоциации между косвенными признаками наследственного РМЖ.

3. Выяснить, частоту повторяющихся мутаций в генах BRCA (185delAG (BRCA1), 5382insC (BRCA1), 6174delT (BRCA2)) в Российской популяции.

4. Изучить характер взаимосвязи между косвенными признаками BRCA-ассоциированного РМЖ и «ґош ег»-мутациями в генах BRCA1, BRCA2.

1. Впервые определен удельный вес и распространенность BRCA-ассоциированной формы заболевания среди больных РМЖ T1-4N0-3M 2. Проанализирован характер и ассоциации косвенных характеристик наследственного РМЖ.

3. Определена частота терминальных мутаций генов BRCA1 (185delAG, 5382insC), 6174delT (BRCA2) у больных с косвенными признаками наследственного РМЖ.

4. Оценены клинико-морфологические особенности BRCA-ассоциированного РМЖ.

Выработаны рекомендации по отбору пациенток для медико-генетического консультирования. На основании оценки результатов молекулярно-генетических исследований внедрены в рутинную клиническую практику некоторые лабораторные процедуры, позволяющие идентифицировать BRCA-ассоциированные формы РМЖ.

Положения, выносимые на защиту

1. Представляется целесообразным проведение медико-генетической консультации больным РМЖ с возрастом выявления злокачественной опухоли до 45 лет, первично-множественной опухоли (РМЖ и РЯ), билатерального рака молочной железы или при наличии онкологического семейного анамнеза по РМЖ и\или РЯ.

2. При сочетании нескольких косвенных признаков наследственного заболевания возрастает вероятность взаимосвязи РМЖ с носительством «ґоітс!ег»-мутаций в генах BRCA1 (5382insC), 6174delT(BRCA2).

3. В половине случаев синхронных БРМЖ заболевание ассоциировано с мутациями в терминальных генах BRCA1 (5382insC), 6174delT(BRCA2).

4. Двустороннее поражение молочных желез и наличие в семье пробанда случая рака яичников в 100 % случаях определялось мутациями в генах BRCA1 (5382insC) и BRCA2 (6174 delT).

Реализация результатов работы

Результаты работы внедрены и используются в практической и научно-исследовательской работе НИИ онкологии им. проф. Н.Н.Петрова МЗ РФ

Объем и структура диссертации

Диссертация состоит из введения, 3 глав, общего заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Диссертационная работа изложена на 105 страницах машинописного текста, включает таблиц 11 и 18 рисунков. Список литературы состоит из 231 источников отечественных и иностранных авторов.

Случаи РЫЖ, РЯ у ближайших кровных родственников пациентки (прежде всего у матери и сестёр); первично-множественный характер онкологического процесса у родственников 1-2 степени родства. 2.Возраст женщин до 45лет на момент выявления рака молочной эюелезы. 3.Первично-множественный характер онкологического процесса у больной: сочетание РЫЖ и РЯ. 4. Синхронный и метахронный билатеральный рак молочной железы.

В качестве первичной документации использовались истории болезни и амбулаторные карты пациентов поступивших в стационар 1 хирургического отделения.

При анализе первичной медицинской документации учитывались следующие клинические и морфологические данные: Возраст больных Стадия заболевания (по классификации Международного противоракового союза TNM (пересмотр 2002г.) Вид предоперационного лечения (полихимиотерапия, гормонотерапия, лучевая терапия, в рамках международных клинических исследований) Вид хирургического лечения Наличие в анамнезе больной РМЖ злокачественных опухолей (в т.ч. молочной железы) у родственников 1-2 степени родства Возраст больной при обнаружении первой опухоли (в случаях БРМЖ, первично-множественных новообразований) и характер проведенного лечения. Возраст и количество детей Национальность Гистологические характеристики опухоли Иммунногистохимические характеристики опухоли

При решении вопроса о целесообразности проведения генетической консультации учитывался прогноз основного заболевания . Мы не предлагали больным с тяжелой сопутствующей патологией и отягощенным прогнозом, при наличии признаков наследственного РМЖ пройти дополнительные процедуры. Женщинам разъяснялась цель консультации врача-генетика и дополнительного исследования ДНК лейкоцитов периферической крови.

В исследование не вошла одна больная по причине отказа от генетической консультации, одна больная в связи с тяжелой сопутствующей патологией.

На каждого пациента с косвенными признаками наследственного РМЖ заполнялась индивидуальная анкета (представлена ниже), в которой фиксировались возраст на момент постановки диагноза РМЖ, семейный анамнез (онкологические заболевания у кровных родственников 1 и 2 степени родства: возраст больной в момент выявления опухоли, характер проведенного лечения, продолжительность жизни), национальная принадлежность пациентки, наличие и возраст детей.

Для выполнения лабораторных процедур, на каждого пациента с теми или иными признаками наследственного РМЖ заполнялось направление на генетическое тестирование мутаций генов BRCA (185delAG, 5382insC), BRCA2 (6174delT) в ДНК лейкоцитов периферической крови (представлено ниже).

В направлении на генетическое тестирование кроме семейного анамнеза фиксировался возраст пациентки, стадия заболевания по системе TNM, первично-множественный характер процесса, билатеральный РМЖ метахронный и синхронный (возраст больной при выявлении первой опухоли. При наличии первичного документа (истории болезни или амбулаторной карты), анкеты и направления на генетическое тестирования каждая пациентка проходила консультирование у врача-генетика. Больные с выявленными «гоипс1ег»-мутациями в ходе молекулярно-генетического исследования приглашались на повторную медико-генетическую консультацию.

Первичное лечение по поводу монолатерального РМЖ: оперативное пособие в объеме органосохраняющей операции (2 случая), ампутации молочной железы вместе с нижней группой подмышечных лимфатических узлов (11 случаев), в остальных случаях выполнена модифицированная радикальная мастэктомия по Пейти-Дайсону.

Часть больных, перенесших мастэктомию, и особенно органосохраняющую операции, подвергались послеоперационной лучевой терапии и различным видам адъювантного системного лечения (эндокринотерапии и/или химиотерапии).

Тамоксифен назначался больным при положительном уровне рецепторов эстрогена и/или прогестерона, у больных с 1990 года — от 2 до 5 лет, с 1997 в течении 5 лет и более. Гормонотерапия назначалась по окончании лучевого и/или химиотерапевтического лечения.

Больным с T3-4TN0-3M0 проходящих неоадъювантное лечение в рамках международных клинических исследований (ингибиторы ароматазы при ЭР+опухолях или таксол + доксорубицин при ЭР-опухолях), при наличии одной из характеристик наследственного РМЖ предлагалось пройти процедуры дополнительного молекулярно-генетического обследования (с их согласия).

В ходе медико-генетической консультации решался вопрос о возможном наследственном характере злокачественного заболевания. Существенным компонентом данного этапа было получение информированного согласия больной на последующий ДНК-анализ; с согласия пациентки производился забор крови на генетическое исследование.

Источником для анализа ДНК являлись лейкоциты периферической крови.

Лабораторные процедуры предусматривали анализ «горячих» мутаций в генах BRCA1, BRCA2. Для этого использовались методики выделения ДНК, аллель-специфической ПЦР и электрофоретического анализа ДНК-фрагментов.

Выделение ДНК из лейкоцитов периферической крови производилось с помощью модифицированного соль-хлороформного метода (MuUenbach R. et al., 1989). Эритроциты крови подвергались гипоосмолярному лизису путем разбавления препарата в соотношении 1:3, затем путем центрифугирования осаждали лейкоциты. Далее лейкоциты ресуспендировали в 1 мл Трис-HCL (рН=8,3), ImM ЭДТА. С целью разрушения мембраны клеток добавляли к полученной смеси Тритон до концентрации 1%. Ядра клеток осаждались при центрифугировании, ресуспендировались в 1 мл Трис-HCL (рН=8,3), ImM ЭДТА и лизировались при добавлении додецилсульфата натрия до концентрации 0,5 %. В течении 12 часов при температурном режиме 65 С проводился частичный протеолиз белков с помощью протеиназы К (100 мкг/мл), далее к раствору добавлялся NaCL до конечной концентрации 1,5 М и равный объем хлороформа. Экстракция проводилась органическим растворителем производилась на протяжении 30 минут, при медленном покачивании, с целью удаления нерастворимых элементов клеток, белков и липидов. По окончании центрифугирования ДНК, содержащуюся в водяной фазе, переосаждали двумя объемами 96 % С2Н50Н; осадок промывали 70 % С2Н50Н, далее растворяли до концентрации 1 мкг/мкл в растворе ТЕ.

Полимеразная цепная реякциия (TTTF

Для изучения потерь гетерозиготности применялись локус-специфические пары праймеров. В целях оптимизации результатов полимеразной цепной реакции (ПНР) в работе использовались следующииие геномные праймеры и фрагменты:

Мутация 185 delAG ? brl-lws 5 — gCT Atg CAg AAA АТС TTA gAg TgT С -3 ? brl-2ms 5-ATg СТА TgC AgA AAA TCT TAg TgT CC -3 ? brl-3a 5-CAgTTAAggAAATCAgCAATTACAATAg-3 Мутация 5382insC brl-4ws 5 -AAg CgA gCA AgA gAA TTC CAg — 3 — brl-5ms 5 -AgC gAg CAA gAg AAT TCC CA — У — brl-6a 5-AgAACCTgTgTgAAAgTATCTAgcACTg -3 Полимеразная цепная реакция амплификации. Реакция производилась на приборе Mini Cicler (MI Research) 1-й цикл: 15 минут при температуре +95С для активации фермента. 2-й цикл: фаза отжига при температуре + 64 С в течение 45 сек, фаза синтеза при температуре +72 С в течение 1 минуты, фаз денатурации при температуре +95С в течении 30 сек; число повторов — 35. Полученный продукт реакции анализировался путем вертикального электрофореза фрагментов в 10% полиакрил-амидном геле с их последующей визуализацией в УФ-свете после окраски бромидом этидия. Состав полиакриламидного геля (ПААГ): акрил -амид-10%, бис-акриламид 0,3%. Буфер — 1х ТВЕ рН=7,0-7,4.

Каждый исследуемый образец представлен парой, в одной из которой производилась амплификация нормального (дикого) аллеля, а в другой -мутантного. Нечетные образцы — дикий тип, четные — мутантный. Образец в дорожках 15-16 гетерозиготен по данной мутации. Дорожка с мутантным фрагментом отмечена знаком ф.

С целью определения критериев необходимости проведения медико-генетической консультации были изучены данные (истории болезни, амбулаторные карты) о 653 больных РМЖ, получивших лечение в отделении опухолей молочной железы НИИ онкологии им. пр. Н.Н. Петрова с 1 октября 2003 по 13 октября 2004 гг.

Косвенные признаки наследственного рака молочной железы

Из 653 больных РМЖ у 105, имелись один или сочетания нескольких признаков наследственной формы заболевания, 103 пациентам было проведено медико-генетическое консультирование, а также анализ «ґоипс!ег»-мутаций в генах BRCA1 (5382 insC,185 delAG), BRCA2 (6174 delT). Одна больная отказалась от дополнительной консультации и генетического исследования, одна больная не вошла в исследование по причине тяжелой сопутствующей патологии.

Основным, часто встречающимся критерием, согласно которому пациенты обследовалась дополнительно, явился возраст выявления злокачественной опухоли молочной железы. 69 из 653 (10,6 %) оказались моложе 45 лет. Из общего числа пациентов, прошедших медико-генетическую консультацию (N=103) у 52 (50,5 %) одним из косвенных признаков был возраст женщины до 45 лет на момент обнаружения опухоли молочной железы.

Наиболее пристальное внимание уделялось отягощенному онкологическому семейному анамнезу; всем пациентам, кровные родственники которых страдали РМЖ и/или РЯ, предлагалось пройти генетическую консультацию. Предварительно детально изучался семейный анамнез таких больных: возраст выявления злокачественного новообразования у родственников 1-2 степени родства, характер проведенного лечения, стадия заболевания, продолжительность жизни. Косвенные признаки наследственного РМЖ за изучаемый промежуток времени представлены в табл.3.1.

Частота мутаций BRCA1 (5382 insC,185 delAG), BRCA2 (6174 delT) у больных с косвенными признаками наследственного РМЖ

Всем женщинам с характеристиками наследственного РМЖ были выполнены генетические тесты на предмет наличия «йшпс!ег»-мутаций, полученные результаты представлены в табл. 3. Из общего числа больных (п=103) у 17 были найдены мутации в исследуемых генах репарации ДНК, обращает на себя внимание тот факт, что мутации BRCA1 (5382 insC) были найдены у 16 женщин, BRCA2 (6174 delT) — у одной, а дефект BRCA1 (185 delAG) — не обнаружен вовсе.

Билатеральный рак молочной железы

Из общего числа BRCA-позитивных РМЖ (п-17) на долю двусторонних опухолей приходится 41,2 % (табл. 3.4). Из общего числа больных БРМЖ, получивших лечение в 1 хирургическом отделении с октября 2003 по октябрь 2004 7 (31,8 %) случаев двусторонней злокачественной опухоли молочных желез ассоциировано с мутациями в генах BRCA1, BRCA2 (табл.3.5). Половина синхронных БРМЖ ассоциировано с мутациями в генах BRCA; на долю BRCA-ассоциированного метахронного БРМЖ приходится только 21,4% от общего числа больных метахронным БРМЖ.

BRCA-cmamyc синхронного билатерального рака молочной железы Синхронные опухоли молочных желез встречались редко (у 8 из 653 больных или в 1,2 % случаев). Из 8 обследованных пациенток на предмет наличия дефектов ДНК репарации, терминальные мутации генов наследственной предрасположенности были обнаружены у 4 больных (50 %): у 3 — мутация BRCA1 5382insC , у 1 -BRCA2 6174delT. Пример 1. Больная Р. 49 лет Диагноз: Синхронный билатеральный рак молочных желез T2N1M0 слева, ТІN2МО справа..

Анамнез заболевания: 19/01/2004 выполнены секторальные резекции молочных желез (МЦ ФГУП Адмиралтейские верфи). Гистологическое заключение № 517801: инвазивный протоковый рак умеренной степени злокачественности правой молочной железы; № 61879 секреторный рак умеренной степени злокачественности левой молочной железы). Больная консультирована в НИИ онкологии им. пр. Н.Н. Петрова, с диагнозом билатеральный синхронный рак молочных желез, состояние после нерадикальной операции. 17/02/2004 Билатеральная мастэктомия. Послеоперационный период протекал без осложнений.

Гистологическое заключение операционного препарата правой молочной железы № 262273: киста с обилием фибробластов, метастазы инвазивного протокового рака в 2 подмышечных и в 2 подключичных лимфатических узлах в пределах капсулы.

При иммунногистохимическом исследование уровень рецепторов эстрогенов равен 3 фмолъ/мг белка, прогестерона 4 фмолъ/мг белка прогестерона 3 и 4 фмолей/мг белка соответственно.

Гистологическое заключение операционного препарата левой молочной железы №262274: липогранулема с полостью распада, метастазы инвазивного протокового рака в 3 подмышечных лимфатических узлах. Иммунногистохимическое исследование уровня рецепторов эстрогенов и прогестерона 18 и 3 фмолей/мг белка соответственно.

При тщательном обследовании органов грудной клетки, органов брюшной полости и скелета очагов метастатического поражения не выявлено. С 26/11/2003 по 23/01/2004 в стационаре радиологического отделения пациентка получила облучение парастерналъных лимфатических узлов в СОД 39,9 Гр на аппарате ЛУЭВ 15 М1Ее=15МеВ. Проведенное лечение перенесла без осложнений, больная выписана в удовлетворительном состоянии под наблюдение онколога по месту жительства, по окончании лучевой терапии было рекомендовано првести адыовантную химиотерапию по схеме FAC х 6 циклов с последуюгцей гормонотерапией тамоксифеном по 20 мг в сутки в течение 5 лет.

Учитывая наличие косвенного признака BRCA-ассоциированного РМЖ (синхронный билатеральный РМЖ) пациентке проведено медико-генетическое консультирование, произведен забор крови на генетическое исследование мутаций в BRCA1, ВЯСА2-генах.

На приведенном рис.3.2 наглядно отображено, что у пациентки отсутствует основная характеристика наследственного заболевания: нет случаев РМЖ и/или РЯ у кровных родственников в четырех поколениях. В ходе выполняемого генетического исследования обнаружена мутация BRCA1 5382insC, вероятно ассоциированная с наличием другого косвенного признака наследственного РМЖ, а именно — синхронного БРМЖ.

В сентябре 2003 года больная обнаружила уплотнение в правой молочной железе, обратилась в НИИ онкологии им. пр. Н.Н. Петрова, где после клинических и инструментальных методов обследования был установлен диагноз рак правой молочной железы T2N0M0.

28/10/2003 Выполнена органосохраняющая операция правой молочной железы. Послеоперационный период протекал без осложнений.

Гистологическое заключение № 260694: опухолевый узел размерами 2,8 х 2,5 см в верхне-внутреннем квадранте правой молочной железы — инвазивный протоковый рак 3 степени гистологической злокачественности по Elston & Ellis (3+3+2) с умеренной лимфоидной инфильтрацией в строме. Лимфатические узлы без метастатических поражений (pT2N0M0). Края резекции опухоли без опухолевых клеток.

При иммунногистохимическом исследовании уровень рецепторов эстрогенов равен 34 фмолей/мг белка, прогестерона 4 фмолей/мг белка. Оценка сверхэкспрессии Her-2/Neu негативная (цитоплазматическое и неполное мембранное окрашивание клеток +1).

Больная выписана в удовлетворительном состоянии 11.11.2003, рекомендовано: адъювантное лечение тамоксифеном по 20 мг в сутки в течении 5 лет после завершения лучевой терапии на ткань молочной железы. С 26/11/2003 по 23/01/2004 в стационаре радиологического отделения пациентка получила курс лучевой терапии в СОД 50 Гр на ткань молочной железы на аппарате РОКУС и на парастерналъные лимфатические узлы в СОД39,9 Гр на аппарате ЛУЭВ 15 М1Ее=15МеВ.

Учитывая наличие двух косвенных признаков BRCA-ассоциированного РМЖ: первично-мноэюественный характер опухолевого процесса (РЯ и РМЖ) и РМЖ у сестры больной 40 лет, пациентке проведено медико-генетическое консультирование.

В ходе выполненного генетического анализа обнаружена мутация BRCA15382insC. Изучая родословную больной Б. не представляется возможным определить по какой линии произошла передача герминалъной мутации в гене BRCA1. Однако, очевидно, что основная причина наличия герминалъной мутации ассоциирована с наследственным фактором, так сестра пробанда болела аналогичным заболеванием, а также необходимо отметить еще один очень важный признак наследственного РМЖ — первичная множественность в комбинации РМЖ и РЯ (рис.3.11).

Из общего числа больных РМЖ (N=653) получивших медико-генетическую консультацию по причине семейного онкологического анамнеза у 46 женщин кровные родственники болели РМЖ, у 7- в семейном анамнезе были случаи РЯ (табл.3.2 и 3.3). Мы сравнили частоту нахождения мутаций в генах BRCA1, BRCA2 в двух группах больных: в одной группе кровные родственники 1-2 степени родства болели РМЖ, в другой группе этой важной характеристики наследственной формы заболевания не было отмечено. На приведенных рис.3.12 и 3.13 видно, что случаев «BRCA-позитивных» РМЖ выше в первой группе больных и составляет 15,2 %, во второй — 8,8 % (р 0.05).

На приведенном рис. 3.14 прослеживается путь наследования РМЖ по материнской линии в двух поколениях, причем у матери пробанда был БРМЖ, у сестры — БРМЖ и РЯ, и РМЖ у второй сестры. Однако, в ходе генетического исследования мутаций в генах BRCA1 (5382 insC,185 delAG), BRCA2 (6174 delT) обнаружено не было, что вероятно связано с наличием мутаций в других локусах, а может быть, и в других генах репарации ДНК. Примечательно, что этот косвенный признак часто был определяющим в отборе кандидатов для проведения генетического консультирования; у 7 больных (41,2%) BRCA-ассоциированным РМЖ (п=17) кровные родственники болели РМЖ. Положительный генетический анализ на наличие мутаций в исследуемых генах репарации ДНК в 71,4 % случаев оказался положительным при наличии РЯ у кровных родственников больной: у 4 была обнаружена мутация BRCA1 5382insC , у 1 — BRCA2 6174del Т (табл.3.3).

источник

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.14) на тему: Клинические и генетические аспекты наследственного рака молочной железы (РМЖ)

Автореферат диссертации по медицине на тему Клинические и генетические аспекты наследственного рака молочной железы (РМЖ)

КЛИНИЧЕСКИЕ И ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ НАСЛЕДСТВЕННОГО РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Специальность: -14.00.14 — онкология 03.00.04 — биохимия

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Работа выполнена в Государственном Учреждении Науки НИИ онкологии им. проф. Н.Н.Петрова Федеральное агентство по здравоохранению и социальному развитию

Заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор, член-корр. РАМН Доктор медицинских наук, профессор

Доктор медицинских наук, профессор

Доктор биологических наук, профессор

Владимир Федорович Семиглазов Евгений Наумович Имянитов

Лев Михайлович Бериггейн Михаил Николаевич Блинов

Ведущее научное учреждение:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. H.H. Мечникова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Защита диссертации состоится «_»_2005 г. в_часов на

заседании диссертационного совета Д ГУН НИИ онкологии им. проф.

Н.Н.Петрова Федеральное Агентство по здравоохранению и социальному развитию (197758, Санкт-Петербург, Песочный-2, ул. Ленинградская, д.68)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан «_»_2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, д.м.н.

Заболеваемость раком молочной железы (РМЖ) как в России, так и в большинстве стран продолжает увеличиваться. Рак молочной железы является одной из наиболее частых причин смерти у женщин. В течение первого года с момента установления диагноза РМЖ на 2003 год летальность составила 12,1% (Чиссов В.И.. и др., 2004).

За последние 18 лет РМЖ в структуре заболеваемости занимает первое место в России (Мерабишвили В.М., 2003; Чиссов В.И. и др., 2003). Прогресс молекулярной генетики с привлечением биохимии позволяет по-новому рассмотреть некоторые стороны этиологии и патогенеза РМЖ, базируясь на результатах клинических и эпидемиологических исследований. На сегодняшний день патогенез РМЖ можно рассматривать как результат многоступенчатых генетических мутаций, происходящих в течение длительного промежутка времени в эпителиальных клетках протоков и долек молочной железы. Но вероятнее всего, одна из наиболее важных внутренних внутриклеточных причин — это наследование поврежденного гена, которое увеличивает индивидуальный риск РМЖ (Szabo С., 1995). Только 5 % случаев РМЖ имеют истинно наследственную природу, связанную с мутацией в генах репарации ДНК: BRCA1(185 del AG и 5382 Ins С), BRCA2 (6174 del Т) (Caldas С. et al., 1997; Grren M.H., 1997; Narod S,A., 1994).

Носительство мутаций в BRCA1 и BRCA2 увеличивает индивидуальный риск развития РМЖ до 85-100%, в 10 раз вероятность рака яичников, а также риск развития рака во второй молочной железе до 35% (Narod S.A., 1999).

Положительный семейный анамнез в отношении РМЖ — один из самых значительных факторов риска развития заболевания. Женщины, у которых родственники первой степени родства болели РМЖ, риск заболевания увеличивается в 2-3 раза по сравнению с общей популяцией, и в 8 раз — если болела родная сестра (Семиглазов В.Ф. с соав., 2003). Тем не менее, во многих семьях с предполагаемым аутосомно-доминантным типом наследования предрасположенности к РМЖ, не обнаруживают мутаций в этих генах или сцепленности с ними. Это позволяет предположить, что, по всей видимости, существуют другие, еще необнаруженные высокопенетрантные гены, предрасполагающие к РМЖ.

Широкий генетический скрининг наследственных форм РМЖ представляется пока невозможным, ДНК-диагностика применяются только в отношении тех женщин, у которых имеются косвенные клинические признаки наследственного ракового синдрома:

1. Случаи РМЖ и/или РЯ у ближайших кровных родственников пациентки (прежде всего, у матери и сестёр);

2. Первично-множественный характер онкологического процесса (сочетания опухолей молочной железы и яичников);

3. Молодой возраст больной при выявлении заболевания (до 45 лет);

4. Кипятеря пкный пак молочной железы (БРМЖУ

РОС НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА •Д^Петервург

Диагноз «наследственного» РМЖ имеет, безусловно, клиническую значимость, т.к. позволяет выделить группы повышенного (иногда почти фатального) риска РМЖ и РЯ. Для подобных относительно небольших групп женщин представляется целесообразным создавать специальные условия, гарантирующие повышенную доступность и высокую надёжность ранней диагностики РМЖ и РЯ. В исключительных случаях диагноз наследственного ракового синдрома заставляет рассматривать не только схему диагностических мероприятий, но и обоснованность профилактического оперативного вмешательства. Необходимо четко определить сходные и различные признаки наследственного и спорадического РМЖ, используя, по показаниям, генетическое консультирование для пациентов с учетом клинических особенностей перечисленных выше. Диагноз «наследственного» РМЖ имеет на сегодняшний день огромную клиническую значимость, т.к. позволяет обнаружить у женщин с помощью лабораторных тестов высокий риск возникновения РМЖ и РЯ.

2. Оценить ассоциации между косвенными признаками наследственного РМЖ.

3. Выяснить частоту повторяющихся мутаций в генах BRCA (185delAG (BRCA1), 5382insC (BRCA1), 6174dclT (BRCA2)) в Российской популяции.

4. Изучить характер взаимосвязи между косвенными признаками BRCA-ассоциированного РМЖ и «foundcTO-мутациями в генах BRCA1, BRCA2.

1. Впервые определен удельный вес и распространенность BRCA-ассоциированной формы заболевания среди больных РМЖ T1-4N0-3M0

2. Проанализирован характер и ассоциации косвенных характеристик наследственного РМЖ.

4. Оценены юшнико-морфологические особенности BRCA-ассоциированного РМЖ.

Выработаны рекомендации по отберу пациешок для медико-генешческого консультирования. На основании оценки результатов молекулярно-генетических исследований внедрены в рутинную клиническую практику некоторые лабораторные процедуры, позволяющие идентифицировать BRCA-ассоциированные формы РМЖ.

Положения, выносимые на защиту

1. Представляется целесообразным проведение медико-гснетической консультации больным первичным РМЖ моложе 45 лет, больным с первично-множественными опухолями (РМЖ и РЯ), у больных синхронным БРМЖ, а также при наличии в семейном анамнезе РМЖ и\или РЯ.

2. При сочетании нескольких косвенных признаков наследственного заболевания возрастает вероятность взаимосвязи РМЖ с носительством «Аэипс1ег»-мутаций в генах BRCA1 (5382insC), BRCA2 (6174delT).

3. В половине случаев синхронный БРМЖ ассоциирован с мутациями в терминальных генах BRCA1 (5382insC), BRCA2 (6174delT).

Внедрение результатов работы в практику

Результаты работы внедрены и используются в практической и научно-исследовательской работе НИИ онкологии им.проф. Н.Н.Петрова.

Объем и структура диссертации

Диссертация состоит из введения, 3 глав, общего заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Диссертационная работа изложена на 105 страницах машинописного текста, включает таблиц 11 и 18 рисунков. Список литературы состоит из 231 источника отечественных и иностранных авторов.

В исследование вошли больные раком молочной железы T1-4N0-3M0, прошедшие лечение в отделении опухолей молочной железы НИИ онкологии им. проф. H.H. Петрова с октября 2003 по октябрь 2004 п. Из 653 больных были отобраны 103 женщины с косвенными признаками наследственного рака молочной железы, которым в последствии проводилось медико-генетическое обследование.

Проведенная работа состояла из трех частей:

1. Анализ наследственных аспектов заболевания путем опроса больной и изучения первичной документации.

2. Медико-генетическая консультация пациентов с BRCA-ассоциированными признаками.

3. Лабораторное тестирование на наличие мутаций генов BRCA1 (185delAG, 5382insC), 6174delT (BRCA2) в образцах крови больных, прошедших медико-генетическую консультацию с «положительным результатом».

Медико-генетическая консультация проводилась при наличии одного или нескольких косвенных признаков наследственного РМЖ: 1 .Случаи РМЖ и/или РЯ у ближайших кровных родственников пациентки (прежде всего у матери, дочери и сестёр); первично-множественный характер онкологического процесса у родственников 1-2 степени родства.

2.Возраст женщин до 45 лет на момент выявления РМЖ

3.Первично-множественный характер онкологического процесса у больной; сочетание РМЖ и РЯ.

4. Синхронный и метахронный БРМЖ.

Дополнительные клинические и морфологические данные больных РМЖ были получены из первичной медицинской документации (история болезни, амбулаторная карта).

Для генетического исследования «йшпс1ег»-мутаций в генах BRCA1 (185delAG, 5382insC), BRCA2 (6174delT) использовались методики выделения ДНК, аллель-специфической ПЦР и электрофоретического анализа ДНК-фрагментов.

Выделение ДНК из лейкоцитов периферической крови производилось с помощью модифицированного соль-хлороформного метода (Mullenbach R. et al., 1989). Эритроциты крови подвергались гипоосмолярному лизису путем разбавления препарата в 3 раза водой, затем путем центрифугирования осаждали лейкоциты. Далее лейкоциты ресуспендировали в 1 мл Трис-HCL (рН=8,3), 1шМ ЭДТА. С целью разрушения мембраны клеток добавляли к полученной смеси Тритон до концентрации 1%. Ядра клеток осаждались при центрифугировании, ресуспендировались в 1 мл Трис-HCL (рН=8,3), 1шМ ЭДТА и лизировались при добавлении додецилсульфата натрия до концентрации 0,5%. В течении 12 часов при температурном режиме 65 С проводился частичный протеолиз белков с помощью протеиназы К (100 мкг/мл), далее к раствору добавлялся NaCL до конечной концентрации 1,5 М и равный объем хлороформа. Экстракция проводилась органическим растворителем производилась на протяжении 30 минут, при медленном покачивании, с целью удаления нерастворимых элементов клеток, белков и липидов. По окончании центрифугирования ДНК, содержащуюся в водяной фазе, переосаждали двумя объемами 96% С2Н50Н; осадок промывали 70% С2Н50Н, далее растворяли до концентрации 1 мкг/мкл в растворе ТЕ.

Полимеразная цепная реакциия (ПЦР) Для изучения потерь гетерозиготности применялись локус-специфические пары праймеров. В целях оптимизации результатов полимеразной цепной реакции (ПЦР) в работе использовались следующииие геномные праймеры и фрагменты:

■ brl-lws 5′-gCT Atg CAgAAAATCTTA gAg TgT С -3′

■ brl-2ms 5′- ATg СТА TgC AgA AAA TCT TAg TgT CC -3′

■ brl-3a 5′-CAg TTA Agg AAA TCA gCA ATT АСА ATA g-3′

■ brl-4ws 5′-AAg CgA gCA AgA gAA TTC CAg -3′

■ brl-5ms 5′-AgC gAg CAA gAg AAT TCC CA — 3′

■ brl-6a 5′-AgA ACC TgT gTg AAA gTA TCT Age ACT g -3′

■ br2-ls 5′-CAT AAC CAA AAT ATg TCT ggA TTg gAg -3′

■ br2-wa 5′-CTg ATA CCT ggA CAg ATT TTC CAC -3′ ) • br2-3ma 5′-CCT ggA CAg ATT TTC CCT TgC -3′

Условия полимеразной цепной реакции (ПЦР)

Состав ПЦР реакции: 50 шМ KCl, Tris-EDTA буфер рН=8.2,200 mkM dATP,

dTTP, dCTP, dGTP каждого. 2,5 шМ MgC12, 0.5 mkM каждого праймера, 2

единицы Thermos tar taq pol (heat-activated), 1 ткл раствора ДНК.

Полимеразная иепная реакция амплификации.

Реакция производилась на приборе Mini Cicler (MI Research)

1-й цикл: 15 минут при температуре +95°С для активации фермента.

2-й цикл: фаза отжига при температуре + 64 °С в течение 45 сек, фаза синтеза при температуре +72 °С в течение 1 минуты, фаз денатурации при температуре +95°С в течении 30 сек; число повторов — 35.

Полученный продукт реакции анализировался путем вертикального электрофореза фрагментов в 10% полиакрил-амидном геле с их последующей визуализацией в УФ-свете после окраски бромидом этидия. » Состав полиакриламидного геля (ПААГ): акрил -амид-10%, бис-акриламид-

Рис. 1. Пример анализа мутации BRCA1 5382тзС посредством аллель-специфической ПЦР

У 103 больных обнаружены один или несколько признаков наследственного РМЖ. Всем больным проведено медико-генетическое консультирование и ДНК-исследование мутаций в генах BRCA1, BRCA2. Мутации BRCA1 (5382 insC) были найдены у 16 женщин, BRCA2 (6174 deIT) — у одной, а дефект BRCA1 (185 delAG) — не обнаружен вовсе.

Рис.2. Спектр мутаций BRCA1 и BRCA2 у больных с косвенными признаками наследственного РМЖ

Основным, часто встречающимся критерием, согласно которому пациенты обследовалась дополнительно, явился возраст больной при выявлении злокачественной опухоли молочной железы. Из общего числа пациентов, прошедших медико-генетическую консультацию (N=103) у 52 (50,5 %) одним

из косвенных признаков был возраст женщины до 45 лет на момент обнаружения опухоли молочной железы. Наиболее пристальное внимание уделялось отягощенному онкологическому семейному анамнезу; всем пациентам, кровные родственники 1 -2 степени родства которых страдали РМЖ и/или РЯ, предлагалось пройти генетическую консультацию. Предварительно детально изучался семейный анамнез таких больных: возраст выявления злокачественного новообразования у родственников 1-2 степени родства, характер проведенного лечения, стадия заболевания, продолжительность жизни. Не все больные РМЖ, родственники которых страдали такими злокачественными опухолями как рак желудка, рак легких, рак тела мазки и др. проходили консультацию врача-генетика, учитывая нехарактерное сочетание с данным заболеванием. Только при сочетании с одним из косвенных признаков I наследственного РМЖ или при наличии нескольких случаев злокачественных

опухолей в пределах одной семьи, больные проходили дополнительное клинико-генетическое обследование. Онкологический семейный анамнез (РЯ и/или РМЖ) у кровных родственников пациентов определял обязательное медико-генетическое обследование. В пределах одной семьи у 46 пациентов (44,7 %) встречались от 1 до 3 случаев РМЖ.

БРМЖ также выделялся в отдельный критерий проведения генетической консультации, причем с синхронной опухолью было 8 (7,8%) случаев, с метахронной -13 (13,6 %) больных.

Особо выделялись редкие сочетания РЯ и РМЖ — 8 больных (7,8%), как наиболее вероятные случаи нахождения мутаций генов репарации ДНК. Для пациентов с первично-множественными опухолями других локализаций (0,6%) также было рекомендовано исследование крови на предмет «Аэипс1ег»-мутаций в исследуемых генах ВЯСА1, ВЯСА2.

Встречаемость ВЯСА-ассоциированных характеристик среди больных

с косвенными признаками наследственного РМЖ*

Клинические особенности Число Больных (п=103) %

Пациенты =2 1 (5,9 %) 1(5,9%) 15(88,2%)

РМЖ у кровных родственников Нет 1 >=2 10(58,9%) 4 (23,5 %) 3(17,6%)

РМЖ у матери или сестры Да Нет 7(41.1%) 10(58.9%)

РЯ у кровных родственников Да Нет 5 (29,4 %) 12(70,6%)

Статус первичной опухоли Тх Tis Т1 Т2 ТЗ Т4 Число случаев (п=24)* 1(4,2%) 0 5 (20,85 %) 11 (45,8 %) 5 (20,85 %) 2 (8,3 %)

Наличие метастазов в регионарные л\у Nx N0 N1 N2 N3 1 (4,16%) 13(54,2%) 18 (33,3 %) 2 (8,34 %) 0

Статус ЭР первичной опухоли + 13(54,2%) 11 (45,8%)

Статус ПР первичной опухоли + 5 (20,8 %) 19(79,2%)

* число опухолей (п) — 24 , т.к. у 7 больных БРМЖ

Наиболее часто встречающийся гистологический тип опухоли при ВЯСА-ассоциированном РМЖ, также как и при спорадическом РМЖ — инвазивный протоковтлй рак. Однако, существует некоторая особенность: у 1! ,8 % больных наследственным РМЖ выявлена медуллярная карцинома (2 больных), в то время как при спорадическом РМЖ данная форма встречается не чаще 2 %.

Иммуногистохимическая характеристика ВЛСА-ассоциированных РМЖ несколько отличается от спорадического: имеется тенденция к более низкому уровню экспрессии рецепторов эстрогенов и прогестерона в опухолевой ткани. В 19 опухолях (79,1 %) — уровень экспрессии рецепторов прогестерона отрицательный; в 11 опухолях (45,80/о) — уровень экспрессии эстрогенов отрицательный (табл.5).

У больных ВКСА-ассоциированным РМЖ, не было выявлено гиперэкспрессии Нег-2/Ыеи в ткани опухоли. Известно, что в общей группе больных РМЖ гиперэкспрессия Нег-2/ТЧеи встречается в 25 % случаев.

1.Определены критерии отбор’ больных РМЖ для проведения медико-генетической консультации и оценена их встречаемость:

а) случаи РМЖ и/или РЯ у ближайших кровных родственников — 12,4%;

б) возраст женщин до 45 лет на момент выявления РМЖ -10,6%;

г) синхронный и метахронный билатеральный рак молочной железы -2,4%.

2. У 16,4% больных с косвенными признаками наследственного РМЖ выявлены «й>шк1ег» — мутации в генах репарации ДНК: мутация 5382тзС генаВ11СА1 обнаружена у 16 больных, мутация 6174 с!е1Т генаВЯСА2- у одной больной.

В ходе исследования не обнаружены мутации !85с1е1ЛС в гене ВЯСА1.

3. Синхронный билатеральный РМЖ в 50% случаях ассоциирован с мутациями в генах В11СА1, ВЯСА2, а при сочетании этого признака наследственного заболевания с РЯ у кровных родственников больной, терминальные мутации в генах репарации ДНК выявляются в 100% случаев.

4. Терминальные мутации в генах ВЛСА1, ВЯСА2 выявлены у 71,4% больных РМЖ с наличием РЯ у кровных родственников 1-2 степени родства, и у 15,2% — с наличием РМЖ.

5. Для ВЛСА-ассоциированного РМЖ характерно сочетание косвенных признаков наследственного заболевания: при наличии одной характеристики частота мутаций в генах В11СА1, ВЯСЛ2 равна 15,2%, при сочетании двух признаков возрастает до 18,5%; и, наконец, при комбинации трех признаков достигает 25 %.

6. Между больными спорадическим РМЖ и наследственным РМЖ нет существенных отличий по гистологическому типу опухоли: преимущественно встречается инваэивный протоковый рак, однако медуллярный рак при BRCA-ассоциированной форме заболевания встречается несколько чаще (в 11.8 % против 1.9 %). Имеется тенденция к более низкому уровню экспрессии рецепторов эстрогенов, прогестерона и отсутствие сверхэкспрессии Her-2/Neu в опухолевой ткани у больных наследственным РМЖ.

1. Больным РМЖ с косвенными признаками наследственного заболевания: наличие у кровных родственников 1-2 степени родства рака молочной железы и/или рака яичников, больным с первично-множественными опухолями (РМЖ и РЯ), больным билатеральным раком молочной железы показано медико-генетическое обследование с последующим молекулярным анализом мутаций генов BRCA1 (5382insC), BRCA2 (6172deIT).

2. Определение BRCA-носительства мутаций (BRCA1 (5382insC), BRCA2 (6172delT)) целесообразно проводить у кровных родственников больных наследственным РМЖ.

3. Следует рекомендовать динамическое диспансерное наблюдение органов репродуктивной системы больным BRCA-ассоциированным РМЖ.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Бит-Сава Е.М. / Иевлева А.Г., Соколенко А.П., Чекмарева Е.В., Митюшина Н.В., Розанов М.Е., Беломытцева Н.В., Буслов К.Г, Лазарева Ю.Р., Туркевич Е.А, Мацко Д.Е, Бит-Сава Е.М., Семиглазов В.Ф., Чагунава О.Л., Devilee P., Cornelisse, Хансон К.П., E.H. Имянитов . «Славянская» мутация в гене NBS1 может увеличивать риск рака молочной железы.// Вопр.онкологии. — 2005, Т.51. — №1 (приложение). -10 С.

2. Bit-Sava Е.М. / Buslov К. G., Iyevleva A.G., Chekmeriova E.V., Suspitsin E.N., Togo A.V., Kuligina E.Sh., Sokolenko A.P., Matssko D.E., Turkevich E.A., Lazareva Y.R., Chagunava O.L., Bit-Sava E.M., Semiglazov V.F., Devilee P., Cornelisse P., Hanson К. P., Imyanitov E.N. / Nbs 1 657 Mutation Contribute only to a limited fraction of breast cancer cases in Russia.// Int. J. Cancer. -2005. — Vol. 114(4). — p. 585-589

3. Bit-Sava E.M. / Imyanitov E.N., Buslov K. G., Bit-Sava E.M., Iyevleva A.G., Suspitsin E.N., Togo A.V., Kuligina E.Sh., Sokolenko A.P., Semiglazov V.F., Matssko D.E., Lazareva Y.R., Hanson K.P. «Comparison of extremes» approach reveals a noticeable breast cancer predisposing role of the BRCA1 5382insC founder mutation in Russia.// ESMO Educational Conference, Budapest. — 2005

4. Бит-Сава Е.М. / Семиглазов В.Ф., Семиглазов В.В., Клетцель A.A., Бараш Н.Ю., Жильцова Е.К., Цырлина Е.В., Божок A.A., Мельникова O.A., Палтуев P.M., Дашян Г.А., Петровский С.Г., Арзуманов A.C., Иванов В.Г., Топузов Э. Э., Берштейн JI.M., Бит-Сава Е.М., Дамениа А.О., Зернов К.Ю. «Современная эндокринная терапия рака молочной железы».// Вопр. онкологии. — 2005.

Выражаю искреннюю признательность научному руководителю чл.-корр. РАМН, заслуженному деятелю науки РФ, профессору, доктору медицинских наук В.Ф. Семиглазову и всем сотрудникам НИИ онкологии им. проф. Н.Н.Петрова, особенно сотрудникам I хирургического отделения.

Приношу глубокую благодарность научному руководителю профессору, доктору медицинских наук E.H. Имянитову и всем сотрудникам лаборатории молекулярной онкологии.

Глава 1 .Современные аспекты наследственного рака молочной железы (обзор литературы).

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Анализ наследственных аспектов больных РМЖ.

2.2. Генетическое исследование мутаций генов BRCA1 (5382insC,

Глава 3. Результаты исследования.

3.1. Частота мутаций BRCA1 (5382 insC,185 delAG), BRCA2 (6174 delT) у больных с косвенными признаками наследственного РМЖ.

3.1.1 Билатеральный рак молочной железы и BRCA-статус.42′

3.1.2.Рак молочной железы у молодых женщин и BRCA-статус.

3.1.3 .BRCA-статус у больных раком молочной железы и раком яичников.

3.1.4.Онкологический семейный анамнез (РМЖ и/или РЯ) и BRCA-статус.

3.1.5 .Сочетание косвенных признаков наследственного рака молочной железы.

3.2. Клинические и морфологические особенности BRCAассоциированного рака молочной железы.

Экспериментальные и клинические исследования в значительной мере объясняют причины и механизмы возникновения рака молочной железы (РМЖ), как результат накопления генетических повреждений на протяжении определенного промежутка времени. На сегодняшний день известно, что гормоны, в частности эстрогены, являются важным, но не единственным звеном в патогенезе РМЖ, вызывая усиление репликации клеток, гены которых подверглись мутации. Два варианта нарушений на молекулярном уровне отвечают за развитие злокачественной опухоли: мутации ДНК и индукция клеточной пролиферации (Wemstein I., 1988). Под воздействием мутаций ключевые гены, регулирующие хромосомную репликацию, рост, развитие, дифференцировку и гибель клетки, либо инактивируются, либо активируются (Wemstein I., 1990). Каждый из этих генов (EGFR, Her2/neu, erbB2, с-шус, циклин D1) амплифицируется при РМЖ, и способен усиливать клеточное деление (Pearson О., 2000). Пролиферация вызывает «опухоль-формирующий» эффект, путем усиления экспансии клеток (Cohen S., 1990) Характеристика генетических повреждений позволяет отчетливее рассмотреть общую картину патогенеза РМЖ и разработать более целесообразные меры профилактики, ранней диагностики и лечения.

Как упоминалось выше, полноценная диагностика BRCA мутаций пока остаётся малодоступной для практической медицины. Действительно, секвенирование примерно 20 ООО пар нуклеотидов, необходимое для определения статуса генов BRCA, подразумевает наличие соответствующего дорогостоящего оборудования, большие расходы на лабораторные реагенты (примерно 2000-3000 долларов США на 1 анализ) и огромные трудозатраты (примерно 2 человеко-месяца на одно исследование). Однако,, некоторые «паллиативные» подходы могут быть предложены для широкого внедрения уже сегодня. В частности, большого внимания заслуживает тот факт, что некоторые BRCA-мутации обнаруживаются с повышенной частотой практически во всех популяциях. Например, мутации 185deIAG (BRCA1), 5382insC (BRCA1), 6174delT (BRCA2), первоначально обнаруженные у женщин-евреек европейского происхождения, обнаруживаются с повышенной частотой у больных РМЖ в странах Западной Европы, России, Польше, странах Прибалтики, Испании и т.д., причём не только у пациенток еврейской национальности.

2. Оценить ассоциации между косвенными признаками наследственного РМЖ.

3. Выяснить, частоту повторяющихся мутаций в генах BRCA (185delAG (BRCA1), 5382insC (BRCA1), 6174delT (BRCA2)) в Российской популяции.

4. Изучить характер взаимосвязи между косвенными признаками BRCA-ассоциированного РМЖ и «1Ъиг^ег»-мутациями в генах BRCA1, BRCA2.

2. Проанализирован характер и ассоциации косвенных характеристик наследственного РМЖ.

4. Оценены клинико-морфологические особенности BRCA-ассоциированного РМЖ.

Положения, выносимые на защиту

2. При сочетании нескольких косвенных признаков наследственного заболевания возрастает вероятность взаимосвязи РМЖ с носительством «£эипс1ег»-мутаций в генах BRCA1 (5382insC), 6174delT (BRCA2).

Реализация результатов работы

Объем и структура диссертации

Диссертация состоит из введения, 3 глав, общего заключения, * выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Диссертационная работа изложена на 105 страницах машинописного текста, включает таблиц 11 и 18 рисунков. Список литературы состоит из 231 источников отечественных и иностранных авторов.

Заключение диссертационного исследования на тему «Клинические и генетические аспекты наследственного рака молочной железы (РМЖ)»

1 .Определены критерии отбора больных РМЖ для проведения медико-генетической консультации и оценена их встречаемость: а) случаи РМЖ, РЯ у ближайших кровных родственников пациентов -12,4%. б) возраст женщин до 45лет на момент выявления рака молочной железы-10,6%. в) сочетание РМЖ и РЯ — 1,2%. г) синхронный и метахронный билатеральный рак молочной железы — 2,4%.

2. У 16,4 % больных с косвенными признаками наследственного РМЖ выявлены «founder» — мутации в генах репарации ДНК: мутация 5382insC гена BRCA1 обнаружена у 16 больных, мутация 6174 delT гена BRCA2 у одной больной. В ходе исследования не обнаружены мутации 185delAG в гене BRCA1.

3. Синхронный билатеральный РМЖ в 50% случаях ассоциирован с мутациями в генах BRCA1, BRCA2, а при сочетании этого признака наследственного заболевания с РЯ у кровных родственников больной терминальные мутации в генах репарации ДНК выявляются в 100% случаев.

4. Терминальные мутации в генах BRCA1, BRCA2 выявлены у 71,4% больных РМЖ с наличием РЯ у кровных родственников 1-2 степени родства, и у 15,2% — с наличием РМЖ.

5. Для BRCA-ассоциированного РМЖ характерно сочетание косвенных признаков наследственного заболевания: при наличии одной характеристики частота мутаций в генах BRCA1, BRCA2 равна 15,2%, при сочетании двух признаков возрастает до 18,5%; и, наконец, при комбинации трех признаков достигает 25 %.

6. Между больными спорадическим РМЖ и наследственным РМЖ нет существенных отличий по гистологическому типу опухоли: преимущественно встречается инвазивный протоковый рак, однако медуллярный рак при

BRCA-ассоциированной форме заболевания встречается несколько чаще (в 11.8 % против 1.9 %). Имеется тенденция к более низкому уровню экспрессии рецепторов эстрогенов, прогестерона и отсутствие сверхэкспрессии Нег-2/Neu в опухолевой ткани у больных наследственным РМЖ.

2. Определение BRCA-носительства мутаций (BRCA1 (5382insC), BRCA2 (6172delT)) целесообразно проводить также и у кровных родственников больных наследственным РМЖ.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2005 года, Бит-Сава, Елена Михайловна

1. Имянитов Е.Н., Пожарисский К.М., Хансон К.П. Молекулярно-геиетические подходы к профилактике, диагностике и лечению новообразований. // Казан, мед. журн. 2000. -Т.81, № 4. — С. 322-326.

2. Имянитов Е.Н., Калиновский в.П., Князев П.Г., Лыщев А.А., Монахов А.С., Новиков Л.Б., Того А.В., Федоров С.Н., Хансон К.П.Молекулярная генетика опухолей человека. // Вопр. онкол.-1996.-Т.43, №5.-С.7 — 12.

3. Имянитов Е.Н., Хансон К.П. Молекулярные аспекты патогенеза первично-множественных опухолей. // Росс, онкол. журн.- 1998, №5. С. 47 -51.

4. Имянитов Е.Н., Комочков И.В., Лыщев А.А., Того А.В. Молекулярная и клиническая онкология: точки соприкосновения. // Экспер. онкол. — 1993. -Т. 15, №5.-С. 3-8.

5. Имянитов Е.Н., Князев П.Г. Роль антионкогенов в опухолевом процессе. // Экспер. онкол. 1992. — Т. 14. — №5. — С. 3-17.

6. Имянитов Е.Н. Молекулярно-генетические аспекты патогенеза билатерального рака молочной железы. Автореф. дис. докт. мед. наук. — СПб., 2001.-С. 6-11.

7. Канцерогенез // Д.Г. Заридзе, А.Г. Татосян и др.; под ред. Д.Г. Заридзе. М.: Научный мир, 2000. — С.57-88

8. Моисеенко В.М., Семиглазов В. Ф., Тюляндин С. А. Современное лекарственное лечение местно-распространенного и метастатического рака молочной железы. СПб.: «Гриффон», 1997. — С. 11-16.

9. Семиглазов В. Ф., Нургазиев K.LLL, Арзуманов А.С. Опухоли молочной железы (лечение и профилактика). — СПб. 1997. — С. 6-24.

10. Хансон К.П., Имянитов Е.Н. Генетические аспекты возникновения и развития первично-множественных новообразований. // Первично-множественные злокачественные опухоли (ред. В.И. Чиссов, А.Х. Трахтенберг). М., «Медицина». — 2000. — С. 29-40.

11. Хансон К.П., Имянитов Е.Н. Молекулярная генетика рака яичников // Практич. онкол. 2000.- №4. — С. 3-6.

12. ACOG Committee on Genetics. Breast-ovarian cancer screening. // Obstet Gynecol.- 1996. Vol. 176. — P. 1-2.

13. Alan E. Guttmacher, M.D., Francis S. et al. Breast and Ovarian Cancer. // N. Engl. J. Med.-2003. Vol.348. — P.23-46.

14. Albertson D.G., Ylstra В., Segraves R., et al. Quantitative mapping of amplicon structure by array CGH identifies CYP24 as a candidate oncogene. // Nat. Genet. 2000. — Vol.25. — P.144-146.

15. Andersen T.I., Borresen A.L., Moller P. A common BRCA1 mutation in Norwegian breast and ovarian cancer families? // Am. J. Hum. Genet. 1996. -Vol. 59.-P. 486-487.

16. Armes J.E., Trute L., White D., et al. Distinct molecular pathogeneses of early-onset breast cancers in BRCA1 and BRCA2 mutation carriers: a population-based study. // Cancer Res. 1999. — Vol.59. — P. 2011-2017.

17. Armstrong K, Eisen A, Weber B. Assessing the risk of breast cancer. // N. Engl.J. Med. 2000. — Vol. 342. — P. 564-571.

18. Barkardottir R.B., Arason A., Egilsson V., et al. Chromosome 17q-linkage seems to be infrequent in Icelandic families at risk of breast cancer. // Act. Oncol. 1995. — Vol.34. — P. 657-662.

19. Brekelmans CTM, Seynaeve C., Bartels CCM et al. Effectiveness of breast cancer surveillance in BRCA1/2 gene mutation carriers and women with high familial risk. //J. Clin. Oncol. 2001. — №19- Vol. — 924-930.

20. Bieche I., Nogues C., Lidereau R. Overexpression of BRCA2 gene in sporadic breast tumors. // Oncogene. 1999. — Vol. 18. — P. 5232-5238.

21. Bourne Т.Н., Campbell S., Reynolds K.M. et al. Screening for ovarian cancer: the preliminary experience of a familial ovarian cancer center.// Gynecol. Oncol. 1993. -Vol.51. -P. 12-20.

22. Burke W., Daly M., Garber J. et al. Recommendations for follow up care of individuals with an inherited predisposition to cancer. II: BRCA1 and BRCA2. // JAMA. 1997. — Vol. — 277. — P.- 997-1003.

23. Brose M.S., Rebbeck T.R., Calzone K.A., et al. Cancer risk estimates for BRCA1 mutation carriers identified in a risk evaluation program. // J. Natl. Cancer Inst. 2002. — Vol.94. — P. 1365-1372.

24. Brekelmans C.T., Seynaeve C., Bartels C.C., et al. Effectiveness of breast cancer surveillance in BRCA 1/2 gene mutation carriers and women with high familial risk. //J. Clin. Oncol. 2001. — Vol.19. — P. 924-930.

25. Bork P., Blomberg N., Nilges M. Internal repeats in the BRCA2 protein sequence. //Nat. Genet. 1996. — Vol.13. -P.22-23.

26. Brunet J.S., Ghadirian P., Rebbeck T.R., et al. Effect of smoking on breast cancer in carriers of mutant BRCA1 or BRCA2 genes. // J. Natl. Cancer Inst.1998.-Vol. 90.-P. 761-766.

27. Berry D.A., Parmigiani G., Sanchez J., et al: Probability of carrying a mutation of breast-ovarian cancer gene BRCA1 based on family history. // J. Natl. Cancer Inst. 1997. — Vol. 89. — P. 227-238.

28. Backe J., Hofferbert S., Skawran В., et al. Frequency of BRCA1 mutation 5382insC in German breast cancer patients. // Gynecol. Oncol. 1999. — Vol. 72. -P. 402^106.

29. Boyd J., Rubin S. Hereditary ovarian cancer: molecular genetics and clinical implications. // Gynecol. Oncol. 1997. — Vol. 64. — P. 196-206.

30. Borg A., Dorum A., Heimdal K., et al. BRCA1 1675delA and 1135insA account for one third of Norwegian familial breast-ovarian cancer and are associated with later disease onset than less frequent mutations. // Dis. Markers.1999.-Vol. 15.-P. 79-84.

31. Burke W., Daly M., Garber J., et al. Recommendations for follow-up care of individuals with an inherited predisposition to cancer II: BRCA1 and BRCA2. // JAMA.- 1997.-Vol. 277.-P. 997-1103.

32. Couch F.J., DeShano M.L., Blackwood M.A., et al: BRCA1 mutations in women attending clinics that evaluate the risk of breast cancer. // N. Engl. J. Med. -1997. Vol.336. — P. 1409-1415.

33. Chart P.L., Franssen E. Management of women at increased risk for breast cancer: preliminary results from a new program // Can. Med. Assoc. J. 1997. -Vol.15 — 1235-1242.

34. Claus E.B., Risch N., Thompson W.D.: Genetic analysis of breast cancer in the cancer and steroid hormone study. // Am. J. Hum. Genet. 1991. — Vol. 48. — P. 232-242.

35. Li CI, Malone K.E., Weiss N.S. et al. Tamoxifen therapy for primary breast cancer and risk of contralateral breast cancer. // J. Natl. Cancer Inst. 2001. — Vol. -93. -P.1008-1013.

36. Claus E.B., Schildkraut J.M., Thompson W.D., et al. The genetic attributable risk of breast and ovarian cancer. // Cancer. 1996. — Vol. 77. — P. 2318-2324.

37. Chang J, Yang W.T., Choo H.F. Mammography in Asian patients with BRCA1 mutations. // Lancet. 1999- Vol. — 353. — P. — 2070-2071.

38. Couch F.J., DeShano M.L., Blackwood M.A. et al. BRCA1 mutations in women attending clinics that evaluate the risk of breast cancer. // N. Engl. J. Med. -1997. Vol. 336. -P.1409-1415.

39. Chlebowski R.T. Reducing the risk of breast cancer. // N. Engl. J. Med. -2000.-Vol. 343. P.191-198.

40. Chenevix-Trench G., Spurdle A.B., Gatei M., et al. Dominant negative ATM mutations in breast cancer families. // J. Natl. Cancer Inst. 2002. — Vol.94. -P. 205-215. Erratum, J. Natl. Cancer Inst. — 2002. — Vol.94. — p.952.

41. Claus E.B., Risch N., Thompson W.D. Genetic analysis of breast cancer in the cancer and steroid hormone study. // Am. J. Hum. Genet. 1991. — Vol.48. — P. 232-242.

42. Couch F.J., DeShano M.L., Blackwood M.A., et al. BRCA1 mutations in women attending clinics that evaluate the risk of breast cancer. // N. Engl. J. Med. -1997.-Vol.336.-P. 1409-1415.

43. Claus E.B., Schildkraut J.M, Iversen E.S., et al. Effect of BRCA1 and BRCA2 on the association between breast cancer risk and family history. // J. Natl. Cancer Inst. -1998. Vol. 90. — P. 1824-1829.

44. Claus E.B., Schildkraut J.M, Thompson WD, et al. The genetic attributable risk of breast and ovarian cancer. // Cancer. 1996. — Vol. 77. — P. 2318-2324.

45. Cavanee W.K., White R.L. The genetic basis of cancer. // Sci. Am. 1999. -Vol. 272.-P. 72-79.

46. Cleton-Jansen A.M., Collins N., Lakhani S.R. et al. Loss of heterozygosity in sporadic breast tumors at the BRCA2 locus on chromosome 13ql2-ql3. // Br. J. Cancer. 1995,- Vol. 72.-P. 1241-1244.

47. Peelen Т., van Vliet M., Petrij-Bosch A., et al. A high proportion of novel mutations in BRCA1 with strong founder effects among Dutch and Belgian hereditary breast and ovarian cancer families. // Am. J. Hum. Genet. 1997. — Vol. 60. — .P. 1041-1049.

48. Dobrovic A., Simpfendorfer D. Methylation of the BRCA1 gene in sporadic breast cancer. // Cancer Res. 1997. — Vol. 57. — P. 3347-3350.

49. De la Chapelle A. Disease gene mapping in isolated human populations: the example of Finland. // J. Med. Genet. 1993. — Vol. 30. — P. 857-865.

50. Diamond J.M., Rotter J.I.: Observing the founder effect in human evolution news., // Nature. 1987. — Vol. 329. — P. 105-106.

51. Dunning A.M., Healey C.S., Pharoah P.D., et al. A systematic review of genetic polymorphisms and breast cancer risk. // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 2003. — Vol.8. -P.843-854.

52. Dorum A., Hovig E., Trope C., et al. Three per cent of Norwegian ovarian cancers are caused by BRCA1 1675delA or 1135insA. // Eur. J. Cancer. 1999. -Vol. 35.-P. 779-781.

53. Easton D.F., Ford D., Bishop D.T., Breast Cancer Linkage Consortium. Breast and ovarian cancer incidence in BRCA1-mutation carriers. // Am. J. Hum. Genet. 1995. — Vol. 56. — P. 265-271.

54. Fearon E.R. Human cancer syndromes: clues to the origin and nature of cancer. // Science. 1997. — Vol. 278. — P. 1043-1050.

55. Fan S., Wang J.A., Yuan R., et al. BRCA1 inhibition of estrogen receptor signaling in transfected cells. // Science. 1999. — Vol. 284. — P. 1354-1356.

56. Frank T.S., Manley S.A., Olopade O.I., et al. Sequence analysis of BRCAland BRCA2: correlation of mutations with family history and ovarian cancer risk. // J. Clin. Oncol. 1998. — Vol. 16. — P. 2417-2425.

57. Fisher В., Costantino J.P., Wickerham D.L. et al. Tamoxifen for prevention of breast cancer: report of the National Surgical Adjuvant Breast and Bowel Project P-l Study. // J. Natl. Cancer Inst. 1998. — Vol. — 90. -P. 1371-1388.

58. Ford D., Easton D.F., Peto J. Estimates of the gene frequency of BRCA1 and its contribution to breast and ovarian cancer incidence. // Am. J. Hum. Genet. 1995.-Vol.57.-P. 1457-1462.

59. Frank T.S., Manley S.A., Olopade OI, et al: Sequence analysis of BRCA1 and BRCA2: correlation of mutations with family history and ovarian cancer risk. //J. Clin. Oncol. 1998. — Vol.16. — P. 2417-2425.

60. Ford D., Easton D.F., Stratton M., et al. Genetic heterogeneity and penetrance analysis of the BRCA1 and BRCA2 genes in breast cancer families. // Am. J. Hum. Genet. 1998. — Vol. 62. — P. 676-689.

61. Finkel E. Australia takes two-step approach on genetic studies. // Science. -1998. Vol.280. -P. 1831-1832.

62. Frank T.S., Manley S.A., Olopade O.I., et al. Sequence analysis of BRCA 1 and BRCA2: correlation of mutations with family history and ovarian cancer risk. //J. Clin. Oncol. 1998. — Vol.16. — P. 2417-2425.

63. Ford D., Easton D.F., Bishop D.T.,et al. Risks of cancer in BRCA1-mutation carriers. // Lancet. 1994. — Vol. 343. — P. 692-695.

64. Ford D., Easton D.F., Bishop D.T., et al. Breast Cancer Linkage Consortium. Risks of cancer in BRCA 1-mutation carriers. // Lancet. 1994. — Vol. 343.-P. 692-695.

65. Ford D., Easton D.F., Stratton M., et al. Genetic heterogeneity and penetrance analysis of the BRCA1 and BRCA2 genes in breast cancer families. // Am. J. Hum.Genet. 1998. — Vol. 62. — P. 676-689.

66. Ford D., Easton D.F., Stratton M., et al: Genetic heterogeneity and penetrance analysis of the BRCA1 and BRCA2 genes in breast cancer families. The Breast Cancer Linkage Consortium. // Am. J. Hum. Genet. 1998. — Vol. 62. -P. 676-689.

67. Futreal P.A., Liu Q, Shattuck-Eidens D. et al. BRCA1 mutations in primary breast and ovarian carcinomas. // Science. 1995. — Vol. 266. — P. 120-122.

68. Friedman L.S., Szabo C.I., Ostermeyer E.A., et al. Novel inherited mutations and variable expressivity of BRCA1 alleles, including the founder mutation 185delAG in Ashkenazi Jewish families. // Am. J. Hum. Genet. 1995. -Vol. 57.-P. 1284-1297.

69. Fisher В., Costantino J.P., Wickerham D.L., et al. Tamoxifen for prevention of breast cancer: report of the National Surgical Adjuvant Breast and Bowel Project P-l study. // J. Natl. Cancer Inst. 1998. — Vol. 90. — P. 1371-1388.

70. Gayther S.A., Warren W., Mazoyer S., et al: Germline mutations of the BRCA1 gene in breast and ovarian cancer families provide evidence for a genotype-phenotype correlation. // Nature Genet. 1995. — Vol.11. — P. 428^133.

71. Gayther S.A., Mangion J., Russell P., et al: Variation of risks of breast and ovarian cancer associated with different germline mutations of the BRCA2 gene. // Nature Genet. 1997. — Vol. 15. — P. 103-105.

72. Grann V.R., Panageas K.S., Whang W., et al. Decision analysis of prophylactic mastectomy and oophorectomy in BRCA1 -positive and BRCA2-positive patients. // J. Clin. Oncol. 1998. — Vol.16. — P. 979-985.

73. Garber J.E., Goldstein A.M., Kantor A.F., et al. Follow-up study of twenty-four families with Li-Fraumeni syndrome. // Cancer Res. — 1991. Vol.51. — P. 6094-6097.

74. Gao Q., Neuhausen S., Cummings S., et al. Recurrent germ-line BRCA1 mutations in extended African American families with early-onset breast cancer. // Am. J. Hum. Genet. 1997. — Vol. 60. — P. 1233-1236.

75. Gayther S.A., Harrington P., Russell P., et al. Frequently occurring germline mutations of the BRCA1 gene in ovarian cancer families from Russia. // Am. J. Hum. Genet. 1997. — Vol. 60. — P. 1239-1242.

76. Greene M. Genetics of breast cancer. // Mayo Clin. Proc. 1997. — Vol. 72. -P. 54-65.

77. Gudmundsson J., Johannesdottir G., Arason A., et al. Frequent occurrence of BRCA2 linkage in Icelandic breast cancer families and segregation of a common BRCA2 haplotype. // Am. J. Hum. Genet. 1996. — Vol.58. — P.749-756.

78. Goode E.L., Dunning A.M., Kuschel В., et al. Effect of germ-line genetic variation on breast cancer survival in a population-based study. // Cancer Res. -2002. Vol.62. — P. 3052-3057.

79. Gayther S.A., Warren W., Mazoyer S. et al. Germline mutations of the BRCA1 gene in breast and ovarian cancer families provide evidence for a genotype-phenotype correlation. //Nat. Genet. 1995. — Vol. 11. — P. 428-433.

80. Hartmann LC, Schaid D, Sellers T, et al. Bilateral prophylactic mastectomy (PM) in BRCA1/2 mutation carriers. // Proc. Am. Assoc. Cancer Res. 2000. -Vol. 41.-P. 222-223.

81. Hartmann L.C., Schaud D.J., Woods J.E., et al. Efficacy of bilateral prophylactic mastectomy in women with a family history of breast cancer. // N. Engl. J. Med. 1999. — Vol. 340. P. — 77-84.

82. Hartmann L.C., Sellers T.A., Schaid D.J. et al. Efficacy of bilateral prophylactic mastectomy in BRCA1 and BRCA2 gene mutation carriers. // J. Natl. Cancer Inst. 2001. — Vol.93. — P. 1633-1642.

83. Hartmann L., Schaid D., Woods J., et al. EYcacy of bilateral prophylactic mastectomy in women with a family history of breast cancer. // N. Engl. J. Med. -1999.-Vol. 340.-P. 77-84.

84. Hall J.M., Lee M.K., Newman В., et al. Linkage of early-onset familial breast cancer to chromosome 17q21. // Science. 1990. — Vol.250. — P. 1684-1689.

85. Hedenfalk I, Duggan D, Chen Y, et al. Gene-expression profiles in hereditary breast cancer. // N. Engl. J. Med. 2001. — Vol. — 344. — P.539-548.

86. Hopper J.L., Carlin J.B. Familial aggregation of a disease consequent upon correlation between relatives in a risk factor measured on a continuous scale. // Am. J. Epidemiol. -1992. Vol.136. — P. 1138-1147.

87. Hopper J.L., Giles G.G., McCredie MRE, Boyle P. Background rationale and protocol for a case-control family study of breast cancer. // Breast. 1994. -Vol.16.-P. 23-34.

88. Huusko P., Paakkonen K., Launonen V., et al. Evidence of founder mutations in Finnish BRCA1 and BRCA2 families. // Am. J. Hum. Genet. 1998. -Vol. 62.-P. 1544-1548.

89. Hunter A., Wright P., Cappelli M., et al. Physician knowledge and attitudes towards molecular genetic (DNA) testing of their patients. // Clinical Genetics.1998.-Vol. 33.-P. 447-455.

90. Irminger-Finger I., Siegal B.D., Leung W-C. The functions of breast cancer susceptibility gene 1 (BRCA1) product and its associated proteins. // Biol. Chem.1999.-Vol. 380.-P. 117-128.

91. Johannson O.T., Ranstam J., Borg A. et al. Survival of BRCA1 breast and ovarian cancer patients. // J. Clin. Oncol. 1998. — Vol.16. — P.397-404.

92. Johannsson O., Ostermeyer EA, Hakansson S, et al. Founding BRCA1 mutations in hereditary breast and ovarian cancer in southern Sweden. // Am. J. Hum. Genet. 1996. — Vol. 58. — P. 441-450.

93. Joel Charrow. Ashkenazi Jewish genetic disorders. // Familial cancer. -2004. Vol.3. — P. 201-206.

94. Johannsson O., Loman N., Moller Т., Kristoffersson U, Borg A, Olsson H. Incidence of malignant tumors in relatives of BRCA1 and BRCA2 germline mutation carriers.// Eur. J. Cancer. 1999. — Vol. 35. -P. 1248-1257.

95. Jernstrom H., Lerman С., Ghadirian P. et al. Pregnancy and risk of early breast cancer in carriers of BRCA1 and BRCA2. // Lancet. 1999. — Vol. 354. — P. 1846-1850.

96. Johannsson O.T., Idvall I., Anderson C. et al.Tumour biological features of BRCA 1-induced breast and ovarian cancer. // Eur. J. Cancer. 1997. — Vol. 33. -P. 362-371.

97. Jordanova A., Kalaydjieva L., Savov A., et al. SSCP analysis: a blind • sensitivity trial. // Hum. Mutat. 1997. — Vol. 10. — P. 65-70.

98. Kainu Т., Juo S.H., Desper R., et al. Somatic deletions in hereditary breast cancers implicate 13q21 as a putative novel breast cancer susceptibility locus. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 200. Vol.97. -P.9603-9608.

99. King M.C., Wieand S., Hale K. et al. Tamoxifen and breast cancer incidence among women with inherited mutations in BRCA1 and BRCA2. // JAMA. 2001. — Vol. — 286. — P. 2251-2261.

100. King M., Rowell S., Love S. Inherited breast and ovarian cancer: what are the risks? What are the choices? // JAMA. 1993. — Vol. 269. — P. 1975-1980.

101. Kollias J., Sibbering D.M., Blarney R. et al. Screening women aged less than 50 years with a family history of breast cancer. // Eur. J. Cancer. 1998. — Vol. 34- 878-883.

102. Kudoh K., Ramanna M., Ravatn R., et al. Monitoring the expression profiles of doxorubicin induced and doxorubicin-resistant cancer cells by cDNA microarray. // Cancer Res. 2000. — Vol.60. — P. 4161-4166.

103. Keonig B, Greely H, McConnell L., et al. Genetic testing for BRCA1 and BRCA2: recommendations of the Stanford program in genomics, ethics, and society. // J.

104. Kodish E, Wiesner G, MehlmanM, et al. Genetic testing for cancer risk: how to reconcile the conflicts. // JAMA. 1998. — Vol. 279. — P. 179-81.

105. Lalloo F., Boggis C.R.M., Evans D.G.R ., et al. Screening by mammography of women with a family history of breast cancer. // Eur. J. Cancer1998. №34. — Vol. 937-940.

106. Langston A.A., Malone K.E., Thompson J., et al. BRCA1 mutations in a population-based sample of young women with breast cancer. // N. Engl. J. Med. -1996.-Vol.334.-P.137-142.

107. Lee W-Y., Jin Y-T., Chang T-W. et al. Immunolocalization ofBRCAl protein in normal breast tissue and sporadic invasive ductal carcinomas: a correlation with other biological parameters. // Histopathology. 1999. — Vol. 34. — > P. 106-112.

108. Lancaster J.M., Wooster R., Mangion J. et al. BRCA2 mutations in primary breast and ovarian cancers. // Nat. Genet. 1996. — Vol.13. — P. 238-240.

109. Lynch H.T., de la Chapelle A. Genetic susceptibility to non-polyposis colorectal cancer.// J. Med. Genet. 1999. — Vol. 36. — P. 801-818.

110. Lynch P.M. Clinical challenges in management of familial adenomatouspolyposis and hereditary nonpolyposis colorectal cancer. // Cancer.1999. Vol. 86. — P. 1713-1719.

111. Lynch H., Lemon S., Durham C., et al. A descriptive study of BRCA1 testing and reactions to disclosure of test results. // Cancer. 1997. — Vol. 79. — P. 2219-2228.

112. Lips С.J., Landsvater R.M., Hoppener J.W., et al. Clinical screening as comparedwith DNA analysis in families with multiple endocrine neoplasia type 2A. //N. EngL. J. Med. 1994. — Vol. 331. — P. 828-835.

113. Lerman C., Narod S., Schulman K., et al. BRCA1 testing in families with hereditary breast-ovarian cancer: a prospective study of patient decision making and outcomes. // JAMA. 1996. — Vol. 275. — P. 1885-1892.

114. Langston A., Malone K., Thompson J., et al. BRCA1 mutations in a population-based sample of young women with breast cancer. // N. Engl. J. Med. -1996.-Vol. 334.— P. 137—42.

115. Malone K.E., Daling J., Thompson J.D., et al. BRCA1 mutations and breast cancer in the general population: analyses in women before age 35 and in women before age 45 years with first degree family history. // JAMA. 1998. — Vol. 279. — P. 922-929.

116. Meijers-Heijboer H., Van Geel В., Van Putten WJL et al. Breast cancer after prophylactic bilateral mastectomy in women with a BRCA1 or BRCA2 mutation. // N. Engl. J. Med. 2001 . — Vol.345. — P. 159-164.

117. Madigan M.P., Ziegler R.G., Benichou J., et al. Proportion of breast cancer cases in the United States explained by well-established risk factors. // J. Natl. Cancer Inst. 1995.-Vol.87.-P. 1681-1685.

118. Mild Y., Swensen J., Shattuck-Eidens D., et al. A strong candidate for the breast and ovarian cancer susceptibility gene BRCA1. // Science. 1994. -Vol.266. -P.66-71.

119. Meijers-Heijboer H., van den Ouweland A., Klijn J., et al. Low-penetrance susceptibility to breast cancer due to CHEK2 llOOdelC in noncarriers of BRCA1 or BRCA2 mutations. //Nat. Genet. 2002. — Vol.31. — P. 55-59.

120. Meijers-Heijboer H, van Geel В., van Putten W.L.J., et al. Breast cancer after prophylactic bilateral mastectomy in women with a BRCA1 or BRCA2 mutation. //N. Engl. J. Med. 2001. — Vol.345. — P. 159-164.

121. Mazoyer S., Dunning A.M., Serova О et al. A polymorphic stop codon in BRCA2. //Nat. Genet. 1996. — Vol.14. — P. 253-254.

122. Mefford H.C., Baumbach L., Panguluri R.C., et al. Evidence for a BRCA1 founder mutation in families of West African ancestry. // Am. J. Hum. Genet. -1999.-Vol. 65.-P. 575-578.

123. Marteau Т., Croyle R. Psychological response to genetic testing. // BMJ. -1998.-Vol. 316.-P. 693-5.

124. Malone K., Daling J., Thompson J., et al. BRCA1 Mutations and breast cancer in the general population. // JAMA. 1998. — Vol. — 279. — P. 922-9.

125. Narod S.A., Brunet J.S., Ghadirian P., et al. Tamoxifen and risk of contralateral breast cancer in BRCA1 and BRCA2 mutation carriers: a case-control study. //Lancet. 2000. — Vol.356. — P. 1876-1881.

126. Narod S.A., Risch H., Moslehi R. et al. Oral contraceptives and the risk of hereditary ovarian cancer. // N. Engl. J. Med. 1998. — Vol. 339. — P. 424-428.

127. Newman В., Mu H., Butler L.M., et al. Frequency of breast cancer attributable to BRCA1 in a population-based series of American women. // JAMA. 1998. — Vol.279. — P. 915-921.

128. Newman В., Millikan R.C., King M.C. Genetic epidemiology of breast and ovarian cancers. // Epidemiol Rev. 1997. — Vol.19. — P. 69-79.

129. Neuhausen S.L., Mazoyer S., Friedman L. et al. Haplotype and phenotype analysis of six recurrent BRCA1 mutations in 61 families: results of an international study. // Am. J. Hum. Genet. 1996. — Vol. 58. — P. 271-280.

130. Neuhausen S., Gilewski Т., Norton L., et al: Recurrent BRCA2 6174delT mutations in Ashkenazi Jewish women affected by breast cancer. Nature Genet 1996, 13:126-128.

131. NIH Consensus Development Panel on Ovarian Cancer. Ovarian cancer: screening, treatment and follow-up. // JAMA. 1995. — Vol. 273. — P. 491-497.

132. Northouse L.L. Breast cancer in younger women: effects on interpersonal and family relations. // J. Natl. Cancer Inst. Monogr. 1994. — Vol. 16. — P. 183190.

133. Osborne R.H., Hopper J.L., Kirk A., et al. KConFab: a research resource of Australasian breast cancer families. // Kathleen Cuningham Foundation Consortium for Research into Familial Breast Cancer.// Med. J. Aust. — 2000 . -Vol.172.-P. 463-464.

134. Powles Т., Eeles R., Ashley S. et al. Interim analysis of the incidence of breast cancer in the Royal Marsden Hospital tamoxifen randomized chemoprevention trial. // Lancet. 1998. Vol. 352. — P. 98-101.

135. Pichert G., B. Bolliger K., Buser et al. Evidence-based management options for women at increased breast/ovarian cancer risk // Annals of Oncology. 2003. -№14.- Vol. 9-19.

136. Petrij-Bosch A., Peelen Т., van Vliet M., et al: BRCA1 genomic deletions are major founder mutations in Dutch breast cancer patients. // Nature Genet.1997.-Vol. 17.-P. 341-345.

137. Press M.F., Bernstein L., Thomas P.A., et al. HER2\neu rene amplification characterized by fluorescence in situ hybridization: poor prognosis in node-negative breast carcinomas. // J. Clin. Oncol. 1997. — Vol. 15. — P. 2894-2904.

138. Peto J., Collins N., Barfoot R. et al. Prevalence of BRCA1 and BRCA2 gene mutations in patients with early-onset breast cancer. // J. Nutl. Cancer Inst.1999.-Vol. 91.-P. 943-949.

139. Parmigiani G., Berry D., Aguilar O. Determining carrier probabilities for breast cancer susceptibility genes BRCA1 and BRCA2. // Am. J. Hum. Genet.1998.-Vol.62.-P.145-158.

140. Pharoah P., Day N., Duffy S., et al. Family history and the risk of breast cancer: a systematic review and meta-analysis. // Int. J. Cancer. 1997. — Vol.71. -P. 800-809.

141. Peto J., Collins N., Barfoot R., et al. Prevalence of BRCA1 and BRCA2 mutations in patients with early-onset breast cancer. // J. Natl. Cancer. Inst. — 1999. -Vol. 91.-P. 943-949.

142. Perou C.M., Jeffrey S.S., van de Rijn M., et al. Distinctive gene expression patterns in human mammary epithelial cells and breast cancers. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1999. Vol.96. — P. 9212-9217.

143. Peto J., Collins N., Barfoot R et al. Prevalence of BRCA1 and BRCA2 mutations in patients with early-onset .breast cancer. // J. Natl. Cancer. Inst. 1999. -Vol. 91.-P. 145-149.

144. Phillips K.A., Andrulis I.L., Goodwin P.J. Breast carcinomas arising in carriers of mutations in BRCA1 or BRCA2: Are they prognostically different? // J. Clin. Oncol. 1999. — Vol. 17. — P. 3653-3663.

145. Phillips K.A., Nichol K., Ozcelik H., et al. Frequency of p53 mutations in breast carcinomas from Ashkenazi Jewish carriers of BRCA1 mutations. // J. Natl. Cancer Inst. 1999. — Vol. 91. — P. 469^173.

146. Petersen G.M. Genetic testing and counseling in familial adenomatous polyposis. // Oncology. 1996. — Vol. 10. — P. 89-94.

147. Ponder B. Genetic testing for cancer risk. // Science. 1997. — Vol. 278. — P. 1050-1058.

148. Phillips K., Glendon G., Knight J. Putting the risk of breast cancer in perspective. //N. Engl. J. Med. 1999. — Vol. 340. — P. 141-144.

149. Piver M.S., Jishi M.F., Tsukada Y., et al. Primary peritoneal carcinoma after prophylactic oophorectomy in women with a family history of ovarian cancer. //Cancer. 1993. — Vol. 71.-P. 2751-2755.

150. Rebbeck T.R., Levin A.M., Eisen A., et al. Breast cancer risk after bilateral prophylactic oophorectomy in BRCAlmutation carriers. // J. Natl. Cancer Inst. -1999. Vol. 91. — P. 1475-1479.

151. Rebbeck T.R., Levin A.M., Eisen A. et al. Breast cancer risk after bilateral prophylactic oophorectomy in BRCA1 mutation carriers. // J. Natl. Cancer Inst. -1999.-Vol. 91. P. 1475-1479.

152. Rahman N., Teare M.D., Seal S., et al. Absence of evidence for a familial breast cancer susceptibility gene at chromosome 8pl2-p22. // Oncogene. 2000. -Vol.19.-P.4170-4173.

153. Rebbeck T.R, Kantoff P.W., Krithivas K. et al. Modification of BRCA1-associated breast cancer risk by the polymorphic androgen-receptor CAG repeat. // Am. J. Hum. Genet. 1999. — Vol. 64. — 1371-1377.

154. Rubin LR. Prophylactic mastectomy with immediate reconstruction for the high-risk woman. // Clin. Plast. Surg. 1984. Vol. 11. — P. 369-381.

155. Rebbeck T.R., Levin A.M., Eisen A., et al. Breast cancer risk after bilateral prophylactic oophorectomy in BRCA1 mutation carriers. // J. Natl. Cancer Inst. -1999.-Vol.91.-P. 1475-1479.

156. Rebbeck T.R, Lynch H.T., Neuhausen S.L., et al. Prophylactic oophorectomy in carriers of BRCA1 or BRCA2 mutations. // N. Engl. J. Med. -2002. Vol.346. — P. 1616-1622.

157. Roa BB, Boyd AA, Volcik K, Richards CS. Ashkenazi Jewish population frequencies for common mutations in BRCA1 and BRCA2. // Nature Genet. -1996.-Vol. 14.-P. 185-187.

158. Robson M., Gilewski Т., Haas B. et al. BRCA-associated breast cancer in young women. // J. Clin. Oncol. 1998. — Vol. 16. — P. 1642-1649.

159. Rice J.C., Massey-Brown K.S., Futscher B.W. Aberrant methylation of the BRCA1 CpG island promoter is associated with decreased BRCA1 mRNA in sporadic breast cancer cells. // Oncogene. 1998. — Vol. 17. — P. 1807-1812.

160. Salazar H., Godwin A.K., Daly M.B., et al. Microscopic benign and invasive malignant neoplasms and a cancer-prone phenotype in prophylactic oophorectomies. //J. Natl. Cancer Inst. 1996. — Vol. 88. — P. 1810-1819.

161. Streuwing J., Hartge P.,Wacholder S. et al. The risk of cancer associated with specific mutations of BRCA1 and BRCA2 among Ashkenazi Jews. // N. Engl. J.Med. 1997.-Vol. 336.-P. 1401-1408.

162. Schrag D., Kuntz K.M., Garber J.E. et al. Decision analysis—effects of prophylactic mastectomy and oophorectomy on life expectancy among women with BRCA1 or BRCA2 mutations. // N. Engl. J. Med. 1997.- Vol.336. -P.1465-1471.

163. Spring K., Ahangari F., Scott S.P., et al. Mice heterozygous for mutation in ATM, the gene involved in ataxia-telangiectasia, have heightened susceptibility to cancer. // Nat. Genet. 2002. — Vol.32. — P.l85-190.

164. Stratton J., Gayther S., Russell P., et al. Contribution of BRCA1 mutations to ovarian cancer. // N. Engl. J. Med. 1997. — Vol. 336. — P. 1125-1130.

165. Sekine M., Nagata H., Tsuji S., et al. Localization of a novel susceptibility gene for178. familial ovarian cancer to chromosome 3p22-p25. // Hum. Mol. Genet. — 2001.-Vol. 10. P.1421-1429.

166. Schrag D., Kuntz K.M., Garber J.E., Weeks J.C. Life expectancy gains from cancer prevention strategies for women with breast cancer and BRCAlor BRCA2 mutations. // JAMA. 2000. — Vol. 283. — P. 617-624.

167. Statement of the American Society of Clinical Oncology: genetic testingfor cancer susceptibility. //J. Clin. Oncol. 1996. — Vol. 14. — P. 1730-1736.

168. Schutte M., da Costa L.T., Hahn S.A., et al. Identification by representational difference analysis of a homozygous deletion in pancreatic carcinoma that lies within the BRCA2 region. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1995. Vol.92. — P.5950-5954.

169. Seitz S., Rohde K., Bender E. et al. Deletion mapping and linkage analysis provide strong indication for the involvement of the human chromosome region 8pl2-p22 in breast carcinogenesis. //Br. J. Cancer. 1997. — Vol.76. — P. 983-991.

170. Sachidanandam R., Weissman D., Schmidt S.C., et al. A map of human genome sequence variation containing 1.42 million single nucleotide polymorphisms. //Nature. 2001. — Vol. 409. P. 928-933.

171. Saito H., Inazawa J., Saito S. et al. Detailed deletion mapping of chromosome 17q in ovarian and breast cancers: 2-cM region on 17q21.3 often and commonly deleted in tumors. // Cancer Res. 1993. — Vol. 15. — P. 3382-3385.

172. Snijders A.M., Nowak N., Segraves R., et al. Assembly of microarrays for genome-wide measurement of DNA copy number. // Nat. Genet. 2001. — Vol.29. -P.263-264.

173. Susan L. Neuhausen. Founder populations and their uses for breast cancer genetics. // Breast Cancer Res. 2000. — Vol. 2. — P. 77-81.

174. Schmidt S., Becher H., Chang-Claude J.: Breast cancer risk assessment: use of complete pedigree information and the effect of misspecified ages at diagnosis of affected relatives. // Hum. Genet. 1998. — Vol.102. — P. 348-356.

175. Struewing J.P., Hartge P., Wacholder S., et al: The risk of cancer associated . with specific mutations of BRCA 1 and BRCA2 among Ashkenazi Jews. // N. Engl.

176. J. Med. 1997.-Vol. 336.-P.1401-1408.

177. Stoutjesdijk M.J., Boetes C., Jager G.J., et al. Magnetic resonance imaging and mammography in women with a hereditary risk of breast cancer. // J. Natl. Cancer Inst. 2001. — Vol.93. — P. 1095-1102.

178. Sigurdsson S., Thorlacius S., Tomasson J., et al. BRCA2 mutation in Icelandic prostate cancer patients. // J. Mol. Med. 1997. — Vol. 75. — P. 758-761.

179. Struewing J.P., Abeliovich D., Peretz Т., et al. The carrier frequency of the BRCA1 185delAG mutation is approximately 1 percent in Ashkenazi Jewish individuals. //Nature Genet. 1995. — Vol. 11. — P. 198-200.

180. Simard J., Tonin P., Durocher F., et al. Common origins of BRCA mutations in Canadian breast and ovarian cancer families. // Nature Genet. 1994. -Vol. 8.-P. 392-398.

181. Struewing J.P., Hartge P., Wacholder S., et al. The risk of cancer associatedwith specific mutations of BRCA1 and BRCA2 among Ashkenazi Jews. // N. Engl. J.Med. 1997. — Vol. 336. — P. 1401-1408.

182. Taylor M. R. G. Genetic testing for inherited breast and ovarian cancer syndromes: important concepts for the primary care physician. // Postgrad. Med. J. -2001.-Vol. 77.-P. 11-15

183. The Breast Cancer Linkage Consortium. Cancer risks in BRCA2 mutation carriers. // J. Natl. Cancer Inst. 1999. — Vol. 91. — P. 1310-1316.

184. Tesoriero A., Andersen C., Southey M., et al. De novo BRCA1 mutation in a patient with breast cancer and an inherited BRCA2mutation. // Am. J. Hum. Genet. -1999. Vol. 65. — P. 567-569.

185. Tilanus-Linthorst M.M., Bartels C.C., Obdeijn A.I. et al. Earlier detection of breast cancer by surveillance of women at familial risk. // Eur. J. Cancer. -2000. -№36.-Vol. 514-519.

186. Thompson D., Easton D.F. Cancer incidence in BRCA1 mutation carriers. // J. Natl. Cancer Inst. 2002. — Vol.94. — P. 1358-1365.

187. Thorlacius S., Streuwing J.P., Hartge P. et al. Population-based study of risk of breast cancer in carriers of BRCA2 mutation. // Lancet. 1998. — Vol. 352. — P. — 1337-1339

188. The Breast Cancer Linkage Consortium. Cancer risks in BRCA2 mutation carriers.//J. Natl. Cancer.Inst. 1999. — Vol. 91.-P. 1310-1316.

189. Thompson D., Easton D., Breast Cancer Linkage Consortium.Variation in cancer risks by mutation position in BRCA2 mutation carriers. // Am. J. Hum. Genet. 2001. — Vol. 68. — P. 410-419.

190. Turchetti D., Cortesi L., Federico M. et al. BRCA1 mutations and clinicopathological features in a sample of Italian women with early-onset breast cancer. // Eur. J. Cancer. 2000. — Vol. 36. — P. 2083-2089.

191. Tonin P.M., Mes-Masson A.M., Narod S.A., et al. Founder BRCA1 and BRCA2 mutations in French Canadian ovarian cancer cases unselected for family history. // Clin. Genet. 1999. — Vol. 55. — P. 318-324.

192. Thorlacius S., Sigurdsson S., Bjarnadottir H., et al: Study of a single BRCA2 mutation with high carrier frequency in a small population. // Am. J. Hum. Genet. 1997. — Vol. 60. — P. 1079-1084.

193. Thorlacius S., Olafsdottir G., Tryggvadottir L., et al. A single BRCA2 mutation in male and female breast cancer families from Iceland with varied cancer phenotypes. // Nature Genet. 1996. — Vol. 13. — P. 117-119.

194. Thorlacius S., Struewing J.P., Hartge P., et al. Population-based study of risk of breast cancer in carriers of BRCA2 mutation. // Lancet. 1998. — Vol. 352. -P. 1337-1339.

195. Tonin P, Serova O, Lenoir G, et al. BRCA1 mutations in Ashkenazi Jewish women. // Am. J. Hum. Genet. 1995. — Vol. 57. — p. 189.

196. Thomas S. Frank, MD. Hereditary Cancer Syndromes. // Arch. Pathol. Lab. Med.-2001.-Vol.125.-P. 89.

197. Van’t Veer L.J., Dai H., van de Vijver MJ, et al. Gene expression profiling predicts clinical outcome of breast cancer. // Nature. 2002. — Vol.415. — P. 530536.

198. Van de Vijver MJ, He YD, van ‘t Veer LJ, et al. A gene-expression signature as a predictor of survival in breast cancer. // N. Engl. J. Med. 2002. -Vol.347.-P. 1999-2009.

199. Vehmanen P., Friedman L.S., Eerola H., et al: A low proportion of BRCA2 mutations in Finnish breast cancer families. // Am. J. Hum. Genet. 1997. — Vol. 60.-P. 1050-1058.

200. Verhoog L.C., Brekelmans C.T.M., Seynaeve C., et al. Survival and tumour characteristics of breast-cancer patients with germline mutations of BRCA1. // Lancet.-1998. Vol. 351. — P. 316-321.

201. Verhoog L.C., Brekelmans C.T.M., Seynaeve C., et al. Survival in hereditary breast cancer associated with germline mutations of BRCA2. // J. Clin. Oncol. 1999. — Vol. 17. — P. 3396-3402.

202. Veronesi U., Maisonneuve P., Costa A. et al. Prevention of breast cancer with tamoxifen: preliminary findings from the Italian randomized trial. // Lancet.1998. Vol.352.-P. 93-97.

203. Voegelstein В., Kinszler K. The genetic basis of human cancer. // New York: McGraw-Hill 1998. — P. 229-236.

204. Warner E., Plewes D.B., Shumak R.S., et al. Comparison of breast magnetic resonance imaging, mammography, and ultrasound for surveillance of women at high risk for hereditary breast cancer. // J. Clin. Oncol. 2001. — Vol.19. — P. 35243531.

205. Wendy S. Robinstein. II Familial cancer. 2004. — Vol.3. — P. 249-257.

206. Phillips K. A. Current perspectives on BRCA1- and BRCA2-associated breast cancers. // Int. J. Med. 2001. — Vol.31. — P. 349-356.

207. Wooster R., Bignell G., Lancaster J. et al. Identification of the breast cancer susceptibility gene BRCA2. //Nature. 1995. — Vol.378. — P.789-792.

208. Wong A.K.C., Pero R., Ormonde P.A., et al. RAD51 interacts with theevolutionary conserved BRC motifs in the human breast cancer susceptibility genef

209. BRCA2. // J. Biol. Chem. 1997. — Vol.31. — P. 941-944.

210. Wilson C.A., Ramos L., Villasenor M.R. et al. Localization of human BRCA1 and its loss in high grade non-inherited breast carcinomas. // Nat. Genet.1999. Vol. 21. — P. 236-240.

211. Wooster R., Bignell G., Lancaster J., et al: Identification of the breast cancer susceptibility gene BRCA2. // Nature. 1995. — Vol. 378. — P.789-792.

212. Weinberg R.A. How cancer arises. // Sci. Am.- 1996. Vol.275. — P. 6270.

213. Weber B. Genetic testing for breast cancer. // Sci. Am. Sci. Med. 1996. -Vol. 6.-P. 12-21.

214. Wooster R., Bignell G., Lancaster J., et al. Identification of the breast cancer susceptibility gene BRCA2. // Nature. 1995. -Vol.378. — P.789-792. Erratum, Nature. — 1996. — p.379-749.

источник