Меню Рубрики

Иммуногистохимические маркеры при раке молочной железы

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы: показания, подготовка к анализу, расшифровка ИХГ

Давайте для начала мы разберем, что же такое иммуногистохимическое исследование. Под ним подразумевается микроскопическое исследование ткани, которое основано на выявлении антител на патологические вещества.

Разделяют два метода исследования:

  • прямой (прямая реакция антител непосредственно на патологическое вещество);
  • непрямой метод (патологические вещества, распознаются с помощью вторичных антител).
  • ферменты — белковые молекулы, они же молекулы РНК. Так например: щелочная фосфатаза (фермент гидролаза);
  • флуоресцентные — тот же физический процесс, например — флуоресцеин — органическое соединение;
  • электроно-плотные частицы, к таким относится золото.
  • изучения и исследования секреторных процессов, в том числе синтетических;
  • распознавания гормонов рецепторов;
  • выявления различных типов, родов клеток по их свойствам.

В области исследования грудной железы данное исследование используется в качестве предварительной диагностики для установления точного диагноза, в том числе при злокачественных образованиях. Данное исследование дает возможность определить следующее:

  • Точное образование (доброкачественное или злокачественное) и назначение правильного лечения.
  • Точное месторасположение (наличие метастаз в организме и их дислокацию).
  • Первоначальный очаг заболевания.
  • Стадию заболевания (например, степень рака).
  • Пролиферацию клеток (распознать скорость размножения и развития раковых клеток).
  • Ответ раковых клеток на медикаменты, их чувствительность, также можно отследить чувствительность к химиотерапии, к лучевой терапии.

Исследование способно детально изучить заболевание, что дает возможность полностью диагностировать заболевание и подобрать правильное лечение. Это играет не маловажную роль в диагностике, лечении, продолжительности жизни онкологических больных. Также можно сказать, что с помощью данного метода можно:

Иммуногистохимия при раке молочной железы

на более раннем сроке диагностировать заболевание;

  • выяснить непосредственный очаг заболевания;
  • найти границы заболевания;
  • определить точное место образования;
  • определить точный вид новообразования;
  • определить точную стадию развития;
  • определить рост патологических клеток;
  • узнать реакцию на препараты (в частности, на гормоны, на лучевую терапию и так далее);
  • определить необходимость операции;
  • помогает точно оценить качество лечения.
  • В основном данная диагностика используется для изучения (исследования) любой ткани человеческого организма. Основа для проведения данного исследования — это любое новообразование, которое предполагает развитие рака. Также исследование проводится для изучения эндометрия:

    • при метастазах;
    • при бесплодии;
    • после неудачных попыток ЭКО;
    • при различных заболеваниях матки;
    • при различных видах патологий органов малого таза;
    • при постоянных невынашивания плода;
    • при заболевания эндометрия.

    Исследование не имеет абсолютных противопоказаний. Препятствием для ИГХ может быть, только невозможность по каким либо причинам забора материла на исследование.

    Данный вид исследования может проводится только в специализированных лабораториях, при этом врач должен иметь специальную квалификацию, пройти специальное обучение.

    Забор проходит непосредственно пораженного участка кожи с помощью биопсии. Также забор материала может происходить во время хирургического вмешательства на молочной железе.

    Потом полученный материал специально обрабатывается и консервируется. Для этого она заливается парафином. В таком виде, в парафине, материал может правильно храниться в течении многого времени.

    Следующим этапом является микротомирование. Материал нарезают на тонкие пласты при помощи специального аппарата.

    В дальнейшим нарезанные пласты окрашиваются с определенными антителами и все это изучается под микроскопом. В некоторых лабораториях изучается окрашенный материал на автоматическом приборе.

    • две-три неуспешных процедур ЭКО;
    • не первое (постоянное) невынашивание плода на ранних сроках;
    • бесплодие.

    Во время исследования могут выявить такие заболевания как:

    • эндометрит,
    • гиперплазия,
    • неполную трансформацию эндометрия,
    • нарушение фаз развития
    • и другие заболевания.

    Как показывает практика, именно заболевания, связанные с эндометрием на 73% являются причиной бесплодия.

    Данное исследование проводится в определенный день менструального цикла, обычно на 5-7 день смотрят воспалительные процесса эндометрия, на 20-24 день цикла — оценивают секрецию, смотрят рецепторную функцию.

    Для этого пациентке рекомендуют:

    • не принимать гормоны за неделю до анализа;
    • не принимать кровоостанавливающих препаратов;
    • правильная интимная гигиена.

    Процедура происходит на гинекологическом кресле. Женщину обезболивают специальными препаратами и вводят зеркало. Делается санация половых органов. Вводится специальный прибор — система гистероскопа и проводится забор. Далее убирают прибор, проводя санацию органов.

    Потом женщина находится под наблюдением врача до полного восстановление, примерно 1-2 часа.

    Результаты примерно готовятся 3-5 дней. Оценить результаты может только специалист.

    HER2neu или, по-другому говоря, человеческий рецептор эпидермального фактора роста. Несет ответственность за продукцию белка. При поражении раковых клеток усиливается беспорядочный рост.

    Если результат пишется 1 (+), то это говорит о том, что избытка белка нет, следствие — нехорошее состоянии опухоли.

    При 2 (++) обычно назначают повторное исследование.

    При 3 (+++) рассматривают как положительную опухоль, которую обычно подвергают медикаментозному лечению.

    ER uPR данный вид гормонов способствует стимуляции роста патологических тканий. Если данные показатели увеличены, то это говорит о правильном лечении, что опухоль реагирует на гормонотерапию. Следовательно, если данные показатели понижены, то можно говорить о неправильном подборе лекарств. Опухоль развивается дальше.

    Ki — 67, по данному показателю оценивают стадию опухоли и её характеристики. Если результат дает повешенные цифры, то это говорит о быстром течении заболевания, наличии метастаз и, к сожалению, совсем не хороший прогноз. Данный результат отмечается в процентах. Так например:

    • 11% — вполне хороший прогноз (выздоровление 93%);
    • 21 % — говорят о нем как 50% на 50%, все зависит от организма человека;
    • все показатели за 30% — оценивают как тяжелая стадия — высокоагрессивная;
    • 90% — неизлечимо, приводит к смерти.

    Так же данный индекс способствует к определению выбора лечения.

    Ген p53 — способствует предотвращению роста патологической ткани. Данный ген является барьером для заболевания. Для начала заболевания служит мутация гена, например, наследственность или нарушение белковой матрицы.

    VEGF — обозначается белок, которой несет функцию контроля жизнедеятельности ткани при условии недостаточного кровообращения. Высокие показатели данного белка говорит о росте опухолевой ткани, в следствии «хорошего» питания ткани.

    В основном выделяют 4 типа рака:

    • Люминальный А — при этом: к женским гормонам рецепторы положительны, к HER2- отрицательные, показатель ki- 65-13% меньше.
    • Люминальный В — при этом: к женским гормонам рецепторы положительны, к HER2- отрицательные, показатель ki- 65-15% меньше.
    • Erb — B2 — при этом: реакция рецепторов к прогестерону (эстрогену) отрицательная, к HER2- положительная.
    • Базальноподобный — отрицательный показатель по всем категориям.

    Принято считать, что отвечают за саму опухоль — PD-1, PDL-1 и PDL-2. Но они могут присутствовать не во всех патологических тканях. Для точного определения и назначения правильной терапии всем пациенткам, которым непосредственно показана иммунотерапия проводится такое исследование, как экспрессия белков PD-1, PDL-1 и PDL-2.

    Данное исследование проводят с помощью флуоресцентной гибридизации FISH. В результате наличия экспрессии иммунотерапия назначается такими препаратами, как: Ниволумаб, Атезолизумаб, Пембролизумаб.

    Иммуногистохимическое исследование очень сложный анализ, в котором используются множественное количество онкомаркеров.

    Стоимость исследования зависит от количества проверяемых факторов. Цена исследования начинается от 4 тысяч рублей и до 20 тысяч рублей.

    источник

    Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы – это анализ, который позволяет определить чувствительность новообразования злокачественного характера к некоторым веществам. С его помощью диагностируют стадию патологии и узнают, правильно ли было назначено лечение.

    Если говорить о том, что такое ИГХ онкологии, то это исследование, позволяющее выявить взаимодействие между белками и антигенами. Дело том, что клетки, пораженные онкологией, синтезируют белок. Он имеет связь с антителами. Учитывая это, специалисты с помощью анализа определяют форму и структуру опухоли.

    ИГХ при раке молочной железы проводят с целью:

    • определения вида заболевания для назначения терапии;
    • раскрытия наличие метастаз, идущих от опухоли, и их границы;
    • обнаружения источника метастаз;
    • диагностирования стадии патологии при ее выявлении;
    • оценки эффективности терапии;
    • установления скорости развития метастаз при наличии таковых;
    • выявления чувствительности клеток крови к тем или иным препаратам и методам лечения, чтобы оставить эффективные средства и исключить те медикаменты и способы терапии, которые не влияют на опухоль.

    Иммуногистохимия рака молочной железы проводится путем забора ткани, пораженной онкологией. Биоматериал добывается с помощью биопсии или в процессе оперативного вмешательства. После этого выполняется анализ по следующим этапам:

    • биоматериал помещается в формалин, после чего переправляется в лабораторию для проведения дальнейших манипуляций;
    • специалисты обезжиривают ткань;
    • в материал добавляется специальный жидкий парафин, который помогает выявить структуру клеток опухоли;
    • выполняется микротравмирование – процедура срезания тонкого слоя парафина, толщиной в 1 мм;
    • взятые образцы размещаются на специальных стеклах;
    • выполняется окрашивание материала с помощью реактивов;
    • образцы оставляют на 12 дней, после чего оценивают результат.

    Для проведения анализа используют несколько видов маркеров. Если в ходе исследования в биоматериале обнаружена повышенная концентрация эстрогенов и прогестеронов, делают заключение о развитии опухоли. Это также говорит о появлении метастазов от новообразования. Если анализ показал средние результаты, то говорят о слабом росте опухоли. Это говорит о том, что больной после соответствующей терапии имеет все шансы на выздоровление.

    Чисто рецепторов HER2 влияют на цветовую гамму реакторов с клетками, которые поражены раком. Чем их больше, тем ярче тон. В этом случае гистология проявляется себя, как неточная наука, поскольку восприятие оттенков образцов субъективное и зависит только от ощущений специалиста, выполняющего анализ.

    При расшифровке результатов учитывают рецепторы к прогестерону – PR и эстрогену – ER. ИГХ в онкологии также показывает содержание рецептора человека эпидермального фактора роста (HER2-белка) в биоматериале, который взят как образец для проведения исследования. У женщин с карциномой молочной железы наблюдается повышенный HER2.

    Расшифровка результатов по эстрогену и прогестерону – если в опухоли обнаружены рецепторы к мужским и женским гормонам, то рост образования происходит под их воздействием, если PR и ER в организме присутствуют в норме или их концентрация увеличена. При своевременном квалифицированном лечении пациент может рассчитывать на благоприятном исходе.

    Расшифровка результатов ИГХ выполняется в зависимости от оттенка образцов по специальной шкале:

    • 0-1+. Такой результат говорит о том, что концентрация белка не превышена. Терапия патологии не требуется.
    • 2+. Значение указывается на среднюю концентрацию белка. Это говорит о наличии отрицательной опухоли (карциномы) груди. В этом случае рекомендуется выполнить еще один анализ, поскольку первое исследование не всегда дает точный результат. Для уточнения диагностики выполняют тест FISH. Такое исследование определяет концентрацию белка в каждой клетке. При нормальном содержании HER2 анализ покажет положительный результат, а при повышенном – отрицательный.
    • 3+. Белок превышает нормальное значение. Диагностируется положительная опухоль груди.

    Если анализ показал положительную опухоль, значит, патология имеет агрессивный характер развития. Она растет в несколько раз быстрее, чем при отрицательном значении.

    После изучения исследования, расшифровывается результат, исходя из показателя маркера Ki67. Если его значение находится в пределах нормы, то есть 15-17%. При повышении его уровня до 35% опухоль начинает быстро расти. Замедлить процесс помогает химиотерапия. Если анализ показал 85%, врачи отказываются от лечения пациента, поскольку снизить маркер в таком случае невозможно и смертельного исхода не избежать.

    • люминальный А – рецепторы к ER положительные, к белку отрицательные, Ki67 менее 14%;
    • люминальный Б – рецепторы к ER, к HER2 – отрицательные, Ki67 более 15%;
    • Erb В2 сверхэкспрессирующий — PR и ER – отрицательный, белок – положительный;
    • Базальноподобный – отрицательное значение к прогестерону и остальным факторам.

    Такие факторы демонстрируют возможное поведение опухоли на момент анализа. Лечение не оказывает влияние на исследование. Врач благодаря ИГХ видит, как ведет себя опухоль. Прогнозом специалист пользуется для определения подходящей терапии для каждого пациента.

    Исследования ИГХ рака молочной железы позволяют определить эффективность лечения. Если анализ показал положительный рак, то назначают химиотерапию. При отрицательном значении – прием медикаментозных препаратов.

    ИГХ – это исследование, которое позволяет определить вид рака молочной железы и назначить адекватное лечение, что позволяет спасти пациентке жизнь, а в некоторых случаях – избавиться от патологии.

    источник

    иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы нередко применяется в онкологии. Именно антитела, как специальные белки, быстро вступают в реакцию с антигенами, обладающими свойством флюооресценции при взаимодействии, т. е. издающими свечение, хорошо различимое под микроскопом при введении в патологическую ткань. Метод проводится в лабораторных условиях, по его результатам врачи делают вывод о том, присутствуют данные молекулы в тканях или нет. Исследованию подлежит кусочек опухолевидной ткани, взятой при проведении биопсии.

    Читайте также:  Как часто встречается рак молочной железы у женщин

    Иммуногистохимическое исследование с использованием реактивов и добавлением антител нередко применяется в онкологии при подозрении на развитие раковой злокачественной опухоли у пациентов

    Гормональный фон у женщин переживает сильный сбой несколько раз в жизни. Уровень гормонов неустойчив в подростковом возрасте у девочек (начиная с 11 лет), в период беременности и с приходом климакса. Именно поэтому рак молочных желез – довольно распространенное заболевание, и опухоль может начать развитие практически в любом возрасте в случае переизбытка гормонов (прогестерон, эстроген), способных спровоцировать рост злокачественного новообразования и метастазирование.

    ИГХ назначается при подозрении на рак молочных желез, патологические и злокачественные процессы в полости матки. Исследование помогает выявить в клетках ткани:

    • рецепторы прогестерона, эстрогена;
    • показатель Ki 67 как индекс, указывающий на степень активного роста опухолевых клеток;
    • первичные или одиночные очаги новообразования;
    • стадию и течение развития опухоли для дачи прогноза;
    • наличие микроорганизмов;
    • степень чувствительности рецепторов к гормонам;
    • наличие метастазов;
    • пролиферацию или скорость роста опухоли.

    Иммуногистохимическое исследование незаменимо с целью назначения эффективного лечения, выявления степени чувствительности новообразования к тем или иным вводимым препаратам. Это современный информативный метод диагностики, в отличие от привычной гистологии, хотя иногда оба исследования совмещают для получения более точной картины опухолевидного тела.

    Как правило, исследование назначается при подозрении на онкологию, патологические процессы в ткани в любом из органов пациента. ИГХ показан к проведению при подозрении на следующие патологии:

    • рак молочных желез или первичную опухоль груди у женщин;
    • бесплодие;
    • болезни матки со злокачественным течением;
    • развитие гиперплазии, эндометрита, иного недуга в репродуктивной системе.
    • гормональный фон, именно уровень прогестерона и эстрогена, от которого напрямую зависит скорость роста опухолевидного тела и стадия развития болезни;
    • ткань эндометрия при частых выкидышах, неудачных попытках ЭКО, подозрении на бесплодие.

    Именно иммуногистохимическое исследование может выявить наличие клеток, препятствующих зачатию у женщин, реакцию рецепторов в маточной ткани при назначении гормонально-заместительной терапии. Это важно выявить для разработки лечебной тактики и необходимости определить, следует вводить или нет гормоны, поскольку при выработке их в норме новообразование не столь прогрессивно, растет медленно и быстро подлежит устранению. Возможные рецидивы сведены к нулю.

    Иммуногистохимическое исследование незаменимо с целью назначения эффективного лечения

    Показатель Ki 67 указывает на быстроту роста опухоли. Если его значение превышает отметку в 35%, значит, новообразование растет быстро и уже не обойтись без назначения курса химиотерапии во избежание появления метастазов. Анализ с показателем менее 10% дает прогнозы вполне оптимистичные, выживаемость пациенток – 95%, а вот при показателе более 85% летальность уже неизбежна.

    Иммуногистохимическое исследование назначается почти всем женщинам, независимо от возраста, при подозрении на рак груди, т. к. метод практически не имеет противопоказаний. Трудности представляет лишь болезненный забор образца патологичной ткани, и многие пациентки тяжело переносят проведение биопсии. Хотя стоит потерпеть, ведь чем быстрее будет начато лечение, тем больше шансов на полное выздоровление.

    В зависимости от вида опухоль может быстро прогрессировать. Если не выявить ее на начальном этапе формирования, то с появившимися метастазами бороться будет гораздо труднее.

    Материал берется из опухолевидной ткани путем прокола или с помощью раны, оставшейся после проведенной операции. Исследование – поэтапное:

    1. Забор (иссечение) образца ткани преимущественно из груди у женщин с постановкой отметины черным маркером в предполагаемом месте локализации образования.
    2. Отправка ткани в лабораторию с помещением в емкость с формалином. Возможно окрашивание сывороткой с содержанием антител, ферментов, металлопротеина, флуоресцентного красителя с добавлением в разных дозах. Данные вещества послужат метками, чтобы было лучше визуально наблюдать за происходящей реакцией при соединении антител с антигеном. Если, например, реакции не произойдет при использовании в качестве метки металла или радиоизотопа, значит, и опухоли как таковой в организме нет.
    3. Обезжиривание состава, заливка парафином, чтобы получить блоки для последующего изучения материала на гистологию.
    4. Помещение на стекла срезов в 1 мм толщиной, сделанных из блоков.
    5. Окрашивание состава антителами.
    6. Изучение (интерпретация) анализов.

    Обычно заключение врачи дают по истечении 7 дней. Будет выявлено сходство (родство) ткани к тем или иным антителам, описана морфология образца, количество присутствующих здоровых и замещенных патологичных клеток.

    Выявить опухоль в молочной железе можно с помощью широко используемых иммуногистологических маркеров:

    1. HER2, реагирующий на рецепторы в виде антенн, лежащих на поверхности клеток, способных уловить сигналы, подаваемые организмом. Клетки вполне нормально делятся, если количество рецепторов не отклонено от нормы. Но иногда ген при остром течении опухоли дает сбой и начинает выработку множества рецепторов одновременно. При этом клетки усиленно делятся, получая подобный опасный сигнал. Это говорит о начальной стадии развития рака и стремительном течении, хотя прогнозы хорошие. Опухоль неплохо поддается специфическим лекарствам.
    2. HER2 neu, способный выявить кодирующий рецептор или протоонкоген, при повышенном содержании которого рак прогрессирует и, скорее всего, в регионарных лимфоузлах присутствуют метастазы. Для назначения адекватного лечения крайне важно установить характер (отрицательный, положительный) HER2. При значении “+” будут назначены лекарства Герцептин, Лапатиниб. При отрицательном показателе данные препараты противопоказаны.
    3. Ki 67, как маркер пролиферации, способный выявить степень и скорость деления патологичных клеток. Опухоль не агрессивна при показателе маркера меньше 15%. Лечение сводится к проведению гормонотерапии. Реакция рецептора к прогестерону и эстрогену вполне позитивная, равно как и прогнозы после лечебного курса. Опухоль быстро растет, если показатель превышает 30%. Требуется проведение химиотерапии.

    При раке молочной железы реакция и степень окрашивания забранной ткани будут напрямую зависеть от подтипа:

    • люминального А, при котором HER2 будет отрицательный, а – Ki 67 не более 13%;
    • люминального В, при котором HER2 – отрицательный, а Ki 67 – свыше 15%;
    • Erb-B2 как сильно прогрессирующего, при котором HER2 – положительный, но рецепторы к прогестерону и эстрогену отсутствуют;
    • базальновидного, при котором наблюдаются отрицательные значения на любой фактор.

    Только патологоанатом или онколог со специальной подготовкой к проведению данного обследования сможет дать правильное заключение после использования метода и расшифровки результатов. Последняя проводится с учетом показателей вводимых антител, их тропности к исследуемому материалу. Выявляются те или иные антигены, указывающие на количество атипичных клеток, структуру и морфологию патологичной ткани, вид развивающейся опухоли.

    Показатели в результатах напрямую зависят от развития того или иного заболевания. Более всего иммуногистохимическое обследование как анализ информативно при онкологии груди.

    В учет берутся следующие показатели, которые показывает расшифровка:

    1. Протеины, оцениваемые по шкале от 0 до +3. При отметке 0 реакции не произойдет. При отметке +1 исследование на подтверждение онкологического статуса HER2 придется пациентам пройти вновь. При отметке +2 нет четкости в характере HER2 и возможно назначение дополнительного метода FISH. При отметке +3 HER2 – положительный результат, при котором активно вырабатывается специальный рецептор. Течение рака – быстрое и агрессивное. Вероятно назначение лекарств – Герцептина, Тайверба.
    2. Маркер Ki 67 укажет на злокачественность новообразования, хотя при отметке менее 15% прогноз хороший. Излечиться можно полностью.

    При расшифровке исследуется экспрессия ПР и ЭР, как рецепторов к эстрогену и прогестерону. У большинства опухолей статус ЭР(+) и всего в 5% случаев статус ЭР(-) ПР+. Опухоли с высокой концентрацией гормонов ПР и ЭР обычно неагрессивны и малоактивны, успешно лечатся гормональными препаратами. При их экспрессии к эстрогенам прогноз благоприятен в половине случаев.

    При экспрессии же рецепторов опухоли как к эстрогену, так и прогестерону на благоприятный исход лечения можно рассчитывать в 80% случаев. Благодаря результатам экспрессии врачам удается понять, какое лечение станет более эффективным – гормональное или же агрессивное, химическое.

    Самой сложной формой при раке молочной железы является карцинома, когда процентное содержание белка в ткани чрезмерно повышенное, а клетки становятся неуправляемыми, начинают бесконтрольное деление. При появлении неприятных симптомов в груди женщинам не рекомендуется откладывать визит к врачу и прохождение анализа. Своевременное выявление и устранение онкогенных клеток дает благоприятные прогнозы.

    Иммуногистохимия позволяет выявить множество разных патологий, в частности развитие опухоли, очаг и место ее локализации. Благодаря данному методу врачами устанавливается стадия рака, скорость развития новообразования. Это важно на начальных 1-2 этапах рака при появлении одиночной опухоли, причем при расположении ее в любом органе, а не только в молочных железах.

    источник

    Стандартизованное иммуногистохимическое исследование: рецепторный статус при раке молочной железы (PR, ER, ki67, Her2 neu). Выполняется только при наличии готового микропрепарата на предметном стекле и образца ткани в парафиновом блоке.

    ИГХ-исследование (РЭ, РП, Her2/neu, Ki-67), иммуногистохимический анализ рецепторного статуса рака молочной железы.

    IHC (ImmunoHistoChemistry) Test for Breast Cancer Receptor Status (ER, PR, HER2, Ki67), HER2 Overexpression by IHC, Estrogen Receptors, Progesterone Receptors, ER and PR Status, Estrogen and Progesterone Receptor Status.

    Какой биоматериал можно использовать для исследования?

    Парафиновый блок с биоптатом образования молочной железы. Ткань первичной опухоли может быть получена с помощью толстоигольной биопсии, а также инцизионных и эксцизионных хирургических вмешательств. Для выявления метастазов на биопсию могут быть взяты ткани из стенки грудной клетки, регионарных лимфоузлов или отдаленных органов.

    Общая информация об исследовании

    Современные принципы и стратегии лечения рака молочной железы основываются, в том числе, на результатах оценки рецепторного статуса и пролиферативного потенциала опухолевых клеток. Клетки опухоли обладают способностью вырабатывать и располагать на своей поверхности специальные белки – рецепторы, стимуляция которых приводит к запуску клеточного деления и росту опухоли. Подобные рецепторы способны связываться с веществами, присутствующими в организме в норме и исходно никак не связанными с развитием злокачественного новообразования. Согласно актуальным клиническим рекомендациям, для рака молочной железы имеет значение наличие на опухолевых клетках следующих рецепторов, различные комбинации которых называются рецепторным статусом:

    Рецепторы к гормонам – эстрогенам и прогестерону (ER, PR). Значительная часть опухолей молочной железы является гормонально-зависимыми, то есть их рост поддерживается и стимулируется эстрогенами и прогестероном. Опухоли с положительным гормональным рецепторным статусом хорошо отвечают на терапию аналогами гормонов (тамоксифен), которые блокируют соответствующие рецепторы – связываются с ними, но не вызывают активации внутриклеточных процессов и не дают рецептору впоследствии связаться с гормоном. Таким образом, исследование продукции опухолью ER и PR позволяет определить ее чувствительность к этим препаратам.

    Рецептор второго типа к человеческому эпидермальному фактору роста (human epidermal growth factor receptor 2 – HER2/neu). В клетках некоторых опухолей молочной железы имеет место повышенная выработка данного рецепторного белка, который, соединяясь с естественным фактором роста, запускает в опухолевой клетке процесс деления. Общее число пациенток с HER2-положительным раком молочной железы составляет от 15% до 20%. Определение HER2/neu имеет не только прогностическое значение (такие опухоли обычно прогрессируют быстрее и имеют более агрессивное клиническое развитие), но и позволяет оценить возможность применения таргетных лекарственных препаратов – моноклональных антител к рецептору HER2 – трастузумаб (герцептин), лапатиниб, пертузумаб. Кроме того, HER2-позитивные опухоли резистентны к тамоксифену.

    Пролиферативная активность – показатель способности опухолевых клеток к неограниченному делению, которое является основным фактором биологической агрессивности опухоли. Процесс деления сопровождается появлением в клетке определенных белков, один из которых – Ki-67. Он не продуцируется в клетках в состоянии покоя, что позволяет использовать его как маркер пролиферативной активности опухоли. Определение уровня Ki-67 имеет важное прогностическое значение, так как наибольшей пролиферативной активностью обладают опухоли из наименее зрелых и дифференцированных клеток.

    Все указанные выше маркеры могут быть выявлены при иммуногистохимическом исследовании биоптата или операционного материала опухоли. Для анализа из готового парафинового блока с помощью специального микроножа нарезают тончайшие срезы, которые затем прикрепляют к предметным стеклам и красят рутинными красителями, чтобы было возможно отличить клетки друг от друга и от межклеточного вещества. Затем срезы на стеклах окрашиваются растворами антител, меченных флюоресцирующими метками, специфичных к одному из исследуемых рецепторов. Если в опухолевой клетке присутствует искомый рецептор, антитела связываются с ним и при просмотре стекла под специальным микроскопом можно увидеть флюоресценцию, что будет свидетельствовать о положительном результате теста. Кроме того, при просмотре среза врач-морфолог сможет увидеть, что окрашенный маркер располагается в ядре, клеточном веществе или на оболочке опухолевых клеток. Количество применяемых растворов с антителами соответствует количеству маркеров, которые исследуются в образце. Степень флюоресценции и процент клеток, в которых она есть, лежат в основе интерпретации результатов иммуногистохимического анализа и подробнее описаны в соответствующем разделе.

    Читайте также:  Как жить после удаления рака груди

    Для чего используется исследование?

    • Для определения гормонорецепторного статуса и степени пролиферативной активности рака молочной железы для оценки прогноза и индивидуализации лечения, в том числе определения показаний для назначения таргетной терапии.
    • По результатам детекции гормональных рецепторов определяется целесообразность использования антиэстрогенов, а рецептора HER2 – таргетных анти-HER2 препаратов. Выявленное отсутствие этих маркеров позволяет избежать назначения заведомо неэффективной терапии. Высокий индекс пролиферативной активности, а также негативность по рецепторному статусу по большей части являются показанием для добавления к лечению цитостатических препаратов.

    Когда назначается исследование?

    • При наличии гистологически верифицированного рака молочной железы — впервые выявленные, рецидивирующие и метастатические опухоли.

    При интерпретации результатов иммуногистохимического определения рецепторного статуса стероидных гормонов (эстрогенов и прогестерона) в опухолях молочной железы следует оценивать не только процент окрашенных антителами клеток, но и интенсивность окрашивания. Оба эти параметра учитываются в шкале Allred, где процент позитивных клеток оценивается от 0 до 5 баллов, а интенсивность окрашивания от 0 до 3. Сумма двух показателей является итоговым баллом, по которому определяется позитивность опухоли по рецепторному статусу: 0-2 негативная, 3-8 позитивная. Общий балл 3 по этой шкале соответствует 1-10% окрашенных клеток и является минимальным позитивным результатом, когда назначение гормональной терапии может иметь эффективность.

    Иногда рецепторный статус определяется исключительно по проценту клеток с окрашенными ядрами. В таких случаях NCCN рекомендует считать позитивными все опухоли, где есть более 1% позитивных клеток.

    При интерпретации окраски на рецептор HER2/neu учитывают только мембранное окрашивание (окрашивание клеточной оболочки), которое оценивают по шкале от 0 до +3:

    результат 0 и +1 считается HER2-негативным;

    +2 – пограничный результат, при нем по данным иммуногистохимического исследования нельзя судить о наличии на поверхности клеток рецептора HER2-neu, необходимо проведение FISH- или CISH-исследования;

    +3 – положительный результат – таргетная терапия анти-HER2 препаратами будет эффективна.

    Согласно классификации St. Gallen Consensus (2009), низким индексом пролиферативной активности считается уровень Ki-67 менее 15%, средним – 16-30%, а высоким – более 30%.

    Что может влиять на результат?

    • Качество предоставленных парафиновых блоков, опыт и квалификация врача-патоморфолога, так как иммуногистохимический метод не в полной мере стандартизирован и оценка его результатов в некоторой степени субъективна.
    • Интерпретация результатов исследования должна проводиться исключительно врачом соответствующей специальности, приведенные данные об эффективности и целесообразности назначения определенных лекарственных средств в зависимости от результатов исследования носят исключительно рекомендательный характер и могут быть пересмотрены с учетом индивидуальных особенностей пациентки.

    

    • При неопределенном HER2/neu-рецепторном статусе (результат иммуногистохимического исследования 2+) рекомендуется выполнение FISH- или CISH-исследования, которые позволят выявить гиперактивацию гена, кодирующего этот рецептор. При недоступности этих исследований допускается повторное иммуногистохимическое исследование, но на другом образце опухолевой ткани.
    • Существует несколько шкал оценки рецепторного статуса рака молочной железы, в лабораторном отчете должно быть указано, по какой именно проводилась оценка позитивности опухоли в данном исследовании, а также дана описательная характеристика количества позитивных клеток, особенностей окрашивания клеточных структур и морфологических особенностей клеток.

    Гистологическое исследование биопсийного материала образования молочной железы

    Цитологическое исследование пунктатов молочной железы

    Определение HER2 статуса опухоли методом FISH

    Определение HER2 статуса опухоли методом CISH

    Кто назначает исследование?

    Онколог, маммолог, онкогинеколог.

    Dana Carmen Zaha. Significance of immunohistochemistry in breast cancer. World Journal of Clinical Oncology, 2014; 5(3): 382-392.

    NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology: Breast Cancer. Version 3.2017 – November 10, 2017. Available at www.nccn.org.

    Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2 т. – T. I / Под ред. В. В. Долгова, В. В. Меньшикова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. С. 658-660.

    В. Ф. Семиглазов, Р. М. Палтуев, В. В. Семиглазов, Г. А. Дашян, Т. Ю. Семиглазова, П. В. Криворотько, К. С. Николаев. Общие рекомендации по лечению раннего рака молочной железы St. Galle- 2015, адаптированные экспертами Российского общества онкомаммологов. Опухоли женской репродуктивной системы, 2015; 3: 43-60.

    источник

    Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование молочной железы дает возможность изучать образцы тканей, которые медики взяли во время биопсии. Информативная и новая методика, позволяющая определить формирование злокачественной опухоли, если у врачей есть подозрения. Многие женщины после 45 лет сталкиваются с раком молочных желез. Благодаря исследованиям медики могут определить тип и характер заболевания.

    Раковые клетки производят определенные белки, у которых есть связь с антителами. ИГХ позволяет изучить взаимодействие между ними. Во время исследования используются стандартные антитела. Учитывая определенные изменения при взаимодействии клеток, медики определяют структуру и форму злокачественного новообразования.

    Опухоль для человеческого организма является чужеродной. Во время борьбы с ней в теле пациента вырабатываются антитела. Иммуногистохимия помогает обнаружить раковые клетки, определяет их структуру и строение.

    Для врачей подобное исследование важно тем, что по результатам они подбирают максимально эффективное лечение пациентам. При помощи ИГХ можно определить:

    • развитие опухолей;
    • рецепторы стероидных гормонов;
    • образование злокачественной опухоли, если первичные признаки очага отсутствуют;
    • формирование новообразования без классификации;
    • количество мембранного белка (HER2) в клетках молочной железы.

    Результатами исследования занимается специалист онколог. Важно определить количество гормональных рецепторов в молочных железах. Чем больше показатели, тем опухоль спокойнее и медленнее растет. У пациента высокие шансы, чтобы полностью избавиться от рака на ранней стадии развития.

    Иммуногистохимия (ИГХ) при раке молочной железы осуществляется методом забора небольшого количества тканей новообразования. Биопсия проводится в месте, где врачи предполагают формирование злокачественных клеток. Перед процедурой врач отмечает маркером место ее проведения на груди женщины.

    На исследование берутся также отсеченные ткани опухоли, которые были получены после хирургического вмешательства. Дальше диагностика проводится следующим образом:

    1. Полученный материал отправляют в лабораторию.
    2. Ткани помещают в специальную емкость, где находится формалин.
    3. Их обезжиривают.
    4. Добавляют жидкий парафин, чтобы получить блоки и информацию о строении, структуре клеток, тканей.
    5. Срезают слой, толщина которого составляет 1 мм.
    6. Укладывают на специально подготовленное стекло.
    7. Для окрашивания среза используются препараты и антитела ИГХ.
    8. Результаты исследования специалисты получают через 12 дней.

    Для определения рака молочной железы применяются различные маркеры. Если результаты исследования показывают присутствие в тканях большого количества гормонов (прогестерона и эстрогена), опухоль прогрессирует. В большинстве случаев присутствуют уже метастазы. Средняя концентрация гормонов указывает на то, что злокачественное новообразование слабо развивается. У пациента есть шансы пройти эффективное лечение медицинскими препаратами и добиться положительного результата.

    Исход будет благоприятный после применения гормональных средств, если маркер Ki-67 при онкологии груди находится в пределах 15-17%. О стремительном развитии опухоли говорит показатель, достигающий 35%. Врачи в такой ситуации назначают больным только химиотерапевтические препараты, которые смогут приостановить ее прогрессирование. Если показатели превышают 85%, больному невозможно помочь и избежать летального исхода.

    Иммуногистохимический метод анализа позволяет определить многочисленные факторы, связанные со злокачественным новообразованием. Речь идет:

    • о видах и подвидах раковой опухоли;
    • об источниках метастазирования;
    • о площади поражения, на которую распространились раковые клетки по всему организму больного;
    • об эффективности проводимого лечения пациентам с онкологией.

    Исследования позволяют получить информацию, что касается стадии развития заболевания. Как быстро растет опухоль. Современные специалисты считают, что иммуногистохимический анализ является максимально информативным, если сравнивать его с другими привычными исследованиями при формировании рака молочных желез. Иногда врачам необходима именно гистология. В большинстве случаев проводятся оба анализа. Так специалисты получают больше информации о карциноме.

    В медицине существуют информационные факторы. Они позволяют изучить поведение и реакцию опухоли на лечение.

    Показывают возможное поведение злокачественного новообразования в момент проведения диагностики. Терапия не влияет на показатели. Специалист получает информацию о том, как быстро прогрессирует рак молочной железы. По результатам он может определить оптимальный метод лечения для каждого пациента индивидуально.

    Изучение позволяет получить информацию о том, как раковые клетки отреагируют на выбранную методику терапии.

    Прогностические и предсказывающие факторы могут быть систематизированы по отдельности. Но результаты исследования покажут схожие данные. При положительном раке молочной железы количество белка HER2 повышенное. Данные указывают на агрессивное протекание злокачественных процессов. В отдаленных органах присутствуют ранние метастазы.

    Негативный результат свидетельствует о небольшом количестве мембранного белка в опухоли. Она не будет реагировать на применение медицинских препаратов во время лечения.

    Иммуногистохимия позволяет изучить структуру взятого материала во время биопсии или после оперативного вмешательства. Присутствие определенных антител даст возможность специалистам установить вид злокачественного новообразования.

    Интерпретацией и расшифровкой иммуногистохимического исследования занимается квалифицированный специалист – онколог. Врач должен подробно рассказать пациенту, на что указывает полученная информация. В результатах прописывается показатель Ki-67. Он показывает насколько агрессивная опухоль.

    Во время исследований врачи изучают гормональный фон пациентки, который тесно связан с поведением злокачественного новообразования. Медики определяют площадь поражения патологическими процессами, скорость формирования метастаз.

    Иммуногистохимический анализ – это такой метод диагностики, позволяющий определить стадию рака молочной железы, форму заболевания, а также степень распространения его. На основании полученных данных специалист назначает максимально подходящее лечение.

    При стабильном гормональном фоне и неактивной опухоли женщине рекомендуют ограничиться приемом гормональных лекарств. Если рак молочной железы ведет себя агрессивно и активно развивается, показатель Ki-67 повышается. В данной ситуации врачи назначают больным более тяжелые химические препараты.

    В здоровом организме клетки самостоятельно восстанавливаются и нормально делятся. Положительный анализ на присутствие мембранного белка (HER2) указывает, что рак прогрессирует. Злокачественная опухоль будет увеличиваться в объеме. Чтобы подавить ее распространение и рост специалисты назначают больным медикаментозную терапию.

    Отрицательные результаты РМЖ с негативным показателем HER2 требуют применения более сильных химиотерапевтических препаратов. Лечение подбирает врач онколог, учитывая индивидуальные особенности пациента и протекание патологических процессов.

    Иммуногистохимия представляет собой серьезный и сложный метод диагностики рака молочной железы. Медики во время исследований применяют многочисленные маркеры. Правильно расшифровать результаты может только квалифицированный доктор. В большинстве случаев при подтверждении развития рака у женщины, собирают целый врачебный консилиум. Мнение разных специалистов позволяет правильно и адекватно подобрать, также расписать тактику лечения злокачественной опухоли.

    источник

    Онкологические заболевания грудных желез диагностируются у женщин довольно часто. Поэтому диагностические мероприятия, позволяющие обнаружить опасную опухоль, не теряют актуальность. Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы предназначено для определения восприимчивости злокачественных клеток к конкретным веществам. Посредством исследования выясняют, корректно ли осуществляемое лечение.

    ИГХ при онкологических патологиях грудных желез осуществляют, чтобы:

    • установить вид заболевания, восприимчивый к определенной терапии;
    • выявить метастазы, пущенные опухолью, и степень их распространения;
    • найти источник метастазов;
    • установить стадию развития выявленной опухоли;
    • оценить действенность терапии;
    • узнать скорость распространения метастазов;
    • выявить чувствительность кровяных клеток к конкретным лекарственным веществам для отсеивания неэффективных медикаментов.

    Диагностическое исследование применяется для определения состояния любой части человеческого организма. Назначают процедуру не только при раке грудных желез, но и при любых новообразованиях, предположительно являющихся злокачественными. Посредством ИГХ определяют состояние эндометрия при:

    • появлении метастазов;
    • патологиях матки;
    • бесплодии;
    • неудачных процедурах ЭКО;
    • болезнях органов тазовой области, имеющих разную этиологию;
    • постоянном самопроизвольном прерывании беременности.

    Перед процедурой пациентка:

    • не должна принимать гормональные лекарства (за неделю до взятия биоматериала);
    • не должна принимать медикаменты для остановки крови;
    • должна провести тщательные гигиенические процедуры.

    Исследование проводят в конкретные дни менструального цикла:

    • на 5 – 7 день изучают патологические изменения эндометрия;
    • на 20 – 24 день оценивают секреторную и рецепторную деятельность.

    Перед процедурой медик отмечает выбранную точку на груди пациентки. Также на анализ могут взять куски опухоли, вырезанные при хирургическом вмешательстве.

    Читайте также:  Метастазы в подмышечные лимфоузлы при раке молочной железы

    Далее диагностическое мероприятие проводится следующим путем:

    1. Собранный биоматериал относят в лабораторию.
    2. Опухолевые образцы опускают в емкость с формалином.
    3. Биоматериал обезжиривают.
    4. Вливают парафиновую жидкость, позволяющую определить структуру и вид опухолевых тканей.
    5. Отрезают кусок опухоли толщиной 1 мм.
    6. Кладут на лабораторное стекло.
    7. В качестве красителей используют химические реагенты и антитела.
    8. Итоги теста готовы спустя две недели.

    Для обнаружения рака молочных желез берут разные маркеры. Если по итогам теста выявлено наличие в опухолевых тканях значительного количества женских половых гормонов, то опухоль активно развивается. Возможно даже, что уже пошли метастазы. Если скопление гормонов среднее, то злокачественные клетки размножаются неактивно. А значит, при грамотном и своевременном лечении у пациентки есть возможность восстановить здоровье.

    Положительный итог гормонального лечения возможен, если маркер Ki-67 при злокачественной опухоли молочной железы не превышает 15 – 17%. Новообразование стремительно растет, если маркер достигает 35%. В этой ситуации незамедлительно осуществляется химиотерапия, позволяющая затормозить размножение злокачественных клеток. Если же маркер выше 85%, то проводить лечение уже поздно, смертельный исход неизбежен.

    При повышенном ER и PR в опухолевых тканях можно говорить, что злокачественное образование растет под воздействием гормонов. Если концентрация ER и PR не выходит за пределы нормы или выходит незначительно, то пациентка может надеяться на успешное лечение.

    Расшифровывают показатели ИГХ по специальной цветовой шкале, соотнося цвета на шкале с оттенками биоматериала.

    1. 0 и +1. Концентрация белка соответствует норме. Терапевтические мероприятия не нужны.
    2. +2. Концентрация белка средняя. В грудной железе присутствует злокачественная опухоль. Обычно проводят дополнительное исследование, чтобы подтвердить верный результат первого теста. Дополнительное исследование называется FISH, позволяет узнать содержание белка в каждой клетке. Если HER-2 в норме, то FISH-тест даст положительный результат, если повышен, то отрицательный.
    3. +3. Концентрация белка намного выше нормального значения. Однозначно в грудной железе присутствует злокачественное новообразование.

    Если тест показал высокую концентрацию белка, то опухоль агрессивного типа, растет интенсивно.

    По результатам ИГХ выделяют 4 вида рака груди:

    • А-люминальный – рецепторы ER положительны, рецепторы к белку отрицательны, Ki-67 ниже 14%;
    • Б-люминальный – рецепторы ER и HER-2 отрицательны, Ki-67 выше 15%;
    • сверхэкспрессирующий – рецепторы ER и PR отрицательны, рецепторы к белку положительны;
    • базальноподобный – все рецепторы отрицательны.

    По ним определяют наиболее вероятное поведение новообразования на момент проведения теста. Нет влияния терапии на исследование. Тест позволяет определить агрессивность опухоли. Прогноз важен для подбора наиболее подходящих медикаментов и лечебных процедур.

    ИГХ – сложный тест, при котором используют большое количество онкологических маркеров. Чем больше маркеров проверяют, тем выше стоимость исследования. Тест эффективен в определении вида онкологического заболевания, помогает назначить оптимальную терапию.

    источник

    Иногда результатов гистологии бывает недостаточно. Если не удается получить окончательный ответ и поставить диагноз или необходимо уточнение молекулярных параметров опухолевого образования назначается иммуногистохимическое исследование.

    Метод иммуногистохимии используют как дополнительный. Он помогает выявить в биологическом материале специфичные белки, которые характерны для определенного вида клеток и, как следствие, отличить одну разновидность опухолевого образования от другой. Также исследование помогает выявить:

    1. Маркеры иммуногистохимии, которые отвечают за чувствительность опухоли к воздействию лекарственных средств, лучевой терапии.
    2. Метастатический характер происхождения образования и определить первичный источник поражения.
    3. Гормоны и рецепторы к ним.
    4. Малигнизацию клеток.

    ИГХ как метод диагностики широко применяется в онкологии. Этот вид изучения тканей предполагает применение определенных реактивов. Они содержат в себе антитела или белковые соединения, которые помечены определенными веществами.

    ВАЖНО! Антитела (иммуноглобулины, специфические белки) вырабатываются различными клетками организма и обеспечивают иммунитет, при внедрении антигена. Часто вырабатываются при попадании вирусов, бактерий, при онкологии, вакцинации, пересадке тканей, а иногда и против собственных клеток, что приводит к аутоиммунным патологиям. Получают их от различных животных.

    При контакте с антигенами, которые могут содержаться в исследуемом биоптате, происходит специфическая реакция (антигенами являются межклеточные вещества ткани, компоненты клеточных структур). В результате нее можно судить о наличии или отсутствии того или иного вещества в тканях.

    ВАЖНО! Антигены — генетически чужеродное тело, которое при попадании в организм вызывает иммунную реакцию, а именно выработку антител для подавления этого чужеродного агента. В случае с ИГХ-анализом антигенами выступают молекулы, которые вырабатываются патологически измененными опухолевыми клетками.

    Структурная специфичность исследования — принципиально отличает ИГХ от других способов иммунологической диагностики, которые используют реакцию антиген-антитело. Т. е. специалисты оценивают помимо присутствия тех или иных веществ в тканях (при наличии или отсутствии окрашивания) и их количественный состав (по интенсивности окрашивания), еще пространственное распределение различных структурных элементов (цитоплазма, ядро, мембрана клетки и пр.) в тонком окрашенном срезе.

    Реакцию можно получить несколькими способами. Часто применяется прямой, при котором используется один вид маркированных антител. Последние должны связаться с выявляемым веществом или молекулой-мишенью. Если последняя присутствует в биоптате, то исследуемая ткань окрашивается.

    Непрямой метод считается более информативным и чувствительным. Его суть заключается в поэтапном введении 2 разных антител. Немаркированные первичные антитела вступают в реакцию с опухолевым антигеном в биоптате, образуют комплекс антитело-антиген. Затем вводят вторичные уже маркированные антитела (реагент), которые связываются с определенной частью молекулы первичного антитела. Т. е. первичные антитела являются антигенами для вторичных.

    ИГХ назначается в том случае, когда обычного гистологического исследования недостаточно. Например, когда опухоль молочной железы имеет неспецифичное микроскопическое строение, не позволяющее поставить точный окончательный диагноз.

    Биопсия с иммуногистохимией являются важной частью верификации диагноза при раке молочной железы, предстательной железы, мягких тканей и пр. Особенно актуально исследование для выявления лимфом, поскольку зачастую диагностировать эту болезнь без ИГХ невозможно. Большую роль ИГХ исследование играет в определении гистологического типа недифференцированных опухолевых образований, а также метастазов, которые имеют невыясненный первичный очаг.

    Иммуногистохимия рака молочной железы полезна в прогнозировании течения опухолевого процесса и возможности таргентной терапии. Она помогает оценить:

    • функциональное состояние клеток образования;
    • злокачественный потенциал и темп роста опухоли;
    • тенденцию к метастазированию.

    Чтобы провести исследование, необходимы образцы самой опухоли и близлежащих тканей. Их можно получить при биопсии или после хирургического вмешательства. Материалу необходимо пройти несколько этапов подготовки перед исследованием: фиксация, промывание, обезвоживание, погружение в парафин или заливка другим веществом.

    Исследуемый биологический объект должен получиться плотным, но не хрупким. Сначала материал промывают, обезвоживают и уплотняют в спиртах возрастающей крепости. Затем его просветляют путем погружения в смесь абсолютного спирта и О-ксилола в пропорции 1:1. После этого помещают в несколько порций чистого О-ксилола. И только потом биологический объект пропитывают в парафине. Последний этап помогает законсервировать ткань и на долгое время сохранить ее структурные особенности в парафиновом блоке.

    Затем лаборант производит с этих блоков срезы, при помощи специального прибора — микротома, толщиной до 1 мкм. Полученные срезы наклеивают на предметное стекло, которое смазано глицерином и смесью белка. Подсушивают.

    Чтобы исследуемый материал вступил в реакцию с антителом, необходимо его обезжирить и удалить парафин. Процедура называется депарафинизация. Для ее проведения используют 3 порции О-ксилола, а также спирты нисходящей крепости.

    Последний этап — окрашивание. Оно проводится для того, чтобы четко видеть структуру тканей под микроскопом. Лаборанты могут использовать огромное количество красителей. Условно их можно классифицировать по:

    • происхождению, например, животные — кармин, растительные — гематоксилин, синтетические — эозин;
    • химическим свойствам, например, нейтральные, основные, кислые.

    Чаще всего для этой процедур используют эозин, гематоксилин. Биологический материал помещают в раствор гематоксилина на несколько минут, затем промывают и дифференцируют результаты окрашивания. После этого провидится окрашивание в эозине, промывание и обезвоживание в спиртах восходящей крепости. Последовательная многоэтапная окраска позволяет на каждом этапе все больше определить нозологию и фенотип опухолевого образования. Патоморфолог изучает материл под микроскопом после каждого окрашивания. И только после оценки изменений и интерпретации полученной информации, назначает панель антител.

    Чтобы получить точные данные о патологическом процессе и верифицировать заболевание лаборант приступает к обработке подготовленного образца специальными реактивами, содержащими меченые антитела. В результате происходит реакция между антителом и антигеном. Это сопровождается характерной визуализацией, которая зависит от веществ, используемых для маркировки.

    Иммуногистохимия молочной железы — это сложный многоступенчатый анализ, на результат которого влияет множество факторов, например, низкое качество реагентов, недостаточная фиксация исследуемого биологического объекта или неправильно подобранная панель антител. Количество искомых клеток-мишеней исчисляется сотнями, поэтому специалист должен понимать, что он ищет и использовать для этого необходимые антитела.

    Гистологи оценивают интенсивность окрашивания опухолевых клеток после взаимодействия с реактивами по специальной шкале:

    • 0-1+ — онкологии нет;
    • 2+ — онкологическое образование отрицательное;
    • 3+ — онкологическое образование положительное.

    Длительность ИГХ при раке молочной железы во многом зависит от способа его проведения. Бывает ручной и автоматический. Последний считается более совершенным, поскольку вероятность технической ошибки сведена к минимуму, да и проводится он гораздо быстрее.

    Перед определением тактики лечения онколог задается различными вопросами: какова вероятность рецидива заболевания у больного или его смерти, какой результат лечения можно ожидать. Для этого специалист изучает особенности и характеристики опухоли и в зависимости от различных предсказывающих и прогностических факторов назначает тактику лечения.

    К этим факторам относятся основополагающие признаки, которые определяют особенность протекания болезни и ее исход. При операбельных формах онкологии груди к таким факторам относятся: морфологическое строение новообразования и его размер, состояние лимфоузлов. Т. е. подобные характеристики определяют хронологию болезни.

    Особенности прогностических факторов:

    1. Базируются на биологических характеристиках опухолевого образования.
    2. Взаимосвязаны с продолжительностью жизни пациента в независимости от тактики терапии.
    3. Делят пациентов по степени риска смерти, рецидива.
    4. Примеры: индекс митотической активности, протеолитические ферменты, антиогенез и др.

    Индекс митотической активности (MAI) является независимым прогностическим фактором, который характеризует продолжительность жизни больных. У пациентов с индексом меньше 10 в процессе наблюдения летальный исход составлял 6 %, у пациентов с индексом больше 10 — 28 %.

    Протеолитические ферменты имеют значение в процессе метастазирования. В трансформированных злокачественных клетках таких ферментов вырабатывается больше, чем в здоровых, поэтому при злокачественных образованиях наблюдается выход этих веществ в межклеточное пространство и увеличение активности. Т. е. ферменты вовлечены в процесс онкогенеза. Т. о. пациенты с низким уровнем этих ферментов имеют более благоприятный прогноз по безрецидивной выживаемости.

    Способность новообразования расти и метастазировать во многом зависит от ангиогенеза — образования новых кровеносных сосудов. В процессе наблюдения пациентов в течение 10 лет, было выявлено, что у женщин с высоким значением плотности микрососудов в опухоли прогноз хуже.

    Эти факторы предсказывают эффективность лечения. Они помогают выделить группу пациентов с более-менее значимым ответом на проводимую терапию. К примеру, опреелить эффективность гормональных препаратов, уровень рецепторов стероидных гормонов.

    К клиническим факторам, которые помогают интерпретировать ответ на терапию при метастатической форме рака относятся:

    1. Локализация и количественный показатель метастазов. Например, при поражении кости — прогноз относительно благоприятный; поражение кости, 2 органов, легких — менее благоприятный; при поражении больше 2 органов, наличии метастаз в печени, мозгу и пр. — неблагоприятный.
    2. Временной интервал между лечением первичного новообразования и появления метастазов. Чем он продолжительнее, тем благоприятнее прогноз.
    3. Общее состояние здоровья пациента.
    4. Возрастная категория. Женщины в постменопаузе имеют больше шансов на благоприятный ответ на терапию.
    5. Рецепторы стероидных гормонов в опухоли (гормононезависимые новообразования не реагируют на гормональное лечение).

    Метастатический рак молочных желез считается хронической патологией. После полного регресса, полученного в результате химиотерапии, продолжительность жизни 5-10 лет встречается достаточно редко, примерно в 5-20 % случаев. Поэтому для лечения считается оптимальным вариантом — последовательное применение лечебных воздействий с как можно меньшей токсичностью, чтобы получить максимальный паллиативный эффект и отсрочить прогрессирование патологии, смерти.

    Достоверность результатов ИГХ молочной железы достигает 99 %. Методика чувствительна и высокоспецифичная. Она помогает верифицировать патологический процесс и установить стадию заболевания. Для ее проведения необходимо минимум биоптата и реактивов, при этом она будет информативна даже спустя длительное время после взятия биопсии.

    источник