Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы (ИГХ) – лабораторный способ изучения тканей, полученных с помощью биопсии. Методика иммуногистохимии применяется чтобы:
определить характер и тип патологии;
выявить чувствительность, а также устойчивость клеток опухоли к тем или иным вариантам химиотерапии или радиотерапии;
обнаружить источник рака, если имеются метастазы неясного генеза;
установить степень распространения ракового процесса;
узнать гистогенетическое происхождение заболевания;
оценить успешность проведённого лечения;
диагностировать пролиферацию новообразования;
определить нозологический вариант раковой опухоли.
Противопоказаний процедура ИГХ практически не имеет. Проблемы с проведением анализа возникают лишь при невозможности забора образцов повреждённых клеток по причине труднодоступной локализации онкообразования.
Для проведения иммуногистохимического исследования нужна поражённая опухолью ткань. Обычно ее получают при выполнении биопсии или после проведения операции. Взятый образец помещают в формалин и отправляют в лабораторию. Там его обезжиривают, заливают специальным парафином. Потом выполняют микротомирование – делают тонкие срезы до 1 мкм с парафиновых блоков. Их раскладывают на специальных стёклах. Лишь потом начинают процедуру.
Выполняется окрашивание исследуемого материала определёнными реактивами в необходимой концентрации. Для анализа может применяться малая панель – с набором из 5 разновидностей антител или большая панель – насчитывающая от 6 типов маркеров.
От количества HER2 рецепторов зависит цветовая комбинация реактивов с опухолевыми клетками. Чем их больше имеется в исследуемом образце, тем интенсивнее окраска. Результаты анализа ИГХ обычно готовы в течение 1-2 недель. Точность иммуногистохимии зависит от субъективного восприятия результатов гистологом.
Иммуногистохимия отображает концентрацию HER2-белка (рецептора человеческого эпидермального фактора роста) в патологическом образце. Благодаря ему в здоровом организме контролируется нормальный процесс деления и самовосстановления клеток.
Почти у 25 % женщин с карциномой молочной железы рецептор человеческого эпидермального фактора роста производит чрезмерное количество HER2. Потом клетки начинают неконтролируемо расти и делиться. Итоги иммуногистохимического исследования HER2 статуса при карциноме грудной клетки интерпретируют в зависимости от интенсивности окраски по специальной шкале:
0-1+ обозначает, что HER2-белок обнаружен в нормальном количестве и раковая опухоль негативная (75% ситуаций). Необходимости на этом этапе заболевания в медикаментозных препаратах нет;
2+ подтверждает среднюю концентрацию HER2-белка в исследуемом материале и наличие отрицательной карциномы груди;
3+ сигнализирует, что фиксируется превышение выработки HER2-белка, а онкологическое образование положительное (25%).
HER2 позитивный рак груди характеризуется агрессивным вариантом течения. Опухоль увеличивается намного быстрее, чем при HER2 негативной карциноме. В 30% случаев HER2-положительный вариант с течением времени преобразовывается в HER2 — отрицательный.
Если после исследования подтверждается положительный HER2, то доктор может назначить лечение препаратами Лапатаниб и Герцептин. Эти медикаменты используются лишь при позитивной форме HER2. Они прикрепляются к белку HER2, не позволяют ему достичь злокачественных клеток и стимулировать их рост. Не рекомендуется применение Лапатаниба и Герцептина для лечения негативной карциномы груди.
Если опухоль оценена на 2+, то желательно провести ещё один анализ. Полученный результат не всегда правдиво обозначает превышение показателей HER2-белка. Для уточнения информации дополнительно выполняют тест FISH. Он показывает уровень HER2-белка в каждой клетке и отвечает за его перепроизводство. FISH-тест бывает либо положительный (нормальное количество HER2) либо отрицательный (амплификация генов).
При выполнении ИГХ учитывается также процентное соотношение Ki-67, характеризующее злокачественность ракового процесса. Если при диагностированной карциноме груди Ki-67 – 15%, то прогноз, скорее всего, будет благоприятным. Если Ki-67 достигает 30% и более, то опухоль считается высокоагрессивной.
Только специалист должен ставить точный диагноз на основании результатов расшифровки иммуногистохимии и при необходимости, итогов других анализов.
Иммуногистохимическое исследование – эффективная, высокоинформативная и достаточно новая методика дифференциального диагностирования онкологических опухолей, которая помогает определить её гистогенез на клеточном уровне.
источник
Рак молочной железы – основная причина смертности среди женщин, которые имеют злокачественные опухоли. Благодаря новейшим тенденциям в области диагностики возможно определение на ранних стадиях эволюции атипичных клеток. Особым методом является ИГХ при раке молочной железы. Анализ заключается в изучении иммуногистохимических реакций. Совершенно новая и эффективная методика позволяет определить тип тканей, сенсибилизацию клеток к проводимой лучевой терапии, а также выявляет причину появления метастазов при помощи гистологии. Без ИГХ невозможно продуктивное лечение заболевания.
На своей поверхности раковые клетки имеют молекулы-антигены, являющиеся белками, или другие макромолекулы. Продуцируя антигены, атипичные клетки вызывают ответную иммунную реакцию – выработку антител. Взаимосвязанность между белками рака и антителами обнаруживается при помощи иммуногистохимии. Такая восприимчивость позволяет проводить иммунолечение рака.
Чтобы выбрать эффективные методы лечения, процедура определения раковых элементов необходима как для врача, так и для пациента. ИГХ исследования проводят для многих критериев.
Выраженность экспрессии определяется рецепторами прогестерона и эстрогена.
Определение прогноза.
Определение атипической модификации клеток.
Установление структурно-функциональных связей в раковых клетках.
Осуществление гистогенетической классификации и проб тканей.
Распознавание рецептора HER2 и его амплификация при РМЖ.
Устанавливание местонахождения первичной опухоли по метастазу.
Невосприимчивость и отзывчивость на введение химиотерапевтических лекарственных средств.
Сенситивность к методу лучевой терапии.
Скорость роста местастазированных тканей.
Определение процентного соотношения маркера HER2 позволяет установить как быстро метастазирует опухоль. Зачастую подобная экспрессия антигена имеет отрицательный прогноз и непродолжительное существование, причем заболевание чаще наблюдается у женщин в репродуктивном периоде.
Число рецепторов гормонов-стероидов в большом количестве дает шанс на выздоровление, если существовала возможность определить диагноз на ранних стадиях. Расшифровываться результаты показателей иммунногистологии должны врачом-онкологом. Иммуногистологический метод показан женщинам в любом возрасте при сомнительных результатах на исключение рака. Положительные отзывы в лечении на первых стадиях определяют более быстрое восстановление и даже полное излечение.
Также исследование ИГХ целесообразно проходить при заболеваниях женских репродуктивных органов, наличии бесплодия. Забор эндометрических клеток позволяет зафиксировать факт невозможности зачатия. ИГХ определяет как отвечают рецепторы в матке на гормональные компоненты, что способствует выбору методов лечения.
Для процедуры ИГХ осуществляется биопсийный забор ткани. Также возможно получить ткань опухоли путем операции. Помещение образцов в формалиновую жидкость позволяет обезжирить ткани. После подобной подготовки материала тончайший срез клеток помещают в парафин, после чего микротомированием располагают на стеклах. Затем путем окраса при помощи реактивных компонентов, содержащих антитела, дифференцируют форму и нозологические параметры опухоли. В течение 10 дней, максимум двух недель лаборанты расшифровывают показатели.
Исполнение иммуногистохимии – сложный последовательный процесс в несколько этапов.
Вид ракового образования интерпретируется количеством атипических антител. Сосредоточение эстрогена и прогестерона в биоматериале говорит об эволюционировании опухолевого процесса, а также о появлении метастаз.
При средних критериях следует знать о медленном росте опухоли, что подтверждает положительное прогнозирование процесса.
Количество генов HER2 полностью оказывает влияние на цвет реактивных препаратов с наличием раковых клеток. Чем их число выше, тем интенсивнее тонирование. Расшифровка гистологических цветовых оттенков является более субъективной, так как оценивается разными специалистами по-разному ввиду восприятия цветовой гаммы.
Истолкование итогов ИГХ регламентируется по следующей микрограмме:
0-1 + содержание белкового элемента незначительное. Лечение не требуется.
2 + средняя процентная доля свидетельствует об отрицательности атипических клеток в груди при раковом процессе. Для более эффективного результата необходимо повторить методику. Или провести пробу FISH.
3 + превышение нормы говорит о наличии положительного злокачественного процесса.
При последнем критерии эволюция опухоли агрессивная, что означает более быстрый рост опухоли, чем при отрицательных значениях.
Также очень важны коэффициенты Ki67, которые определяют стадию развития рака железы. Поэтому рационально будет обследовать гормональный фон для установления поведения опухолевидного процесса. При повышенных цифрах необходима терапия химическими средствами и операция по экстирпации опухоли.
Не всегда ИГХ дает информативные результаты при подозрении или наличии онкологии, поэтому проводят гистологию рака молочной железы. Заключается она в микроскопии биопсийного материала, который показывает не только присутствие атипических клеток, но и первопричину происхождения рака. Процедура достаточно болезненная, но это не меняет ее значимость.
Данный способ проводит дифференциальную диагностику с доброкачественными образованиями, карциномой, фиброаденомой и другими гиперплазиями грудной железы.
По результатам обнаружения раковых клеток гистология устанавливает морфологию опухоли и ее разновидности. Выделяют следующие гистологические типы рака молочной железы:
Дольковый или лобулярный рак
Протоковый
Папиллярный
Медуллярный
Воспалительный
Коллоидный
Метапластический рак
Также различают инвазивный тип – при росте внутрь ткани, неивазивный – при росте в проток. Более подробные фото каждого типа можно увидеть на страницах интернет-ресурса.
Исследование при раке определяет продуктивность лечебных мероприятий. Применение большого количества маркеров для выявления строения атипий, формы, степени и других показателей ракового образования позволяет правильно назначать терапию:
Отрицательные значения ограничиваются приемом медикаментов.
Положительные нуждаются в химиотерапии.
Назначение ИГХ делает возможным диагностирование стадии, что обеспечивает правильность и благовременность назначенного лечения.
Для наиболее надежных и верных критериев женщинам с подозрением на раковое образование следует проходить маммографию, биопсийный забор тканей и другие виды вспомогательных тестов.
источник
Анализ ИГХ при раке молочной железы означает иммуногистохимическое исследование биоптатов пораженного участка груди. Этот метод исследования представляет собой сложные взаимодействия раковых антигенов с антителами. Необходимость выполнения обследования объясняется высокой информативностью и возможностью подобрать правильный метод терапии. Врачи рассказывают, как выполняется анализ и какие данные можно узнать.
Иммуногистохимический анализ выполняется с использованием специфических маркеров для определения раковых очагов, их агрессивности, деятельности и типа клеток. Это лабораторный микроскопический метод исследования, требующий применения антител к раковым антигенам, концентрация которых повышается в случае активного злокачественного процесса.
Выявляют следующие факторы, выявляющиеся ИГХ анализом:
Her-2-neu — в нормальных клетках этот белок контролирует процесс деления, поэтому при карциноме его концентрация значительно возрастает.
Ki 67 при раке молочной железы является главным веществом, отображающие процессы пролиферации в клетках. Опухолевая ткань развивается неконтролируемо, что можно увидеть по концентрации КИ 67.
VEGF — фактор, отвечающий за развитие кровеносной сети. Злокачественное перерождение характеризуется формированием новых капилляров, что отображается на изменении этого показателя.
Определение чувствительности клеток к женским половым гормонам — имеет важное значение в лечении карциномы молочной железы.
В журнале «Современная онкология» 2017 года опубликованы сведения о полном излечении рака груди антиэстрогенными препаратами при наличии на поверхности атипических тканей специфических рецепторов к гормонам.
Иммуногистохимический анализ показан в следующих случаях:
подозрение на рак молочной железы;
определение стадии злокачественного процесса;
выявление локализации карциномы;
постановка степени распространения опухолевых очагов;
определение разновидности патологического образования;
установление глубины атипии и уровень дифференциации;
выбор метода лечения;
мониторинг эффективности противораковой терапии.
Вернуться к оглавлению
Иммуногистохимическое обследование не имеет особенных ограничений перед проведением. Необходимый материал для анализа — частичка патологической ткани. Ее берут во время тонкоигольной биопсии из предполагаемого места опухоли. При невозможности это сделать, забор осуществляют непосредственно при выполнении операции по резекции молочной железы или карциномы в границах здоровых тканей. Ткань помещают в стерильную емкость.
Иммуногистохимия выполняется с придерживанием четких шагов, чтобы свести к минимуму вероятность ошибочных результатов. Главное, что должен сделать врач-лаборант — выделить ту ткань, где есть раковые компоненты. Анализ состоит из следующих этапов:
При проведении исследования необходимо отделить часть ткани с раковыми клетками, которые и будут подвергаться анализу.
При попадании материала в лабораторию, его помещают в раствор формалина для обезжиривания.
Далее обрабатывают жидким парафином, что дает возможность оценить изменения каждого участка и выбрать те, к которым будут применены специфические маркеры.
Выборку разделяют на одинаковые участки в зависимости от количества применяемых реактивов.
Длительность проведения иммуногистохимического исследования составляет 10—14 дней. Чем больше факторов необходимо, тем дольше выполняется анализ. Ki67 при раке молочной железы очень чувствительный, поэтому требует аккуратного и тщательного подхода. Определение этого показателя имеет наиболее важное значение для дальнейшего лечения и прогноза, потому рекомендуется его делать несколько раз на протяжении применения противораковой терапии.
Фактор Her-2-neu в иммуногистохимическом обследовании здорового пациента определяется, как «отрицательный». Это значит, что в тканях молочной железы отсутствует патологическое неконтролируемое деление. Такой результат имеет благоприятный прогноз, поскольку если он определяется впервые — раковый процесс отсутствует. Определение «отрицательного» Her-2 в процессе лечения обозначает прекращение размножения опухолевых тканей и остановку прогрессирования карциномы.
Показатели Ki 67 в нормальных условиях равны нулю, при отклонении от нормы необходимо назначить дополнительное обследование.
Расшифровка нормы Ki 67 включает его полное отсутствие. Появление его в молочной железе даже в незначительной концентрации требует дополнительного обследования для подтверждения или опровержения диагноза рака. VEGF в норме составляет до 200 нмоль/л. Определение чувствительности к эстрогенам выполняется в случае подтверждения рака молочной железы.
Доктор-онколог Н. А. Савелов в своем докладе описывает основные проблемы диагностики при ИГХ рака молочной железы и предлагает методы их устранения (https://www.youtube.com/watch?time_continue=1188&v=zrxNYaQquMI)
Индекс изменения фактора Ki 67 определяется следующим:
«Положительный» Her-2-neu иммуногистохимического обследования определяется в «+». 3 плюса означает подтверждение наличия опухоли в молочной железе, 2 — требует применения дополнительных методов диагностики для постановки диагноза. Показатель VEGF от 220 до 1060 нмоль/л говорит об активном кровоснабжении опухоли, сильно развитой капиллярной сети. Если рак не имеет рецепторов к эстрогену, это свидетельствует о значительной атипичности тканей и требует применения агрессивных методов терапии.
источник
Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы – это анализ, который позволяет определить чувствительность новообразования злокачественного характера к некоторым веществам. С его помощью диагностируют стадию патологии и узнают, правильно ли было назначено лечение.
Если говорить о том, что такое ИГХ онкологии, то это исследование, позволяющее выявить взаимодействие между белками и антигенами. Дело том, что клетки, пораженные онкологией, синтезируют белок. Он имеет связь с антителами. Учитывая это, специалисты с помощью анализа определяют форму и структуру опухоли.
ИГХ при раке молочной железы проводят с целью:
определения вида заболевания для назначения терапии;
раскрытия наличие метастаз, идущих от опухоли, и их границы;
обнаружения источника метастаз;
диагностирования стадии патологии при ее выявлении;
оценки эффективности терапии;
установления скорости развития метастаз при наличии таковых;
выявления чувствительности клеток крови к тем или иным препаратам и методам лечения, чтобы оставить эффективные средства и исключить те медикаменты и способы терапии, которые не влияют на опухоль.
Иммуногистохимия рака молочной железы проводится путем забора ткани, пораженной онкологией. Биоматериал добывается с помощью биопсии или в процессе оперативного вмешательства. После этого выполняется анализ по следующим этапам:
биоматериал помещается в формалин, после чего переправляется в лабораторию для проведения дальнейших манипуляций;
специалисты обезжиривают ткань;
в материал добавляется специальный жидкий парафин, который помогает выявить структуру клеток опухоли;
взятые образцы размещаются на специальных стеклах;
выполняется окрашивание материала с помощью реактивов;
образцы оставляют на 12 дней, после чего оценивают результат.
Для проведения анализа используют несколько видов маркеров. Если в ходе исследования в биоматериале обнаружена повышенная концентрация эстрогенов и прогестеронов, делают заключение о развитии опухоли. Это также говорит о появлении метастазов от новообразования. Если анализ показал средние результаты, то говорят о слабом росте опухоли. Это говорит о том, что больной после соответствующей терапии имеет все шансы на выздоровление.
Чисто рецепторов HER2 влияют на цветовую гамму реакторов с клетками, которые поражены раком. Чем их больше, тем ярче тон. В этом случае гистология проявляется себя, как неточная наука, поскольку восприятие оттенков образцов субъективное и зависит только от ощущений специалиста, выполняющего анализ.
При расшифровке результатов учитывают рецепторы к прогестерону – PR и эстрогену – ER. ИГХ в онкологии также показывает содержание рецептора человека эпидермального фактора роста (HER2-белка) в биоматериале, который взят как образец для проведения исследования. У женщин с карциномой молочной железы наблюдается повышенный HER2.
Расшифровка результатов по эстрогену и прогестерону – если в опухоли обнаружены рецепторы к мужским и женским гормонам, то рост образования происходит под их воздействием, если PR и ER в организме присутствуют в норме или их концентрация увеличена. При своевременном квалифицированном лечении пациент может рассчитывать на благоприятном исходе.
Расшифровка результатов ИГХ выполняется в зависимости от оттенка образцов по специальной шкале:
0-1+. Такой результат говорит о том, что концентрация белка не превышена. Терапия патологии не требуется.
2+. Значение указывается на среднюю концентрацию белка. Это говорит о наличии отрицательной опухоли (карциномы) груди. В этом случае рекомендуется выполнить еще один анализ, поскольку первое исследование не всегда дает точный результат. Для уточнения диагностики выполняют тест FISH. Такое исследование определяет концентрацию белка в каждой клетке. При нормальном содержании HER2 анализ покажет положительный результат, а при повышенном – отрицательный.
3+. Белок превышает нормальное значение. Диагностируется положительная опухоль груди.
Если анализ показал положительную опухоль, значит, патология имеет агрессивный характер развития. Она растет в несколько раз быстрее, чем при отрицательном значении.
После изучения исследования, расшифровывается результат, исходя из показателя маркера Ki67. Если его значение находится в пределах нормы, то есть 15-17%. При повышении его уровня до 35% опухоль начинает быстро расти. Замедлить процесс помогает химиотерапия. Если анализ показал 85%, врачи отказываются от лечения пациента, поскольку снизить маркер в таком случае невозможно и смертельного исхода не избежать.
люминальный А – рецепторы к ER положительные, к белку отрицательные, Ki67 менее 14%;
люминальный Б – рецепторы к ER, к HER2 – отрицательные, Ki67 более 15%;
Erb В2 сверхэкспрессирующий — PR и ER – отрицательный, белок – положительный;
Базальноподобный – отрицательное значение к прогестерону и остальным факторам.
Такие факторы демонстрируют возможное поведение опухоли на момент анализа. Лечение не оказывает влияние на исследование. Врач благодаря ИГХ видит, как ведет себя опухоль. Прогнозом специалист пользуется для определения подходящей терапии для каждого пациента.
Исследования ИГХ рака молочной железы позволяют определить эффективность лечения. Если анализ показал положительный рак, то назначают химиотерапию. При отрицательном значении – прием медикаментозных препаратов.
ИГХ – это исследование, которое позволяет определить вид рака молочной железы и назначить адекватное лечение, что позволяет спасти пациентке жизнь, а в некоторых случаях – избавиться от патологии.
источник
Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы: показания, подготовка к анализу, расшифровка ИХГ
Давайте для начала мы разберем, что же такое иммуногистохимическое исследование. Под ним подразумевается микроскопическое исследование ткани, которое основано на выявлении антител на патологические вещества.
Разделяют два метода исследования:
прямой (прямая реакция антител непосредственно на патологическое вещество);
непрямой метод (патологические вещества, распознаются с помощью вторичных антител).
ферменты — белковые молекулы, они же молекулы РНК. Так например: щелочная фосфатаза (фермент гидролаза);
флуоресцентные — тот же физический процесс, например — флуоресцеин — органическое соединение;
электроно-плотные частицы, к таким относится золото.
изучения и исследования секреторных процессов, в том числе синтетических;
распознавания гормонов рецепторов;
выявления различных типов, родов клеток по их свойствам.
В области исследования грудной железы данное исследование используется в качестве предварительной диагностики для установления точного диагноза, в том числе при злокачественных образованиях. Данное исследование дает возможность определить следующее:
Точное образование (доброкачественное или злокачественное) и назначение правильного лечения.
Точное месторасположение (наличие метастаз в организме и их дислокацию).
Первоначальный очаг заболевания.
Стадию заболевания (например, степень рака).
Пролиферацию клеток (распознать скорость размножения и развития раковых клеток).
Ответ раковых клеток на медикаменты, их чувствительность, также можно отследить чувствительность к химиотерапии, к лучевой терапии.
Исследование способно детально изучить заболевание, что дает возможность полностью диагностировать заболевание и подобрать правильное лечение. Это играет не маловажную роль в диагностике, лечении, продолжительности жизни онкологических больных. Также можно сказать, что с помощью данного метода можно:
Иммуногистохимия при раке молочной железы
на более раннем сроке диагностировать заболевание;
выяснить непосредственный очаг заболевания;
найти границы заболевания;
определить точное место образования;
определить точный вид новообразования;
определить точную стадию развития;
определить рост патологических клеток;
узнать реакцию на препараты (в частности, на гормоны, на лучевую терапию и так далее);
определить необходимость операции;
помогает точно оценить качество лечения.
В основном данная диагностика используется для изучения (исследования) любой ткани человеческого организма. Основа для проведения данного исследования — это любое новообразование, которое предполагает развитие рака. Также исследование проводится для изучения эндометрия:
при метастазах;
при бесплодии;
после неудачных попыток ЭКО;
при различных заболеваниях матки;
при различных видах патологий органов малого таза;
при постоянных невынашивания плода;
при заболевания эндометрия.
Исследование не имеет абсолютных противопоказаний. Препятствием для ИГХ может быть, только невозможность по каким либо причинам забора материла на исследование.
Данный вид исследования может проводится только в специализированных лабораториях, при этом врач должен иметь специальную квалификацию, пройти специальное обучение.
Забор проходит непосредственно пораженного участка кожи с помощью биопсии. Также забор материала может происходить во время хирургического вмешательства на молочной железе.
Потом полученный материал специально обрабатывается и консервируется. Для этого она заливается парафином. В таком виде, в парафине, материал может правильно храниться в течении многого времени.
Следующим этапом является микротомирование. Материал нарезают на тонкие пласты при помощи специального аппарата.
В дальнейшим нарезанные пласты окрашиваются с определенными антителами и все это изучается под микроскопом. В некоторых лабораториях изучается окрашенный материал на автоматическом приборе.
две-три неуспешных процедур ЭКО;
не первое (постоянное) невынашивание плода на ранних сроках;
бесплодие.
Во время исследования могут выявить такие заболевания как:
эндометрит,
гиперплазия,
неполную трансформацию эндометрия,
нарушение фаз развития
и другие заболевания.
Как показывает практика, именно заболевания, связанные с эндометрием на 73% являются причиной бесплодия.
Данное исследование проводится в определенный день менструального цикла, обычно на 5-7 день смотрят воспалительные процесса эндометрия, на 20-24 день цикла — оценивают секрецию, смотрят рецепторную функцию.
Для этого пациентке рекомендуют:
не принимать гормоны за неделю до анализа;
не принимать кровоостанавливающих препаратов;
правильная интимная гигиена.
Процедура происходит на гинекологическом кресле. Женщину обезболивают специальными препаратами и вводят зеркало. Делается санация половых органов. Вводится специальный прибор — система гистероскопа и проводится забор. Далее убирают прибор, проводя санацию органов.
Потом женщина находится под наблюдением врача до полного восстановление, примерно 1-2 часа.
Результаты примерно готовятся 3-5 дней. Оценить результаты может только специалист.
HER2neu или, по-другому говоря, человеческий рецептор эпидермального фактора роста. Несет ответственность за продукцию белка. При поражении раковых клеток усиливается беспорядочный рост.
Если результат пишется 1 (+), то это говорит о том, что избытка белка нет, следствие — нехорошее состоянии опухоли.
При 2 (++) обычно назначают повторное исследование.
При 3 (+++) рассматривают как положительную опухоль, которую обычно подвергают медикаментозному лечению.
ER uPR данный вид гормонов способствует стимуляции роста патологических тканий. Если данные показатели увеличены, то это говорит о правильном лечении, что опухоль реагирует на гормонотерапию. Следовательно, если данные показатели понижены, то можно говорить о неправильном подборе лекарств. Опухоль развивается дальше.
Ki — 67, по данному показателю оценивают стадию опухоли и её характеристики. Если результат дает повешенные цифры, то это говорит о быстром течении заболевания, наличии метастаз и, к сожалению, совсем не хороший прогноз. Данный результат отмечается в процентах. Так например:
11% — вполне хороший прогноз (выздоровление 93%);
21 % — говорят о нем как 50% на 50%, все зависит от организма человека;
все показатели за 30% — оценивают как тяжелая стадия — высокоагрессивная;
90% — неизлечимо, приводит к смерти.
Так же данный индекс способствует к определению выбора лечения.
Ген p53 — способствует предотвращению роста патологической ткани. Данный ген является барьером для заболевания. Для начала заболевания служит мутация гена, например, наследственность или нарушение белковой матрицы.
VEGF — обозначается белок, которой несет функцию контроля жизнедеятельности ткани при условии недостаточного кровообращения. Высокие показатели данного белка говорит о росте опухолевой ткани, в следствии «хорошего» питания ткани.
В основном выделяют 4 типа рака:
Люминальный А — при этом: к женским гормонам рецепторы положительны, к HER2- отрицательные, показатель ki- 65-13% меньше.
Люминальный В — при этом: к женским гормонам рецепторы положительны, к HER2- отрицательные, показатель ki- 65-15% меньше.
Erb — B2 — при этом: реакция рецепторов к прогестерону (эстрогену) отрицательная, к HER2- положительная.
Базальноподобный — отрицательный показатель по всем категориям.
Принято считать, что отвечают за саму опухоль — PD-1, PDL-1 и PDL-2. Но они могут присутствовать не во всех патологических тканях. Для точного определения и назначения правильной терапии всем пациенткам, которым непосредственно показана иммунотерапия проводится такое исследование, как экспрессия белков PD-1, PDL-1 и PDL-2.
Данное исследование проводят с помощью флуоресцентной гибридизации FISH. В результате наличия экспрессии иммунотерапия назначается такими препаратами, как: Ниволумаб, Атезолизумаб, Пембролизумаб.
Иммуногистохимическое исследование очень сложный анализ, в котором используются множественное количество онкомаркеров.
Стоимость исследования зависит от количества проверяемых факторов. Цена исследования начинается от 4 тысяч рублей и до 20 тысяч рублей.
источник
Онкологические заболевания грудных желез диагностируются у женщин довольно часто. Поэтому диагностические мероприятия, позволяющие обнаружить опасную опухоль, не теряют актуальность. Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы предназначено для определения восприимчивости злокачественных клеток к конкретным веществам. Посредством исследования выясняют, корректно ли осуществляемое лечение.
ИГХ при онкологических патологиях грудных желез осуществляют, чтобы:
установить вид заболевания, восприимчивый к определенной терапии;
выявить метастазы, пущенные опухолью, и степень их распространения;
найти источник метастазов;
установить стадию развития выявленной опухоли;
оценить действенность терапии;
узнать скорость распространения метастазов;
выявить чувствительность кровяных клеток к конкретным лекарственным веществам для отсеивания неэффективных медикаментов.
Диагностическое исследование применяется для определения состояния любой части человеческого организма. Назначают процедуру не только при раке грудных желез, но и при любых новообразованиях, предположительно являющихся злокачественными. Посредством ИГХ определяют состояние эндометрия при:
появлении метастазов;
патологиях матки;
бесплодии;
неудачных процедурах ЭКО;
болезнях органов тазовой области, имеющих разную этиологию;
не должна принимать гормональные лекарства (за неделю до взятия биоматериала);
не должна принимать медикаменты для остановки крови;
должна провести тщательные гигиенические процедуры.
Исследование проводят в конкретные дни менструального цикла:
на 5 – 7 день изучают патологические изменения эндометрия;
на 20 – 24 день оценивают секреторную и рецепторную деятельность.
Перед процедурой медик отмечает выбранную точку на груди пациентки. Также на анализ могут взять куски опухоли, вырезанные при хирургическом вмешательстве.
Далее диагностическое мероприятие проводится следующим путем:
Собранный биоматериал относят в лабораторию.
Опухолевые образцы опускают в емкость с формалином.
Биоматериал обезжиривают.
Вливают парафиновую жидкость, позволяющую определить структуру и вид опухолевых тканей.
Отрезают кусок опухоли толщиной 1 мм.
Кладут на лабораторное стекло.
В качестве красителей используют химические реагенты и антитела.
Итоги теста готовы спустя две недели.
Для обнаружения рака молочных желез берут разные маркеры. Если по итогам теста выявлено наличие в опухолевых тканях значительного количества женских половых гормонов, то опухоль активно развивается. Возможно даже, что уже пошли метастазы. Если скопление гормонов среднее, то злокачественные клетки размножаются неактивно. А значит, при грамотном и своевременном лечении у пациентки есть возможность восстановить здоровье.
Положительный итог гормонального лечения возможен, если маркер Ki-67 при злокачественной опухоли молочной железы не превышает 15 – 17%. Новообразование стремительно растет, если маркер достигает 35%. В этой ситуации незамедлительно осуществляется химиотерапия, позволяющая затормозить размножение злокачественных клеток. Если же маркер выше 85%, то проводить лечение уже поздно, смертельный исход неизбежен.
При повышенном ER и PR в опухолевых тканях можно говорить, что злокачественное образование растет под воздействием гормонов. Если концентрация ER и PR не выходит за пределы нормы или выходит незначительно, то пациентка может надеяться на успешное лечение.
Расшифровывают показатели ИГХ по специальной цветовой шкале, соотнося цвета на шкале с оттенками биоматериала.
0 и +1. Концентрация белка соответствует норме. Терапевтические мероприятия не нужны.
+2. Концентрация белка средняя. В грудной железе присутствует злокачественная опухоль. Обычно проводят дополнительное исследование, чтобы подтвердить верный результат первого теста. Дополнительное исследование называется FISH, позволяет узнать содержание белка в каждой клетке. Если HER-2 в норме, то FISH-тест даст положительный результат, если повышен, то отрицательный.
+3. Концентрация белка намного выше нормального значения. Однозначно в грудной железе присутствует злокачественное новообразование.
Если тест показал высокую концентрацию белка, то опухоль агрессивного типа, растет интенсивно.
По результатам ИГХ выделяют 4 вида рака груди:
А-люминальный – рецепторы ER положительны, рецепторы к белку отрицательны, Ki-67 ниже 14%;
Б-люминальный – рецепторы ER и HER-2 отрицательны, Ki-67 выше 15%;
сверхэкспрессирующий – рецепторы ER и PR отрицательны, рецепторы к белку положительны;
базальноподобный – все рецепторы отрицательны.
По ним определяют наиболее вероятное поведение новообразования на момент проведения теста. Нет влияния терапии на исследование. Тест позволяет определить агрессивность опухоли. Прогноз важен для подбора наиболее подходящих медикаментов и лечебных процедур.
ИГХ – сложный тест, при котором используют большое количество онкологических маркеров. Чем больше маркеров проверяют, тем выше стоимость исследования. Тест эффективен в определении вида онкологического заболевания, помогает назначить оптимальную терапию.
источник
Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование молочной железы дает возможность изучать образцы тканей, которые медики взяли во время биопсии. Информативная и новая методика, позволяющая определить формирование злокачественной опухоли, если у врачей есть подозрения. Многие женщины после 45 лет сталкиваются с раком молочных желез. Благодаря исследованиям медики могут определить тип и характер заболевания.
Раковые клетки производят определенные белки, у которых есть связь с антителами. ИГХ позволяет изучить взаимодействие между ними. Во время исследования используются стандартные антитела. Учитывая определенные изменения при взаимодействии клеток, медики определяют структуру и форму злокачественного новообразования.
Опухоль для человеческого организма является чужеродной. Во время борьбы с ней в теле пациента вырабатываются антитела. Иммуногистохимия помогает обнаружить раковые клетки, определяет их структуру и строение.
Для врачей подобное исследование важно тем, что по результатам они подбирают максимально эффективное лечение пациентам. При помощи ИГХ можно определить:
развитие опухолей;
рецепторы стероидных гормонов;
образование злокачественной опухоли, если первичные признаки очага отсутствуют;
формирование новообразования без классификации;
количество мембранного белка (HER2) в клетках молочной железы.
Результатами исследования занимается специалист онколог. Важно определить количество гормональных рецепторов в молочных железах. Чем больше показатели, тем опухоль спокойнее и медленнее растет. У пациента высокие шансы, чтобы полностью избавиться от рака на ранней стадии развития.
Иммуногистохимия (ИГХ) при раке молочной железы осуществляется методом забора небольшого количества тканей новообразования. Биопсия проводится в месте, где врачи предполагают формирование злокачественных клеток. Перед процедурой врач отмечает маркером место ее проведения на груди женщины.
На исследование берутся также отсеченные ткани опухоли, которые были получены после хирургического вмешательства. Дальше диагностика проводится следующим образом:
Полученный материал отправляют в лабораторию.
Ткани помещают в специальную емкость, где находится формалин.
Их обезжиривают.
Добавляют жидкий парафин, чтобы получить блоки и информацию о строении, структуре клеток, тканей.
Срезают слой, толщина которого составляет 1 мм.
Укладывают на специально подготовленное стекло.
Для окрашивания среза используются препараты и антитела ИГХ.
Результаты исследования специалисты получают через 12 дней.
Для определения рака молочной железы применяются различные маркеры. Если результаты исследования показывают присутствие в тканях большого количества гормонов (прогестерона и эстрогена), опухоль прогрессирует. В большинстве случаев присутствуют уже метастазы. Средняя концентрация гормонов указывает на то, что злокачественное новообразование слабо развивается. У пациента есть шансы пройти эффективное лечение медицинскими препаратами и добиться положительного результата.
Исход будет благоприятный после применения гормональных средств, если маркер Ki-67 при онкологии груди находится в пределах 15-17%. О стремительном развитии опухоли говорит показатель, достигающий 35%. Врачи в такой ситуации назначают больным только химиотерапевтические препараты, которые смогут приостановить ее прогрессирование. Если показатели превышают 85%, больному невозможно помочь и избежать летального исхода.
Иммуногистохимический метод анализа позволяет определить многочисленные факторы, связанные со злокачественным новообразованием. Речь идет:
о видах и подвидах раковой опухоли;
об источниках метастазирования;
о площади поражения, на которую распространились раковые клетки по всему организму больного;
об эффективности проводимого лечения пациентам с онкологией.
Исследования позволяют получить информацию, что касается стадии развития заболевания. Как быстро растет опухоль. Современные специалисты считают, что иммуногистохимический анализ является максимально информативным, если сравнивать его с другими привычными исследованиями при формировании рака молочных желез. Иногда врачам необходима именно гистология. В большинстве случаев проводятся оба анализа. Так специалисты получают больше информации о карциноме.
В медицине существуют информационные факторы. Они позволяют изучить поведение и реакцию опухоли на лечение.
Показывают возможное поведение злокачественного новообразования в момент проведения диагностики. Терапия не влияет на показатели. Специалист получает информацию о том, как быстро прогрессирует рак молочной железы. По результатам он может определить оптимальный метод лечения для каждого пациента индивидуально.
Изучение позволяет получить информацию о том, как раковые клетки отреагируют на выбранную методику терапии.
Прогностические и предсказывающие факторы могут быть систематизированы по отдельности. Но результаты исследования покажут схожие данные. При положительном раке молочной железы количество белка HER2 повышенное. Данные указывают на агрессивное протекание злокачественных процессов. В отдаленных органах присутствуют ранние метастазы.
Негативный результат свидетельствует о небольшом количестве мембранного белка в опухоли. Она не будет реагировать на применение медицинских препаратов во время лечения.
Иммуногистохимия позволяет изучить структуру взятого материала во время биопсии или после оперативного вмешательства. Присутствие определенных антител даст возможность специалистам установить вид злокачественного новообразования.
Интерпретацией и расшифровкой иммуногистохимического исследования занимается квалифицированный специалист – онколог. Врач должен подробно рассказать пациенту, на что указывает полученная информация. В результатах прописывается показатель Ki-67. Он показывает насколько агрессивная опухоль.
Во время исследований врачи изучают гормональный фон пациентки, который тесно связан с поведением злокачественного новообразования. Медики определяют площадь поражения патологическими процессами, скорость формирования метастаз.
Иммуногистохимический анализ – это такой метод диагностики, позволяющий определить стадию рака молочной железы, форму заболевания, а также степень распространения его. На основании полученных данных специалист назначает максимально подходящее лечение.
При стабильном гормональном фоне и неактивной опухоли женщине рекомендуют ограничиться приемом гормональных лекарств. Если рак молочной железы ведет себя агрессивно и активно развивается, показатель Ki-67 повышается. В данной ситуации врачи назначают больным более тяжелые химические препараты.
В здоровом организме клетки самостоятельно восстанавливаются и нормально делятся. Положительный анализ на присутствие мембранного белка (HER2) указывает, что рак прогрессирует. Злокачественная опухоль будет увеличиваться в объеме. Чтобы подавить ее распространение и рост специалисты назначают больным медикаментозную терапию.
Отрицательные результаты РМЖ с негативным показателем HER2 требуют применения более сильных химиотерапевтических препаратов. Лечение подбирает врач онколог, учитывая индивидуальные особенности пациента и протекание патологических процессов.
Иммуногистохимия представляет собой серьезный и сложный метод диагностики рака молочной железы. Медики во время исследований применяют многочисленные маркеры. Правильно расшифровать результаты может только квалифицированный доктор. В большинстве случаев при подтверждении развития рака у женщины, собирают целый врачебный консилиум. Мнение разных специалистов позволяет правильно и адекватно подобрать, также расписать тактику лечения злокачественной опухоли.
источник
Иногда результатов гистологии бывает недостаточно. Если не удается получить окончательный ответ и поставить диагноз или необходимо уточнение молекулярных параметров опухолевого образования назначается иммуногистохимическое исследование.
Метод иммуногистохимии используют как дополнительный. Он помогает выявить в биологическом материале специфичные белки, которые характерны для определенного вида клеток и, как следствие, отличить одну разновидность опухолевого образования от другой. Также исследование помогает выявить:
Маркеры иммуногистохимии, которые отвечают за чувствительность опухоли к воздействию лекарственных средств, лучевой терапии.
Метастатический характер происхождения образования и определить первичный источник поражения.
Гормоны и рецепторы к ним.
Малигнизацию клеток.
ИГХ как метод диагностики широко применяется в онкологии. Этот вид изучения тканей предполагает применение определенных реактивов. Они содержат в себе антитела или белковые соединения, которые помечены определенными веществами.
ВАЖНО! Антитела (иммуноглобулины, специфические белки) вырабатываются различными клетками организма и обеспечивают иммунитет, при внедрении антигена. Часто вырабатываются при попадании вирусов, бактерий, при онкологии, вакцинации, пересадке тканей, а иногда и против собственных клеток, что приводит к аутоиммунным патологиям. Получают их от различных животных.
При контакте с антигенами, которые могут содержаться в исследуемом биоптате, происходит специфическая реакция (антигенами являются межклеточные вещества ткани, компоненты клеточных структур). В результате нее можно судить о наличии или отсутствии того или иного вещества в тканях.
ВАЖНО! Антигены — генетически чужеродное тело, которое при попадании в организм вызывает иммунную реакцию, а именно выработку антител для подавления этого чужеродного агента. В случае с ИГХ-анализом антигенами выступают молекулы, которые вырабатываются патологически измененными опухолевыми клетками.
Структурная специфичность исследования — принципиально отличает ИГХ от других способов иммунологической диагностики, которые используют реакцию антиген-антитело. Т. е. специалисты оценивают помимо присутствия тех или иных веществ в тканях (при наличии или отсутствии окрашивания) и их количественный состав (по интенсивности окрашивания), еще пространственное распределение различных структурных элементов (цитоплазма, ядро, мембрана клетки и пр.) в тонком окрашенном срезе.
Реакцию можно получить несколькими способами. Часто применяется прямой, при котором используется один вид маркированных антител. Последние должны связаться с выявляемым веществом или молекулой-мишенью. Если последняя присутствует в биоптате, то исследуемая ткань окрашивается.
Непрямой метод считается более информативным и чувствительным. Его суть заключается в поэтапном введении 2 разных антител. Немаркированные первичные антитела вступают в реакцию с опухолевым антигеном в биоптате, образуют комплекс антитело-антиген. Затем вводят вторичные уже маркированные антитела (реагент), которые связываются с определенной частью молекулы первичного антитела. Т. е. первичные антитела являются антигенами для вторичных.
ИГХ назначается в том случае, когда обычного гистологического исследования недостаточно. Например, когда опухоль молочной железы имеет неспецифичное микроскопическое строение, не позволяющее поставить точный окончательный диагноз.
Биопсия с иммуногистохимией являются важной частью верификации диагноза при раке молочной железы, предстательной железы, мягких тканей и пр. Особенно актуально исследование для выявления лимфом, поскольку зачастую диагностировать эту болезнь без ИГХ невозможно. Большую роль ИГХ исследование играет в определении гистологического типа недифференцированных опухолевых образований, а также метастазов, которые имеют невыясненный первичный очаг.
Иммуногистохимия рака молочной железы полезна в прогнозировании течения опухолевого процесса и возможности таргентной терапии. Она помогает оценить:
функциональное состояние клеток образования;
злокачественный потенциал и темп роста опухоли;
тенденцию к метастазированию.
Чтобы провести исследование, необходимы образцы самой опухоли и близлежащих тканей. Их можно получить при биопсии или после хирургического вмешательства. Материалу необходимо пройти несколько этапов подготовки перед исследованием: фиксация, промывание, обезвоживание, погружение в парафин или заливка другим веществом.
Исследуемый биологический объект должен получиться плотным, но не хрупким. Сначала материал промывают, обезвоживают и уплотняют в спиртах возрастающей крепости. Затем его просветляют путем погружения в смесь абсолютного спирта и О-ксилола в пропорции 1:1. После этого помещают в несколько порций чистого О-ксилола. И только потом биологический объект пропитывают в парафине. Последний этап помогает законсервировать ткань и на долгое время сохранить ее структурные особенности в парафиновом блоке.
Затем лаборант производит с этих блоков срезы, при помощи специального прибора — микротома, толщиной до 1 мкм. Полученные срезы наклеивают на предметное стекло, которое смазано глицерином и смесью белка. Подсушивают.
Чтобы исследуемый материал вступил в реакцию с антителом, необходимо его обезжирить и удалить парафин. Процедура называется депарафинизация. Для ее проведения используют 3 порции О-ксилола, а также спирты нисходящей крепости.
Последний этап — окрашивание. Оно проводится для того, чтобы четко видеть структуру тканей под микроскопом. Лаборанты могут использовать огромное количество красителей. Условно их можно классифицировать по:
химическим свойствам, например, нейтральные, основные, кислые.
Чаще всего для этой процедур используют эозин, гематоксилин. Биологический материал помещают в раствор гематоксилина на несколько минут, затем промывают и дифференцируют результаты окрашивания. После этого провидится окрашивание в эозине, промывание и обезвоживание в спиртах восходящей крепости. Последовательная многоэтапная окраска позволяет на каждом этапе все больше определить нозологию и фенотип опухолевого образования. Патоморфолог изучает материл под микроскопом после каждого окрашивания. И только после оценки изменений и интерпретации полученной информации, назначает панель антител.
Чтобы получить точные данные о патологическом процессе и верифицировать заболевание лаборант приступает к обработке подготовленного образца специальными реактивами, содержащими меченые антитела. В результате происходит реакция между антителом и антигеном. Это сопровождается характерной визуализацией, которая зависит от веществ, используемых для маркировки.
Иммуногистохимия молочной железы — это сложный многоступенчатый анализ, на результат которого влияет множество факторов, например, низкое качество реагентов, недостаточная фиксация исследуемого биологического объекта или неправильно подобранная панель антител. Количество искомых клеток-мишеней исчисляется сотнями, поэтому специалист должен понимать, что он ищет и использовать для этого необходимые антитела.
Гистологи оценивают интенсивность окрашивания опухолевых клеток после взаимодействия с реактивами по специальной шкале:
0-1+ — онкологии нет;
2+ — онкологическое образование отрицательное;
3+ — онкологическое образование положительное.
Длительность ИГХ при раке молочной железы во многом зависит от способа его проведения. Бывает ручной и автоматический. Последний считается более совершенным, поскольку вероятность технической ошибки сведена к минимуму, да и проводится он гораздо быстрее.
Перед определением тактики лечения онколог задается различными вопросами: какова вероятность рецидива заболевания у больного или его смерти, какой результат лечения можно ожидать. Для этого специалист изучает особенности и характеристики опухоли и в зависимости от различных предсказывающих и прогностических факторов назначает тактику лечения.
К этим факторам относятся основополагающие признаки, которые определяют особенность протекания болезни и ее исход. При операбельных формах онкологии груди к таким факторам относятся: морфологическое строение новообразования и его размер, состояние лимфоузлов. Т. е. подобные характеристики определяют хронологию болезни.
Особенности прогностических факторов:
Базируются на биологических характеристиках опухолевого образования.
Взаимосвязаны с продолжительностью жизни пациента в независимости от тактики терапии.
Делят пациентов по степени риска смерти, рецидива.
Примеры: индекс митотической активности, протеолитические ферменты, антиогенез и др.
Индекс митотической активности (MAI) является независимым прогностическим фактором, который характеризует продолжительность жизни больных. У пациентов с индексом меньше 10 в процессе наблюдения летальный исход составлял 6 %, у пациентов с индексом больше 10 — 28 %.
Протеолитические ферменты имеют значение в процессе метастазирования. В трансформированных злокачественных клетках таких ферментов вырабатывается больше, чем в здоровых, поэтому при злокачественных образованиях наблюдается выход этих веществ в межклеточное пространство и увеличение активности. Т. е. ферменты вовлечены в процесс онкогенеза. Т. о. пациенты с низким уровнем этих ферментов имеют более благоприятный прогноз по безрецидивной выживаемости.
Способность новообразования расти и метастазировать во многом зависит от ангиогенеза — образования новых кровеносных сосудов. В процессе наблюдения пациентов в течение 10 лет, было выявлено, что у женщин с высоким значением плотности микрососудов в опухоли прогноз хуже.
Эти факторы предсказывают эффективность лечения. Они помогают выделить группу пациентов с более-менее значимым ответом на проводимую терапию. К примеру, опреелить эффективность гормональных препаратов, уровень рецепторов стероидных гормонов.
К клиническим факторам, которые помогают интерпретировать ответ на терапию при метастатической форме рака относятся:
Локализация и количественный показатель метастазов. Например, при поражении кости — прогноз относительно благоприятный; поражение кости, 2 органов, легких — менее благоприятный; при поражении больше 2 органов, наличии метастаз в печени, мозгу и пр. — неблагоприятный.
Временной интервал между лечением первичного новообразования и появления метастазов. Чем он продолжительнее, тем благоприятнее прогноз.
Общее состояние здоровья пациента.
Возрастная категория. Женщины в постменопаузе имеют больше шансов на благоприятный ответ на терапию.
Рецепторы стероидных гормонов в опухоли (гормононезависимые новообразования не реагируют на гормональное лечение).
Метастатический рак молочных желез считается хронической патологией. После полного регресса, полученного в результате химиотерапии, продолжительность жизни 5-10 лет встречается достаточно редко, примерно в 5-20 % случаев. Поэтому для лечения считается оптимальным вариантом — последовательное применение лечебных воздействий с как можно меньшей токсичностью, чтобы получить максимальный паллиативный эффект и отсрочить прогрессирование патологии, смерти.
Достоверность результатов ИГХ молочной железы достигает 99 %. Методика чувствительна и высокоспецифичная. Она помогает верифицировать патологический процесс и установить стадию заболевания. Для ее проведения необходимо минимум биоптата и реактивов, при этом она будет информативна даже спустя длительное время после взятия биопсии.
При проведении исследования необходимо отделить часть ткани с раковыми клетками, которые и будут подвергаться анализу. 
Показатели Ki 67 в нормальных условиях равны нулю, при отклонении от нормы необходимо назначить дополнительное обследование.
