Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы: показания, подготовка к анализу, расшифровка ИХГ
Давайте для начала мы разберем, что же такое иммуногистохимическое исследование. Под ним подразумевается микроскопическое исследование ткани, которое основано на выявлении антител на патологические вещества.
Разделяют два метода исследования:
- прямой (прямая реакция антител непосредственно на патологическое вещество);
- непрямой метод (патологические вещества, распознаются с помощью вторичных антител).
- ферменты — белковые молекулы, они же молекулы РНК. Так например: щелочная фосфатаза (фермент гидролаза);
- флуоресцентные — тот же физический процесс, например — флуоресцеин — органическое соединение;
- электроно-плотные частицы, к таким относится золото.
- изучения и исследования секреторных процессов, в том числе синтетических;
- распознавания гормонов рецепторов;
- выявления различных типов, родов клеток по их свойствам.
В области исследования грудной железы данное исследование используется в качестве предварительной диагностики для установления точного диагноза, в том числе при злокачественных образованиях. Данное исследование дает возможность определить следующее:
- Точное образование (доброкачественное или злокачественное) и назначение правильного лечения.
- Точное месторасположение (наличие метастаз в организме и их дислокацию).
- Первоначальный очаг заболевания.
- Стадию заболевания (например, степень рака).
- Пролиферацию клеток (распознать скорость размножения и развития раковых клеток).
- Ответ раковых клеток на медикаменты, их чувствительность, также можно отследить чувствительность к химиотерапии, к лучевой терапии.
Исследование способно детально изучить заболевание, что дает возможность полностью диагностировать заболевание и подобрать правильное лечение. Это играет не маловажную роль в диагностике, лечении, продолжительности жизни онкологических больных. Также можно сказать, что с помощью данного метода можно:
Иммуногистохимия при раке молочной железы
на более раннем сроке диагностировать заболевание;
В основном данная диагностика используется для изучения (исследования) любой ткани человеческого организма. Основа для проведения данного исследования — это любое новообразование, которое предполагает развитие рака. Также исследование проводится для изучения эндометрия:
- при метастазах;
- при бесплодии;
- после неудачных попыток ЭКО;
- при различных заболеваниях матки;
- при различных видах патологий органов малого таза;
- при постоянных невынашивания плода;
- при заболевания эндометрия.
Исследование не имеет абсолютных противопоказаний. Препятствием для ИГХ может быть, только невозможность по каким либо причинам забора материла на исследование.
Данный вид исследования может проводится только в специализированных лабораториях, при этом врач должен иметь специальную квалификацию, пройти специальное обучение.
Забор проходит непосредственно пораженного участка кожи с помощью биопсии. Также забор материала может происходить во время хирургического вмешательства на молочной железе.
Потом полученный материал специально обрабатывается и консервируется. Для этого она заливается парафином. В таком виде, в парафине, материал может правильно храниться в течении многого времени.
Следующим этапом является микротомирование. Материал нарезают на тонкие пласты при помощи специального аппарата.
В дальнейшим нарезанные пласты окрашиваются с определенными антителами и все это изучается под микроскопом. В некоторых лабораториях изучается окрашенный материал на автоматическом приборе.
- две-три неуспешных процедур ЭКО;
- не первое (постоянное) невынашивание плода на ранних сроках;
- бесплодие.
Во время исследования могут выявить такие заболевания как:
- эндометрит,
- гиперплазия,
- неполную трансформацию эндометрия,
- нарушение фаз развития
- и другие заболевания.
Как показывает практика, именно заболевания, связанные с эндометрием на 73% являются причиной бесплодия.
Данное исследование проводится в определенный день менструального цикла, обычно на 5-7 день смотрят воспалительные процесса эндометрия, на 20-24 день цикла — оценивают секрецию, смотрят рецепторную функцию.
Для этого пациентке рекомендуют:
- не принимать гормоны за неделю до анализа;
- не принимать кровоостанавливающих препаратов;
- правильная интимная гигиена.
Процедура происходит на гинекологическом кресле. Женщину обезболивают специальными препаратами и вводят зеркало. Делается санация половых органов. Вводится специальный прибор — система гистероскопа и проводится забор. Далее убирают прибор, проводя санацию органов.
Потом женщина находится под наблюдением врача до полного восстановление, примерно 1-2 часа.
Результаты примерно готовятся 3-5 дней. Оценить результаты может только специалист.
HER2neu или, по-другому говоря, человеческий рецептор эпидермального фактора роста. Несет ответственность за продукцию белка. При поражении раковых клеток усиливается беспорядочный рост.
Если результат пишется 1 (+), то это говорит о том, что избытка белка нет, следствие — нехорошее состоянии опухоли.
При 2 (++) обычно назначают повторное исследование.
При 3 (+++) рассматривают как положительную опухоль, которую обычно подвергают медикаментозному лечению.
ER uPR данный вид гормонов способствует стимуляции роста патологических тканий. Если данные показатели увеличены, то это говорит о правильном лечении, что опухоль реагирует на гормонотерапию. Следовательно, если данные показатели понижены, то можно говорить о неправильном подборе лекарств. Опухоль развивается дальше.
Ki — 67, по данному показателю оценивают стадию опухоли и её характеристики. Если результат дает повешенные цифры, то это говорит о быстром течении заболевания, наличии метастаз и, к сожалению, совсем не хороший прогноз. Данный результат отмечается в процентах. Так например:
- 11% — вполне хороший прогноз (выздоровление 93%);
- 21 % — говорят о нем как 50% на 50%, все зависит от организма человека;
- все показатели за 30% — оценивают как тяжелая стадия — высокоагрессивная;
- 90% — неизлечимо, приводит к смерти.
Так же данный индекс способствует к определению выбора лечения.
Ген p53 — способствует предотвращению роста патологической ткани. Данный ген является барьером для заболевания. Для начала заболевания служит мутация гена, например, наследственность или нарушение белковой матрицы.
VEGF — обозначается белок, которой несет функцию контроля жизнедеятельности ткани при условии недостаточного кровообращения. Высокие показатели данного белка говорит о росте опухолевой ткани, в следствии «хорошего» питания ткани.
В основном выделяют 4 типа рака:
- Люминальный А — при этом: к женским гормонам рецепторы положительны, к HER2- отрицательные, показатель ki- 65-13% меньше.
- Люминальный В — при этом: к женским гормонам рецепторы положительны, к HER2- отрицательные, показатель ki- 65-15% меньше.
- Erb — B2 — при этом: реакция рецепторов к прогестерону (эстрогену) отрицательная, к HER2- положительная.
- Базальноподобный — отрицательный показатель по всем категориям.
Принято считать, что отвечают за саму опухоль — PD-1, PDL-1 и PDL-2. Но они могут присутствовать не во всех патологических тканях. Для точного определения и назначения правильной терапии всем пациенткам, которым непосредственно показана иммунотерапия проводится такое исследование, как экспрессия белков PD-1, PDL-1 и PDL-2.
Данное исследование проводят с помощью флуоресцентной гибридизации FISH. В результате наличия экспрессии иммунотерапия назначается такими препаратами, как: Ниволумаб, Атезолизумаб, Пембролизумаб.
Иммуногистохимическое исследование очень сложный анализ, в котором используются множественное количество онкомаркеров.
Стоимость исследования зависит от количества проверяемых факторов. Цена исследования начинается от 4 тысяч рублей и до 20 тысяч рублей.
источник
Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы – это анализ, который позволяет определить чувствительность новообразования злокачественного характера к некоторым веществам. С его помощью диагностируют стадию патологии и узнают, правильно ли было назначено лечение.
Если говорить о том, что такое ИГХ онкологии, то это исследование, позволяющее выявить взаимодействие между белками и антигенами. Дело том, что клетки, пораженные онкологией, синтезируют белок. Он имеет связь с антителами. Учитывая это, специалисты с помощью анализа определяют форму и структуру опухоли.
ИГХ при раке молочной железы проводят с целью:
- определения вида заболевания для назначения терапии;
- раскрытия наличие метастаз, идущих от опухоли, и их границы;
- обнаружения источника метастаз;
- диагностирования стадии патологии при ее выявлении;
- оценки эффективности терапии;
- установления скорости развития метастаз при наличии таковых;
- выявления чувствительности клеток крови к тем или иным препаратам и методам лечения, чтобы оставить эффективные средства и исключить те медикаменты и способы терапии, которые не влияют на опухоль.
Иммуногистохимия рака молочной железы проводится путем забора ткани, пораженной онкологией. Биоматериал добывается с помощью биопсии или в процессе оперативного вмешательства. После этого выполняется анализ по следующим этапам:
- биоматериал помещается в формалин, после чего переправляется в лабораторию для проведения дальнейших манипуляций;
- специалисты обезжиривают ткань;
- в материал добавляется специальный жидкий парафин, который помогает выявить структуру клеток опухоли;
- выполняется микротравмирование – процедура срезания тонкого слоя парафина, толщиной в 1 мм;
- взятые образцы размещаются на специальных стеклах;
- выполняется окрашивание материала с помощью реактивов;
- образцы оставляют на 12 дней, после чего оценивают результат.
Для проведения анализа используют несколько видов маркеров. Если в ходе исследования в биоматериале обнаружена повышенная концентрация эстрогенов и прогестеронов, делают заключение о развитии опухоли. Это также говорит о появлении метастазов от новообразования. Если анализ показал средние результаты, то говорят о слабом росте опухоли. Это говорит о том, что больной после соответствующей терапии имеет все шансы на выздоровление.
Чисто рецепторов HER2 влияют на цветовую гамму реакторов с клетками, которые поражены раком. Чем их больше, тем ярче тон. В этом случае гистология проявляется себя, как неточная наука, поскольку восприятие оттенков образцов субъективное и зависит только от ощущений специалиста, выполняющего анализ.
При расшифровке результатов учитывают рецепторы к прогестерону – PR и эстрогену – ER. ИГХ в онкологии также показывает содержание рецептора человека эпидермального фактора роста (HER2-белка) в биоматериале, который взят как образец для проведения исследования. У женщин с карциномой молочной железы наблюдается повышенный HER2.
Расшифровка результатов по эстрогену и прогестерону – если в опухоли обнаружены рецепторы к мужским и женским гормонам, то рост образования происходит под их воздействием, если PR и ER в организме присутствуют в норме или их концентрация увеличена. При своевременном квалифицированном лечении пациент может рассчитывать на благоприятном исходе.
Расшифровка результатов ИГХ выполняется в зависимости от оттенка образцов по специальной шкале:
- 0-1+. Такой результат говорит о том, что концентрация белка не превышена. Терапия патологии не требуется.
- 2+. Значение указывается на среднюю концентрацию белка. Это говорит о наличии отрицательной опухоли (карциномы) груди. В этом случае рекомендуется выполнить еще один анализ, поскольку первое исследование не всегда дает точный результат. Для уточнения диагностики выполняют тест FISH. Такое исследование определяет концентрацию белка в каждой клетке. При нормальном содержании HER2 анализ покажет положительный результат, а при повышенном – отрицательный.
- 3+. Белок превышает нормальное значение. Диагностируется положительная опухоль груди.
Если анализ показал положительную опухоль, значит, патология имеет агрессивный характер развития. Она растет в несколько раз быстрее, чем при отрицательном значении.
После изучения исследования, расшифровывается результат, исходя из показателя маркера Ki67. Если его значение находится в пределах нормы, то есть 15-17%. При повышении его уровня до 35% опухоль начинает быстро расти. Замедлить процесс помогает химиотерапия. Если анализ показал 85%, врачи отказываются от лечения пациента, поскольку снизить маркер в таком случае невозможно и смертельного исхода не избежать.
- люминальный А – рецепторы к ER положительные, к белку отрицательные, Ki67 менее 14%;
- люминальный Б – рецепторы к ER, к HER2 – отрицательные, Ki67 более 15%;
- Erb В2 сверхэкспрессирующий — PR и ER – отрицательный, белок – положительный;
- Базальноподобный – отрицательное значение к прогестерону и остальным факторам.
Такие факторы демонстрируют возможное поведение опухоли на момент анализа. Лечение не оказывает влияние на исследование. Врач благодаря ИГХ видит, как ведет себя опухоль. Прогнозом специалист пользуется для определения подходящей терапии для каждого пациента.
Исследования ИГХ рака молочной железы позволяют определить эффективность лечения. Если анализ показал положительный рак, то назначают химиотерапию. При отрицательном значении – прием медикаментозных препаратов.
ИГХ – это исследование, которое позволяет определить вид рака молочной железы и назначить адекватное лечение, что позволяет спасти пациентке жизнь, а в некоторых случаях – избавиться от патологии.
источник
Рак молочной железы – основная причина смертности среди женщин, которые имеют злокачественные опухоли. Благодаря новейшим тенденциям в области диагностики возможно определение на ранних стадиях эволюции атипичных клеток. Особым методом является ИГХ при раке молочной железы. Анализ заключается в изучении иммуногистохимических реакций. Совершенно новая и эффективная методика позволяет определить тип тканей, сенсибилизацию клеток к проводимой лучевой терапии, а также выявляет причину появления метастазов при помощи гистологии. Без ИГХ невозможно продуктивное лечение заболевания.
На своей поверхности раковые клетки имеют молекулы-антигены, являющиеся белками, или другие макромолекулы. Продуцируя антигены, атипичные клетки вызывают ответную иммунную реакцию – выработку антител. Взаимосвязанность между белками рака и антителами обнаруживается при помощи иммуногистохимии. Такая восприимчивость позволяет проводить иммунолечение рака.
Чтобы выбрать эффективные методы лечения, процедура определения раковых элементов необходима как для врача, так и для пациента. ИГХ исследования проводят для многих критериев.
- Выраженность экспрессии определяется рецепторами прогестерона и эстрогена.
- Определение прогноза.
- Определение атипической модификации клеток.
- Установление структурно-функциональных связей в раковых клетках.
- Осуществление гистогенетической классификации и проб тканей.
- Распознавание рецептора HER2 и его амплификация при РМЖ.
- Устанавливание местонахождения первичной опухоли по метастазу.
- Невосприимчивость и отзывчивость на введение химиотерапевтических лекарственных средств.
- Сенситивность к методу лучевой терапии.
- Скорость роста местастазированных тканей.
Определение процентного соотношения маркера HER2 позволяет установить как быстро метастазирует опухоль. Зачастую подобная экспрессия антигена имеет отрицательный прогноз и непродолжительное существование, причем заболевание чаще наблюдается у женщин в репродуктивном периоде.
Число рецепторов гормонов-стероидов в большом количестве дает шанс на выздоровление, если существовала возможность определить диагноз на ранних стадиях. Расшифровываться результаты показателей иммунногистологии должны врачом-онкологом.
Иммуногистологический метод показан женщинам в любом возрасте при сомнительных результатах на исключение рака. Положительные отзывы в лечении на первых стадиях определяют более быстрое восстановление и даже полное излечение.
Также исследование ИГХ целесообразно проходить при заболеваниях женских репродуктивных органов, наличии бесплодия. Забор эндометрических клеток позволяет зафиксировать факт невозможности зачатия. ИГХ определяет как отвечают рецепторы в матке на гормональные компоненты, что способствует выбору методов лечения.
Для процедуры ИГХ осуществляется биопсийный забор ткани. Также возможно получить ткань опухоли путем операции. Помещение образцов в формалиновую жидкость позволяет обезжирить ткани. После подобной подготовки материала тончайший срез клеток помещают в парафин, после чего микротомированием располагают на стеклах. Затем путем окраса при помощи реактивных компонентов, содержащих антитела, дифференцируют форму и нозологические параметры опухоли. В течение 10 дней, максимум двух недель лаборанты расшифровывают показатели.
Исполнение иммуногистохимии – сложный последовательный процесс в несколько этапов.
Вид ракового образования интерпретируется количеством атипических антител. Сосредоточение эстрогена и прогестерона в биоматериале говорит об эволюционировании опухолевого процесса, а также о появлении метастаз.
При средних критериях следует знать о медленном росте опухоли, что подтверждает положительное прогнозирование процесса.
Количество генов HER2 полностью оказывает влияние на цвет реактивных препаратов с наличием раковых клеток. Чем их число выше, тем интенсивнее тонирование. Расшифровка гистологических цветовых оттенков является более субъективной, так как оценивается разными специалистами по-разному ввиду восприятия цветовой гаммы.
Истолкование итогов ИГХ регламентируется по следующей микрограмме:
- 0-1 + содержание белкового элемента незначительное. Лечение не требуется.
- 2 + средняя процентная доля свидетельствует об отрицательности атипических клеток в груди при раковом процессе. Для более эффективного результата необходимо повторить методику. Или провести пробу FISH.
- 3 + превышение нормы говорит о наличии положительного злокачественного процесса.
При последнем критерии эволюция опухоли агрессивная, что означает более быстрый рост опухоли, чем при отрицательных значениях.
Также очень важны коэффициенты Ki67, которые определяют стадию развития рака железы. Поэтому рационально будет обследовать гормональный фон для установления поведения опухолевидного процесса. При повышенных цифрах необходима терапия химическими средствами и операция по экстирпации опухоли.
Не всегда ИГХ дает информативные результаты при подозрении или наличии онкологии, поэтому проводят гистологию рака молочной железы. Заключается она в микроскопии биопсийного материала, который показывает не только присутствие атипических клеток, но и первопричину происхождения рака. Процедура достаточно болезненная, но это не меняет ее значимость.
Данный способ проводит дифференциальную диагностику с доброкачественными образованиями, карциномой, фиброаденомой и другими гиперплазиями грудной железы.
По результатам обнаружения раковых клеток гистология устанавливает морфологию опухоли и ее разновидности. Выделяют следующие гистологические типы рака молочной железы:
- Дольковый или лобулярный рак
- Протоковый
- Папиллярный
- Медуллярный
- Воспалительный
- Коллоидный
- Метапластический рак
Также различают инвазивный тип – при росте внутрь ткани, неивазивный – при росте в проток. Более подробные фото каждого типа можно увидеть на страницах интернет-ресурса.
Исследование при раке определяет продуктивность лечебных мероприятий. Применение большого количества маркеров для выявления строения атипий, формы, степени и других показателей ракового образования позволяет правильно назначать терапию:
- Отрицательные значения ограничиваются приемом медикаментов.
- Положительные нуждаются в химиотерапии.
Назначение ИГХ делает возможным диагностирование стадии, что обеспечивает правильность и благовременность назначенного лечения.
Для наиболее надежных и верных критериев женщинам с подозрением на раковое образование следует проходить маммографию, биопсийный забор тканей и другие виды вспомогательных тестов.
источник
Анализ ИГХ при раке молочной железы означает иммуногистохимическое исследование биоптатов пораженного участка груди. Этот метод исследования представляет собой сложные взаимодействия раковых антигенов с антителами. Необходимость выполнения обследования объясняется высокой информативностью и возможностью подобрать правильный метод терапии. Врачи рассказывают, как выполняется анализ и какие данные можно узнать.
Иммуногистохимический анализ выполняется с использованием специфических маркеров для определения раковых очагов, их агрессивности, деятельности и типа клеток. Это лабораторный микроскопический метод исследования, требующий применения антител к раковым антигенам, концентрация которых повышается в случае активного злокачественного процесса.
Выявляют следующие факторы, выявляющиеся ИГХ анализом:
- Her-2-neu — в нормальных клетках этот белок контролирует процесс деления, поэтому при карциноме его концентрация значительно возрастает.
- Ki 67 при раке молочной железы является главным веществом, отображающие процессы пролиферации в клетках. Опухолевая ткань развивается неконтролируемо, что можно увидеть по концентрации КИ 67.
- VEGF — фактор, отвечающий за развитие кровеносной сети. Злокачественное перерождение характеризуется формированием новых капилляров, что отображается на изменении этого показателя.
- Определение чувствительности клеток к женским половым гормонам — имеет важное значение в лечении карциномы молочной железы.
В журнале «Современная онкология» 2017 года опубликованы сведения о полном излечении рака груди антиэстрогенными препаратами при наличии на поверхности атипических тканей специфических рецепторов к гормонам.
Иммуногистохимический анализ показан в следующих случаях:
- подозрение на рак молочной железы;
- определение стадии злокачественного процесса;
- выявление локализации карциномы;
- постановка степени распространения опухолевых очагов;
- определение разновидности патологического образования;
- установление глубины атипии и уровень дифференциации;
- выбор метода лечения;
- мониторинг эффективности противораковой терапии.
Вернуться к оглавлению
Иммуногистохимическое обследование не имеет особенных ограничений перед проведением. Необходимый материал для анализа — частичка патологической ткани. Ее берут во время тонкоигольной биопсии из предполагаемого места опухоли. При невозможности это сделать, забор осуществляют непосредственно при выполнении операции по резекции молочной железы или карциномы в границах здоровых тканей. Ткань помещают в стерильную емкость.
Иммуногистохимия выполняется с придерживанием четких шагов, чтобы свести к минимуму вероятность ошибочных результатов. Главное, что должен сделать врач-лаборант — выделить ту ткань, где есть раковые компоненты. Анализ состоит из следующих этапов:
При проведении исследования необходимо отделить часть ткани с раковыми клетками, которые и будут подвергаться анализу.
- При попадании материала в лабораторию, его помещают в раствор формалина для обезжиривания.
- Далее обрабатывают жидким парафином, что дает возможность оценить изменения каждого участка и выбрать те, к которым будут применены специфические маркеры.
- Выборку разделяют на одинаковые участки в зависимости от количества применяемых реактивов.
- Делают срезы толщиной 1 мм и фиксируют на стекле.
- Проводят окрашивание материала.
- В каждый участок добавляют необходимые реактивы.
Длительность проведения иммуногистохимического исследования составляет 10—14 дней. Чем больше факторов необходимо, тем дольше выполняется анализ. Ki67 при раке молочной железы очень чувствительный, поэтому требует аккуратного и тщательного подхода. Определение этого показателя имеет наиболее важное значение для дальнейшего лечения и прогноза, потому рекомендуется его делать несколько раз на протяжении применения противораковой терапии.
Фактор Her-2-neu в иммуногистохимическом обследовании здорового пациента определяется, как «отрицательный». Это значит, что в тканях молочной железы отсутствует патологическое неконтролируемое деление. Такой результат имеет благоприятный прогноз, поскольку если он определяется впервые — раковый процесс отсутствует. Определение «отрицательного» Her-2 в процессе лечения обозначает прекращение размножения опухолевых тканей и остановку прогрессирования карциномы.
Показатели Ki 67 в нормальных условиях равны нулю, при отклонении от нормы необходимо назначить дополнительное обследование.
Расшифровка нормы Ki 67 включает его полное отсутствие. Появление его в молочной железе даже в незначительной концентрации требует дополнительного обследования для подтверждения или опровержения диагноза рака. VEGF в норме составляет до 200 нмоль/л. Определение чувствительности к эстрогенам выполняется в случае подтверждения рака молочной железы.
Доктор-онколог Н. А. Савелов в своем докладе описывает основные проблемы диагностики при ИГХ рака молочной железы и предлагает методы их устранения (https://www.youtube.com/watch?time_continue=1188&v=zrxNYaQquMI)
Индекс изменения фактора Ki 67 определяется следующим: