Бактериологическое исследование молока на мастит

Секрет вымени коров, давших положительную реакцию с одним из быстрых маститных тестов, дополнительно исследуют бактериологически для выделения патогенной микрофлоры.

Для таких исследований отбирают пробы молока из четвертей вымени, реагирующих на быстрый маститный тест и дающих положительную пробу отстаивания. Исследуемое молоко отбирают в стерильные пробирки в количестве 10-15мл. Полученный материал в количестве 0,2 мл наносят на поверхность твердых питательных сред: Эндо, Левина, ЖСА (желточно-солевом агаре), Сабуро, 5%-ый кровяной агар; а также в жидкие питательные среды накопления: селенитовый бульон и сахарный бульон. Посев на поверхность твердых питательных сред проводят шпателем. Посевы на средах Эндо, Левина, 5 % -го кровяного агара, а также жидкие питательные среды накопления инкубируют в термостате при температуре 370С в течении 24 часов; посевы на ЖСА инкубируют в термостате при температуре 370С в течении 48 часов; посевы на среде Сабуро инкубируют в термостате при температуре 220С в течении 5 суток. Ежедневно все среды просматривают. Через 24 часа со сред накопления проводят пересев исследуемого материала, с помощью петли, на плотные питательные среды: с селенитового бульона — на среду Плоскирева и Висмут-сульфит-агар; с сахарного бульона — на 5% -ый кровяной агар, ЖСА, среду Эндо. Подозрительные (лактозонегативные) колонии (КОЕ — колонии образующие единицы) со сред Эндо, Левина, Плоскирева отсевают на дифференциально-диагностический скошенный агар Клиглера. Подсчитывают число выросших колоний (КОЕ) на плотных питательных средах. На ЖСА через 48 часов учитывают рост белых, кремовых, палевых, золотистых колоний (КОЕ), обладающих лецитиназной активностью и без нее. Отсевают на скошенный МПА, ставят пробы на плазмокоагуляцию и ферментацию маннита и пробу на окисление глицерина. С косяков агара Клиглера и МПА делают мазки с окраской по Граму и наблюдают: в одних случаях — грамотрицательные палочки средних размеров с закругленными концами, распологающиеся беспорядочно; в других случаях — грамположительные кокки мелких и средних размеров, располагающиеся гроздьями, поодиночке, попарно. В итоге определяют вид стафилококков. На 5% -ом кровяном агаре учитывают рост мелких колоний (КОЕ): белесых, бесцветных, сероватых, дающих зону альфа и бетта гемолиза и без нее. Отсевают на сектора 5% -го кровяного агара и изучают морфологию с окраской по Граму. В случае обнаружения грамположительных кокков мелких и средних размеров, распологающихся поодиночке, попарно, цепочками, беспорядочно, отсевают на МПА, обезжиренное молоко с метиленовым синим, желчный бульон, ЭДДС-агар. По изменению или наличию роста на данных средах определяют род и вид некоторых стрептококков.

Со среды Клиглера ставят пестрый биохимический ряд Гисса, изменение сред которого позволяет определить вид энтеробактерий.

ВСА (висмут — сульфит — агар) инкубируют в термостате при температуре 370 С в течении 48 часов, затем просматривают с целью обнаружения черных, сероватых, блестящих, округлых, маслянистых колоний (КОЕ), дающих вокруг себя зону с металлическим (ртутным) блеском среды. Подозрительные колонии отсевают на среду Клиглера. Ставят пестрый биохимический ряд Гисса. На среде Сабуро отбирают белые, крупные, плотные, сметанообразные колонии, с характерным кисловато-дрожжевым запахом. Данные колонии отсевают на МПА, окрашивают мазки по Граму. В случае обнаружения грамположительных крупных овальных клеток, располагающихся беспорядочно, либо почкуясь в виде веток, ставят пестрый биохимический ряд Гисса и посев на картофельный агар для определения филоментации и выделения вида грибов рода Candida.

Пробы отправляют в ветеринарную лабораторию, где их исследуют:

• 1) на чувствительность микрофлоры молока (секрета) к антибиотикам;
• 2) на наличие основных возбудителей мастита (патогенных стафилококков и агалактийного стрептококка).

источник

тРНК, впоследствии используется на образование пептидной связи в ходе синтеза белка.
Высокая специфичность аа-тРНК-синтетаз в связывании аминокислоты с соответствующими тРНК лежит в основе точности трансляции генетической информации. В активном центре этих ферментов есть 4 специфических участка для узнавания: аминокислоты, тРНК, АТФ и четвертый – для присоединения молекулы Н2О, которая участвует в гидролизе неправильных аминоациладенилатов. То есть, в активном центре этих ферментов существует корректирующий механизм, обеспечивающий немедленное удаление ошибочно присоединенного аминокислотного остатка.
Аминокислота, присоединяясь к тРНК, в дальнейшем не определяет специфических свойств аа-тРНК, её структуру не узнает ни рибосома, ни мРНК. И участие конкретной аминокислоты в синтезе белка зависит только от структуры тРНК, а точнее, от комплементарного взаимодействия антикодона аминоацил-тРНК с кодоном мРНК. Иными словами, молекулы тРНК в синтезе белка играют роль адапторов, т.е. приспособлений, при помощи которых аминокислоты включаются в определенном порядке в растущую полипептидную цепь.

Некоторые РНК-содержащие вирусы (вирус саркомы Рауса, ВИЧ) обладают уникальным ферментом – РНК-зависимой ДНК-полимеразой, часто называемой обратной транскриптазой или ревертазой. Этот фермент обладает время активностями. Первая из них – РНК-зависимая ДНК-полимеразная. Она обеспечивает синтез одноцепочечной комплементарной ДНК на матрице РНК. Вторая – рибонуклеазная активность, обеспечивающая удаление цепи РНК. Третья активность – ДНК-зависимая ДНК-полимеразная, обеспечивающая синтез второй цепи ДНК.
В результате образуется ДНК которая содержит гены, обуславливающие развитие рака (онкогены). Эта ДНК встраивается в геном эукариотической клетки, где может в течение многих поколений оставаться в скрытом состоянии. При определенных условиях такие гены могут активироваться и вызвать репликацию вируса, при других же условиях они могут способствовать перерождению такой клетки в раковую. Вирусы с таким механизмом размножения индуцируют развитие опухолей у животных и человека, поэтому их еще называют онкогенными вирусами (Рис.).

Удвоение ДНК у эукариот проходит в S-фазу клеточного цикла. Инициацию репликации регулируют специфические сигнальные белковые молекулы – факторы роста. Они связываются с рецепторами клеточных мембран, генерируя сигнал, который и побуждает клетку к началу репликации. Одними из первых активируются гены, кодирующие белки циклины. Циклинзависимые киназы, связывая циклин, переходят в активную форму и фосфорилируют специфические белки, которые регулируют синтез ферментов, обеспечивающих репликацию.
Синтез новых цепей ДНК может произойти только при расхождении родительских цепей. В точке начала репликаци (сайты инициации или ориджины) происходит локальное расхождение цепей ДНК и образуются две репликативные вилки, движущиеся в противоположных направлениях.
В образовании репликативной вилки принимает участие ряд белков и ферментов (Рис.):
· семейство ДНК-топоизомераз обеспечивает устранение суперспирализации.
· ДНК-хеликазы, используя энергию АТФ, осуществляют разрыв водородных связей между полинуклеотидными цепями и расплетают двойную спираль ДНК.
В поддержании этого участка ДНК в раскрученном состоянии участвуют ДНК-связывающие белки (ДСБ). Они связываются с одноцепочечной ДНК по всей длине разделившихся цепей, предотвращая их комплементарное взаимодействие.
Репликация ДНК осуществляется ДНК-зависимыми ДНК-полимеразами. Субстратами и одновременно источниками энергии для синтеза служат дАТФ, дГТФ, дЦТФ и дТТФ. Ферменты проявляют каталитическую активность только в присутствии предварительно раскрученной матричной двухцепочечной ДНК. Синтез цепей происходит в направлении 5¢®3¢ растущей цепи. Матричная цепь всегда считывается в направлении 3¢®5¢, т. е. синтезируемая цепь всегда антипараллельна матричной цепи. В ходе репликации образуются 2 дочерние цепи, представляющие собой копии матричных цепей.
В синтезе эукариотических ДНК принимают участие 5 ДНК-полимераз. ДНК-полимераза g обеспечивает репликацию только митохондриальной ДНК. ДНК-полимеразы a, b, d, e участвуют в синтезе ДНК в ядре клеток.
Инициирует репликацию ДНК-полимераза a. Фермент обладает сродством к определенному сайту одноцепочечной ДНК. Присоединяясь к нему, ДНК-полимераза синтезирует небольшой фрагмент РНК – праймер, состоящий из 8-10 рибонуклеотидов, к которому присоединяет еще около 50 дезоксирибонуклеотидов. Таким образом, ДНК-полимераза a синтезирует олигонуклеотид, состоящий из короткой последовательности РНК и фрагмента цепи ДНК.

источник

Для проведения исследования отбирают пробы молока от каждой четверти вымени коров, которые дали положительный результат по молоку из удоя и исследуют с 2% -ным раствором мастидина.

Если молоко из любой четверти вымени дает положительный результат, то животное считается подозрительной на субклинический мастит. Для подтверждения диагноза на скрытый мастит необходимо провести пробу отстаивания.

Проба отстаивания. Молоко из каждой четверти вымени положительно реагирующее, проверяют пробой отстаивания. При положительной пробе, корова считается больной маститом. В конце доения из каждой доли в пробирку берут 10-15 мл молока и ставят на 16-18 часов в холодное место (в холодильник, при температуре от +4 до 10 0 С), чтобы молоко не прокисло. Реакцию читают на второй день у источника света. Исследуют: цвет молока, наличие осадка, толщину и характер слоя сливок. Молоко от здоровой коровы белого или слегка синеватого цвета, осадок не образуется. Молоко от больной коровы — водянистое, консистенция сливок изменена (тягучие, слизистые, хлопьевидные). Главный признак — наличие осадка высотой 1 мм и более. Слой сливок толщиной более 1,5 см — нет мастита, слой менее 5 мм — есть мастит.

Коров с отрицательным результатом при постановке пробы отстаивания проверяют повторно при помощи вышеуказанных диагностических тестов не позднее чем через 6 дней после первой проверки.

Секрет вымени коров, давших положительную реакцию с одним из быстрых маститных тестов, дополнительно исследуют бактериологически для выделения патогенной микрофлоры.

Для таких исследований отбирают пробы молока из четвертей вымени, реагирующих на быстрый маститный тест и дающих положительную пробу отстаивания. Исследуемое молоко отбирают в стерильные пробирки в количестве 10-15мл. Полученный материал в количестве 0,2 мл наносят на поверхность твердых питательных сред: Эндо, Левина, ЖСА (желточно-солевом агаре), Сабуро, 5 % -ый кровяной агар; а также в жидкие питательные среды накопления: селенитовый бульон и сахарный бульон. Посев на поверхность твердых питательных сред проводят шпателем. Посевы на средах Эндо, Левина, 5 % -го кровяного агара, а также жидкие питательные среды накопления инкубируют в термостате при температуре 37 0 С в течении 24 часов; посевы на ЖСА инкубируют в термостате при температуре 37 0 С в течении 48 часов; посевы на среде Сабуро инкубируют в термостате при температуре 22 0 С в течении 5 суток. Ежедневно все среды просматривают. Через 24 часа со сред накопления проводят пересев исследуемого материала, с помощью петли, на плотные питательные среды: с селенитового бульона — на среду Плоскирева и Висмут-сульфит-агар; с сахарного бульона — на 5% -ый кровяной агар, ЖСА, среду Эндо. Подозрительные (лактозонегативные) колонии (КОЕ — колонии образующие единицы) со сред Эндо, Левина, Плоскирева отсевают на дифференциально-диагностический скошенный агар Клиглера. Подсчитывают число выросших колоний (КОЕ) на плотных питательных средах. На ЖСА через 48 часов учитывают рост белых, кремовых, палевых, золотистых колоний (КОЕ), обладающих лецитиназной активностью и без нее. Отсевают на скошенный МПА, ставят пробы на плазмокоагуляцию и ферментацию маннита и пробу на окисление глицерина. С косяков агара Клиглера и МПА делают мазки с окраской по Граму и наблюдают: в одних случаях — грамотрицательные палочки средних размеров с закругленными концами, распологающиеся беспорядочно; в других случаях — грамположительные кокки мелких и средних размеров, располагающиеся гроздьями, поодиночке, попарно. В итоге определяют вид стафилококков. На 5% -ом кровяном агаре учитывают рост мелких колоний (КОЕ): белесых, бесцветных, сероватых, дающих зону альфа и бетта гемолиза и без нее. Отсевают на сектора 5% -го кровяного агара и изучают морфологию с окраской по Граму. В случае обнаружения грамположительных кокков мелких и средних размеров, распологающихся поодиночке, попарно, цепочками, беспорядочно, отсевают на МПА, обезжиренное молоко с метиленовым синим, желчный бульон, ЭДДС-агар. По изменению или наличию роста на данных средах определяют род и вид некоторых стрептококков.

Со среды Клиглера ставят пестрый биохимический ряд Гисса, изменение сред которого позволяет определить вид энтеробактерий.

ВСА (висмут — сульфит — агар) инкубируют в термостате при температуре 37 0 С в течении 48 часов, затем просматривают с целью обнаружения черных, сероватых, блестящих, округлых, маслянистых колоний (КОЕ), дающих вокруг себя зону с металлическим (ртутным) блеском среды. Подозрительные колонии отсевают на среду Клиглера. Ставят пестрый биохимический ряд Гисса. На среде Сабуро отбирают белые, крупные, плотные, сметанообразные колонии, с характерным кисловато-дрожжевым запахом. Данные колонии отсевают на МПА, окрашивают мазки по Граму. В случае обнаружения грамположительных крупных овальных клеток, располагающихся беспорядочно, либо почкуясь в виде веток, ставят пестрый биохимический ряд Гисса и посев на картофельный агар для определения филоментации и выделения вида грибов рода Candida.

Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам

Чувствительность выделенных микроорганизмов к антибиотикам определяют методом диффузии (метод дисков).

В стерильные чашки Петри наливают по 20 мл расплавленной агаравой среды. На поверхность застывшей среды наносят 1мл бактериальной взвеси испытуемой культуры. Покачиванием чашки жидкость равномерно распределяют по всей поверхности среды, избыток жидкости отсасывают. Среду можно засевать непосредственно молоком, и растирать равномерно по всей поверхности шпателем. Среду подсушивают в течении 30 минут при t=37 0 С. На поверхность засеянной среды накладывают диски с антибиотиками (не класть два сцепленных между собой диска). Диски раскладывают на равном расстоянии один от другого и на 2 см от края чашки. В каждой чашке можно проверить действие 4-5 антибиотиков. Чашки с дисками выдерживают при комнатной температуре и затем в течении 16-18 часов при t=37 0 С. чашки рекомендуется ставить в термостат в перевёрнутом виде или вкладывать под крышку чашки кружок фильтровальной бумаги. При оценке результатов с помощью линейки или измерителя и миллиметровой бумаги определяют диаметр зон задержки роста микробов вокруг бумажных дисков (включая и диаметр самого бумажного диска).

Хранить готовые диски следует при комнатной температуре. Концентрации антибиотиков подбирают таким образом, чтобы диаметр зон задержки роста чувствительных тест-микробов равнялся для всех антибиотиков 28-32 мм.

Таблица 3. Чувствительность антибиотиков к выделенным с молоком микроорганизмам

Задержка роста при посеве на чашках

Величина рН молока с антибиотиками после выдерживании в термостате

источник

Методические рекомендации по микробиологическому исследованию молока и секрета вымени коров для диагностики мастита

Купить бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Цена на этот документ пока неизвестна. Нажмите кнопку «Купить» и сделайте заказ, и мы пришлем вам цену.

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО «ЦНТИ Нормоконтроль».

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

• Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
• Курьерская доставка (7 дней)
• Самовывоз из московского офиса
• Почта РФ

Методические указания предназначены для научно-исследовательских учреждений, ветеринарных лабораторий, занимающихся вопросами диагностики и лечения маститов.

Методические указания включают методы исследования молока и секрета вымени коров при диагностике мастита и содержат современные, доступные для практического использования микробиологические методики с подробным изложением рецептов питательных сред.

2.1. Правила отбора и доставки проб молока

2.3. Методы исследования молока (секрета вымени) коров на наличие возбудителей мастита

Приложение Рецепты питательных сред

Чтобы бесплатно скачать этот документ в формате PDF, поддержите наш сайт и нажмите кнопку:

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК

ПО МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОМУ ИССЛЕДОВАНИЮ МОЛОКА И СЕКРЕТА ВЫМЕНИ КОРОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ МАСТИТА

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК

ПО МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОМУ ИССЛЕДОВАНИЮ МОЛОКА И СЕКРЕТА ВЫМЕНИ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ МАСТИТА

проб молока готовят разведения 1:100 в стерильном физиологическом растворе.

В чашку Петри с кровяным новокаиновым или ДНК-новокаиновым агаром (рец. 4,5) вносят 0,1 см 3 молока из разведения 1:100 и равномерно рассевают его стеклянным шпателем по всей поверхности питательной среды.

Засеянные чашки помещают в термостат крышками вниз и инкубируют при 37±1°С в течение 22-24 ч. На ДНК-новокаиновом агаре золотистый стафилококк растет в виде крупных круглых колоний с ровными краями, на новокаиновом кровяном агаре — вокруг колонии выражена зона гемолиза. Чашки с ДНК-новокаиновым агаром заливают I V раствором соляной кислоты, затем просматривают в проходящем свете. Обнаружение колоний, окруженных зоной просветления с четкими границами, или зоной гемолиза (на кровяном агаре), указывает на наличие в исследуемом материале золотистого стафилококка .

Для определения количества золотистого стафилококка в I см 3 исследуемого материала подсчитывают колонии с зонами просветления по всей поверхности среды и полученное число колоний умножают на 10 (объем посевного материала 0,1 см 3 ) и на степень разведения материала.

Например: высеяно 0,1 см 8 молока из разведения 1:100.

В результате подсчета получено 15 колоний. Следовательно, в I см 3 молока — 15000 микробных клеток золотистого стафилококка (15x10x100).

Стафилококки вида s. aureus , обладающие гемолитической активностью, плазмокоагулирующими свойствами или ДНК-азной активностью и разлагающие маннит в анаэробных условиях, относят к возбудителям мастита. В молоке коров, больных маститом, на и-

более часто содержатся стафилококки видов s, aureus, s hemo-lytic-us, s. epidermidis , Стафилококк вида S. saprophiticus является возбудителем мастита и может быть обнаружен в молоке как здоровых, так и больных коров вследствие его контаминации.

2.3.5ЛЗ. Фаготипироваиие стафилококка

В случае необходимости определения источника стафилококковой инфекции проводят фаготипироваиие культур стафилококков, выделенных из молока и секрета вымени коров, используя набор-стафилококковых бактериофагов животного происхождения, выпускаемый Научно-исследовательским институтом эпидемиологии и микробиологии им.Н.Ф.Гамалеи. Фаготипированию подлежат культуры стафилококков, вызывающие гемолиз эритроцитов крупного рогатого скота и свертывание плазмы крови кролика.

Содержащиеся во флаконах лиофильно высушенные фаги в объеме 0,1 см 3 ресуспендируют в I см 3 МПБ (с 0,4# глюкозы иЧ),4 хлористого кальция (CaCI^), получая основное разведение 10”* (1:10). Из основного разведения фага готовят два рабочих разведения, соответствующие I тест-разведению (ТР) и 100 ТР. Разведение, соответствующее одному ТР, указано на этикетке.

Основное разведение фагов 10”* хранят при температуре 4°С и используют в течение 1,5-2 месяцев. Разведение фага, соответствующее I ТР, следует готовить заново через каждые 7 суток из основного разведения 10”*.

Суточную агаровую культуру испытуемого штамма стафилококка засевают в 2,5 см 3 бульона Хоттингера, Мартена или мясо-пептои-ного бульона (pH 7,2-7,4) и выращивают 3-5 ч при 37±1°С (до заметного помутнения среды). Одновременно готовят чашки с 1,2%-ныи агаром Хоттингера, содержащего 200 мг% аминного азота; 0,45%

глюкозы и 0,02% хлористого кальция. Хлористый кальций добавляют в ореад, охлажденную до 45°, перед разливом в чашки (рец. № 9).

В чашки Петри разливают по 15 см э расплавленного агара и после застывания ее подсушивают 30-40 мин при 37£l°C. Выросшую трехчасовую бульонную культуру стафилококка вносят пастеровской пипеткой в чашки и орошают поверхность агара. Избыток культуры отсасывают пастеровской пипеткой и удаляют, после чего агар вновь подсушивают 40-60 мин при 37jtI°C.

Дно засеянной чашки расчерчивают карандашом по стеклу на квадраты по трафарету соответственно числу используемых фагов.

В каждый квадрат засеянной среды пастеровской пипеткой с тонко оттянутым концом или стандартной петлей наносят каплю соответствующего фага. Один квадрат оставляют для контроля без фага. После нанесения каждого фага петлю обжигают, пастеровскую пипетку утилизируют. После подсыхания капель фага чашки переворачивают дном кверху и инкубируют 5-6 ч при температуре 37j;I 0 C, а затем оставляют на 18-20 ч при комнатной температуре. Нанесение фагов на агар в чашки может быть проведено специальным аппаратом для фаготипирования стафилококков, который имеет 25 металлических стержней, вмонтированных в квадратную пластину, соединенную с поршнем. Основанием прибора служит площадка из органического стекла, на которой находится свободно передвигающаяся вторая площадка с гнездом для фиксирования засеваемой чашки и пластинки из фторопласта с резервуаром для фагов. В резервуары стерильной фторопластовой пластинки, помещенной в стерильную чашку Петри, наливают по 3-5 капель фагов (всегда в одном порядке). Чашку с агаром и пластинку с фагами помещают на подвижную пластинку. Поочередным передвижением площадки устанавливают под металлическими стержнями сначала пластинку с фагами, а затем чашку с агаром. Опуская и поднимая стержни о помощью пор-

шня, переносят капли фагов на чашку с агаром, едва касаясь его поверхности* Чашки меняют в зависимости от числа типируемых культур. Чашки с фагами оставляют на столе на 30-40 мин и затем их орошают четырехчасовой бульонной культурой стафилококков* После подсыхания культур чашки переворачивают крышкой вниз, инкубируют 5-6 ч при 37±1°С, а затем оставляют на 18-20 ч при комнатной температуре.

Для фаготипирования штаммов стафилококков вначале используют первое рабочее разведение, соответствующим I ТР. Культуры стафилококков, которые не лизировались хотя бы одним фагом, ти-пируют повторно аналогичными фагами в разведении 100 ТР.

Учет и регистрация результатов

Степень лизиса культуры разными разведениями фага регистрируют по следующей схеме: (++++) — сливной полный лизис, (+++) -неполный сливной лизис (незначительный рост культуры в зоне лизиса), (++) — наличие в месте нанесения капли фага свыше 50 пятен лизиса (колоний фага), (+) — от 20 до 50 пятен лизиса,

(±) “ менее 20, (-) — полное отсутствие лизиса. Для упрощения схемы учета степени лизиса обозначения ++++, +++, ++ и называемые «сильной реакцией», можно регистрировать одним обозначением ++*

Одна и та же культура стафилококка чаще лизируется не одним, а несколькими фагами, что создает для каждого штамма характерную фагомозаику.

Штаммы считают типируемыми, если хотя бы один фаг вызвал реакцию с оценкой не менее ++. Если при типировании культуры фагом в разведении I ТР получена слабая реакция с оценкой + или it то такой штамм типируют повторно фагом в разведении ТОО ТР. Результаты фаготипирования культур регистрируют в виде таблицы, указывая название штамма стафилококка, номера ш разведения фагов, с помощью которых был получен лизис культуры (I ТР или

Если культуры стафилококка лизируются одними и теми жо фагами и составляют одну мозаику, их следует считать идентичными.

В тех случаях, когда мозаика различается на 1,2 и более сильных реакций, следует исходить из следующего правила: если штаммы стафилококков при типировании в один и тот же день отличаются сильной реакцией по одному фагу, их следует считать идентичными, если разница составляет по двум и более фагам, штаммы следует признать разными.

Учет результатов проводится в соответствии с «Методическими указаниями по применению бактериофагов» (утв.Минздравом СССР II.04.1976 г.» согласовано с ГУБ МСХ СССР 16.09.1976 г.).

2.3.6. Выделение и идентификация стрептококков

2.3.6.1. Для выделения стрептококков из молока используют кровяной агар (рец. № I) или одну из следующих элективных сред-среду-Карташовой жидкую (рец. № 10), среду Карташовой плотную (рец. № II), среду Эдвардса (рец. №> 12).

На кровяном агаре стрептококки растут в виде мелких росии-чатых или мелких непрозрачных колоний с небольшой зеленоватобурой полупрозрачной зоной гемолиза или без гемолиза. В тонком слое 5-7]&-ного кровяного агара зона гемолиза выражена более четко и может быть абсолютно прозрачной.

При росте стрептококков в жидкой среде Карташовой цвет среды за счот ферментации лактозы переходит из синего в зеленый -На дне и по стенкам пробирки образуется крошковидный осадок, бульон остается прозрачным или наблюдается слабое его помутнение. При использовании плотной среды на фоне синего агара вырастают мелкие прозрачные колонии jp -формы, вокруг которых среда окрашивается в зеленый цвет.

На среде Эдвардса стрептококки растут в виде мелких (1-2 мм в диаметре) колоний бесцветные или серовато-синего цвета (рец.№ 12)*

2.3.6.2. В мазках из культур в жидких питательных средах стрептококки имеют вид цепочек различной длины, в мазках с плотных сред — стрептококки расположены попарно или в виде коротких цепочек*

Для дальнейшей дифференциации часть культуры пересевают на скошенный сывороточный агар.

2.3*6*3. Одним из характерных признаков стрептококков в отличие от стафилококков является отсутствие каталазной активности (каталазоотрицательные). Для определения каталазной активности выросшую на плотной среде культуру стрептококка снимают петлей и растирают в капле 10^-ной перекиси водорода (пергидроль разводят в соотношении 1:3) на предметном стекле. Выделение газа при растирании культуры стрептококков (в отличие от стафилококков) не происходит — реакция отрицательная.

2*3.6.4-. Дифференциацию стрептококков проводят по тестам, указанным в таблице 2.

В молоке коров больных маститом наиболее часто обнаруживают Str. agalactiae,Str.di8galactiee,Str.uberi8STpenTQK0KKH StrЛас-tis, Str.cremorie₍5tr. faecalie не являются возбудителями мастита и могут быть обнаружены в молоке как здоровых, так и больных коров вследствие его контаминации.

Для ускоренного обнаружения Str. agaiactiae в первую очередь проводят постановку КАМП-теста, который положительный у данного вида стрептококка и может быть у str. uberis.

2.3.6.5. Постановка КАМП-теста

Суточную агаровую или бульонную культуру гемолитического стафилококка засевают на кровяной агар с 7-8]£ дефибринирован-ной или нитратной крови крупного рогатого скота (рец. № I). Посев делают потлей в виде сплошной линии по диаметру чашки или. круговой линии по периферии кровяного агара в чашке Петри. Пор-

источник

Сорт молока зависит от количеств МАФАнМ в 1 мл молока, по санитарным правилам и нормам (СанПиН 2.3.2.1078_01) сырое молоко подразделяют на:

-на молоко сырое, высший сорт — не более 300 тыс. бактерий в 1 мл;

-на молоко сырое, I сорт — не более 500 тыс. бактерий в 1 мл;

-на молоко сырое, II сорт — не более 4 млн бактерий в 1 мл.

Для определения количества бактерий в молоке проводят бактериологическое исследование по следующей методике: 1 мл сырого молока вносят в пробирку с 9 мл стерильной воды для получения первого разведения 1 : 10 (10–1), из которого 1 мл переносят во вторую пробирку с 9 мл стерильной воды — получается разведение 1 : 100 (10–2) и так далее до разведения 1 : 10–6.

Из двух последних разведений (10–5 и 10–6) по 1 мл вносят в две чашки Петри, каждую заливают 15 мл расплавленного и охлажденного до температуры +50_С МПА, перемешивают путем легкого вращательного покачивания и после застывания агара их помещают в термостат при температуре +37_С на 24–48 ч. После этого подсчитывают количество выросших колоний в каждой чашке, определяют среднеарифметическое число. При этом для подсчета берут те чашки, количество колоний в которых не менее 30 и не более 500.

Число колоний, выросших в каждой чашке, пересчитывают на 1 мл или 1 г продукта с учетом разведения и определяют количество бактерий в 1 мл исследуемого молока. Следовательно, бактериологическим методом сорт молока можно установить лишь через сутки после его приема на молокозаводе. Никакое производство не может себе этого позволить.Поэтому на молокозаводе сорт молока определяют быстро, но косвенным путем. Для этого при приеме молока учитывают следующий комплекс признаков (табл. 14): кислотность молока, редуктазную пробу и степень чистоты по эталону, наличие соматических клеток.

На все показатели, по которым производится контроль качества принимаемого молока, следует обращать внимание, так как оценка молока при сдаче осуществляется по худшему из них. Например, если по редуктазной пробе молоко относится к I классу, по степени чистоты — к 1_й группе, а кислотность при этом повышена до 20_Т, то молоко будет отнесено ко II сорту.

Кислотность молокаслужит одним из основных показателей санитарного качества, по которому при приеме осуществляется сортировка молока. Она напрямую связана с бактериальной обсемененностью. Свежее молоко имеет нейтральную реакцию и почти не содержит молочной кислоты.

Кислотность молока обозначают в условных градусах Тернера (_Т). Под условными градусами понимают количество мл 0,1 М раствора едкого натра (калия), необходимых для нейтрализации 100 мл молока, разбавленного вдвое дистиллированной водой в присутствии индикатора фенолфталеина.

Показатель титруемой кислотности позволяет установить повышение кислотности в результате размножения молочнокислых бактерий, сбраживающих лактозу до молочной кислоты.

Чем дольше хранится молоко в неохлажденном состоянии при температуре выше +10_С, тем больше в нем размножаются молочнокислые бактерии и тем выше его кислотность.

Нормальная кислотность свежего молока колеблется от 16 до 18_Т. При кислотности выше 21_Т начинается первая стадия порчи молока — прокисание. Такое молоко не выдерживает тепловой обработки и не может быть сырьем для выработки стандартных молочных продуктов.

Определение степени чистоты.Показателем санитарных условий получения молока является определение степени его чистоты, которая характеризуется наличием механических примесей.

Методика.Через специальный фильтр процеживают 250 мл молока и сравнивают полученный осадок на фильтре с эталонами 1, 2 и 3_й групп.

Молоко по степени загрязненности делят на группы:

1_я — на фильтре нет частиц механической примеси;

2_я— на фильтре отдельные частицы механической примеси;

3_я — на фильтре заметный осадок (волоски, частицы сена, песка).

Проба на редуктазуявляется косвенным методом определения общей микробной обсемененности молока, основанным на изменении биохимических показателей данного продукта. Преимущество этого метода — простота и быстрота проведения анализапо сравнению с бактериологическим исследованием.

Суть метода заключается в том, что микроорганизмы, попавшие в молоко, в процессе жизнедеятельности выделяют в окружающую среду наряду с другими окислительно-восстановительными ферментами анаэробные дегидразы, которые по старой классификации называются редуктазами. Существует прямая зависимость между общим количеством бактерий в молоке и содержанием в нем редуктазов (чем больше бактерий, тем больше редуктазов), что позволяет использовать редуктазную пробу как косвенный показатель степени бактериальной обсемененности сырого молока.

Фермент редуктаза обладает способностью восстанавливать метиленовую синь, которая при этом наглядно обесцвечивается.

Методика.В пробирки наливают 20 мл исследуемого молока и 1 мл рабочего раствора метиленовой сини, закрывают резиновой пробкой, смешивают путем трехкратного переворачивания пробирки (молоко при этом окрашивается в синий цвет).

Далее пробирки помещают в водяную баню при температуре +40_С (на лабораторных занятиях можно внести изменения: наливать 10 мл исследуемого молока и добавлять 0,5 мл метиленовой сини).

Снимают показатели изменения окраски через 20 мин, через 2 ч, через 5 ч 30 мин после начала анализа. В бактериально чистом молоке фермента редуктазы содержится очень мало, поэтому оно обесцвечивается медленно.

В зависимости от времени обесцвечивания метиленовой сини молоко относится к одному из четырех классов в соответствии с ГОСТом.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: Сдача сессии и защита диплома — страшная бессонница, которая потом кажется страшным сном. 8464 — | 7007 — или читать все.

193.124.117.139 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.

Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)
очень нужно

источник

Для определения возбудителей мастита и их чувствительности к лекарственным препаратам из пораженного вымени отбирают секрет для бактериологических исследований. Соски вымени протирают ватным тампоном, смоченным 70 % спиртом, и надаивают 10 см 3 молока в стерильную пробирку. При взятии проб следят за тем, чтобы сосок не касался края пробирки. Пробы молока доставляют в ветеринарную лабораторию в течение 3-4 ч с момента взятия в специальных емкостях, обеспечивающих температуру не выше 8-10 О С, или в термосах со льдом.

В лаборатории из проб молока делают посевы на элективные питательные среды для выделения и идентификации основных возбудителей мастита и определения их чувствительности к антимикробным препаратам (не реже одного раза в год). Посеянные в чашки Петри капли секрета выдерживают в термостате при температуре 37° в течение 24 ч. Выросшие колонии микроскопируют, затем по реакции плазмокоагуляции и гемолиза определяют их патогенные свойства. Для исследования молока на наличие патогенных стрептококков отсеивают колонии с кровяного агара на элективную питательную среду для стрептококков. Изменение сине-фиолетового цвета среды на лимонный или желто-зеленый указывает на рост бактерий, из этих пробирок берут мазки и окрашивают по Граму. При наличии стрептококков проводят их дальнейшую дифференциацию с помощью КАМП-теста.

Для определения бактерий кишечной палочки колонии грам «-» палочек с кровяного агара отсеивают на элективную среду КОДА и инкубируют при температуре 37° в течение 24 ч. Изменение сине-фиолетового цвета на желто-зеленый указывает на наличие бактерий группы кишечной палочки.

Трудно диагностировать субклинический мастит, поскольку практически пол­ностью отсутствуют заметные сопутст­вующие признаки. Важными приметами являются высокая бактериальная обсемененность молока и повышенное содержание соматических клеток. По­казатели свыше 100.000 клеток в 1 мл молока более или менее ясно указыва­ют на инфицирование вымени. Причина увеличения числа соматических клеток — обусловленное инфекцией усиленное разложение тканей, а также возросшая активность белых кровяных телец, включившихся в борьбу против возбу­дителей инфекции. Если увеличивается содержание соматических клеток в мо­локе вследствие инфекции, то возраста­ет и бактериальная обсемененность.

Лечение мастита заключается в проведении ряда мероприятий, основной задачей которых является повышение защитных сил организма и устранение предрасполагающих к маститу факторов. Ветеринарные специалисты при лечении маститов учитывают ве­дущий этиологический фактор и те изменения, которые произошли под его влиянием.

Сегодня имеется масса различных методов терапии сельскохозяйственных животных, больных маститом, которые подразделяются на следующие группы:

1) физическая терапия — применение холода в фазе активной гиперемии в первые 3-4 часа (обливание холодной одой, обкладывание слоем глины). В фазе пассивной гиперемии на 3-4 дни применяют тепло (согревающие компрессы, парафино — и озокеритотерапия, сухое тепло, лампы, Уф-облучение, ионофорез с растворами хлористого натрия, лекарственных средств), массаж вымени и др.;

2) стимулирующая терапия — аутогемотерапия, лактотерапия, внутривенное введение хлористого кальция и др.;

3) патогенетическая терапия — различные методы новокаиновой блокады (нервов вымени, наружного срамного, надплевральную блокаду чревных и симптоматических пограничных стволов по В.В. Мосину, проводниковую анестезию вымени по И.И. Магде), внутриаортальное и внутривенное введение растворов новокаина;

4) этиотропная терапия — применение анти­микробных средств с учетом чувствительности к ним мик­рофлоры вымени, в т.ч. парентеральное и внутривьшенное введение. Для этих целей используют антибиотики различ­ного характера, сульфаниламиды, фурацилиновые и другие препараты, а также специальные комплексные препараты, содержащие антибиотики, сульфаниламиды и другие средства на различной основе.

Схема лечебного применения указанных выше методов средств при мастите конкретизируется для каждого больного животного с учетом характера воспаления и течения процесса.

При лечении мастита необходимо учитывать следующее:

1. Воспаление вымени быстро вызывает глубокие, часто необратимые изменения в тканях. Поэтому эффективность лечения прямо зависит от того, когда оно начинается: чем раньше оказана помощь, тем лучше результаты и короче сроки лечения.

2. Причины возникновения мастита и характер изменений в тканях вымени очень разнообразны. В большинстве случаев требуется комплексная терапия с учетом общего состояния больного животного, характера воспалительного процесса и биологических свойств возбудителя заболевания.

3. Если появление мастита связано с наличием другого заболевания, то одновременно с применением противомаститных средств необходимо лечить и первичное заболевание, особенно в случаях, когда мастит возникает в послеродовой период при заболевании половой системы.

Коровы. Лечение больных коров должно быть комплексным, направленным на подавление жизнедеятельности микрофлоры, повышение факторов резистентности вымени, устранение болезненности и отечности его тканей, восстанов­ление физиологической функции пораженных четвертей.

Больной корове необходимо создать условия, способствующие быстрому выздоровлению, обеспечить покой, изолировать от здоровых животных. Если заболевание возникает в пастбищный период, то корову переводят на стойловое содержание. Для уменьшения отеков молочной железы и снижения секреции молока нужно заменить сочные корма сеном хорошего качества. При сильных отеках ограничивают прием воды. Частое регулярное сдаивание на любой стадии мастита способствует удалению из молочных ходов бактерий и продуктов их жизнедеятельности и, кроме того, сохраняет и восстанавливает функцию молочной железы. Больных коров переводят в стационар, где организуют руч­ное доение. Если такие условия отсутствуют, то больных коров выдаивают доильным аппаратом в последнюю очередь. Пораженные четверти вымени ос­вобождают от секрета в специальную емкость. Для удаления патологического секрета сдаивание проводят: при острой форме мастита — через 2-3 ч, при подострой и хронической — в обычные сроки доения. Для разжижения сгустков казеина в четверть вымени вводят 50-60 мл 1-2% раствора соды или 0,5% раствор нашатырного спирта. Секрет из пораженных четвертей вымени уничтожают. Для более полного удаления патологического секрета подкожно или внутривыменно вводят 20-40 ЕД окситоцина или питуитрина с последующим выдаиванием через 1 минуту всех четвертей. Стельным коровам гормо­нальные препараты вводить не рекомендуется. Лечебные препараты в форме эмульсий, суспензий или растворов вво­дят в пораженные четверти вымени через сосковый канал подогретыми до 38-40°С в объеме не более 20 мл.

Этиотропная терапия основана на применении антимикробных средств — антибиотиков, сульфанила­мидов, нитрофуранов и других химиотерапевтических препаратов отдельно или в различных сочетаниях, а также препаратов на основе ферментов мик­робной клетки, пробиотиков; фитонцидов и др. При выборе наиболее эффек­тивного антибиотика необходимо определить вид патогенной микрофлоры и чувствительность ее к различным антибиотикам. Эффективнее применять комплексные препараты, состоящие из нескольких антибактериальных веществ.

Перед переводом на сухостойное содержание из пораженных четвертей вымени тщательно сдаивают патологический секрет и вводят с лечебной це­лью однократно 15 мл диофурала А и Б, апромаста, гелиомаста, ристомаста, мастицида-2 или других препаратов пролонгированного действия. С профи­лактической целью указанные препараты вводят также коровам, переболев­шим в период лактации, в ранее пораженные четверти. Через 10 дней у больных животных проводят пробно сдаивание секрета, при необходимости препарат вводят повторно.

В целях предотвращения попадания антибиотика в молоко новотельных коров препараты пролонгированного действия — апромаст, гелиомаст и другие вводят не позже, чем за 30 дней до отела. Если воспаление молочной железы диагностировали во 2й полови­не сухостойного периода, то внутримышечно применяют мастицид, дифурол-А, диофур или один из мастисанов А, Б, Е

При лечении лактирующих коров с острым серозным, катаральным, гнойно-катаральным и фибринозным маститом антибиотики вводят паренте­рально в дозах 3-5 тыс.ЕД. на 1 кг массы животного. Эффективны эритроми­цин, неомицин, бициллин-3, мономицин, пенициллин. Молоко, полученное от животных, которым антибиотики и другие химиотерапевтические препараты вводили парентерально, запрещается исполь­зовать для пищевых целей. Такое молоко используют для кормления молод­няка после его термической обработки. При интрацистернальном введении препаратов молоко из здоровых четвертей используется без ограничения.

Для лечения коров при остром мастите, кроме антибиотиков, можно внутривыменно вводить один из следующих препаратов: 1% раствор стрепто­цида, 1-5% раствор норсульфазола, растворы риванола 1:1000, фурациллина 1:5000.

При катаральном, фибринозном, гнойном мастите, а также при флегмо­не и гангрене также вводят внутривенно 40% раствор глюкозы в дозе 400 мл, 10% раствор кальция хлорида или кальция глюконата в дозе 100-150 мл, а также 0,25% раствор новокаина на физрастворе в дозе 0,5-1 мл на 1 кг массы животного.

При флегмоне и гангрене вымени и абсцедирующем мастите целесообразно вводить внутривенно 5-10 г гексаметилен-тетрамина (уротропина) в 10% растворе кальция хлорида в объеме 100-150 мл. При развитии гангренозного процесса в пораженную долю вымени вво­дят 0,5-1% раствор калия перманганата или 3% раствор перекиси водорода в объеме 5% — 2 мл.

Высокой лечебной эффективностью обладают следующие препараты:

химиотерапевтические — 1% водный раствор диоксидина, диофур, томицид, фуравит, йодвисмутсульфамид, эндофарм, нитренол и др.;

биологические — линимент прополиса, иммозин. сауролизин, лизомаст, дидем-2, эндобактерин, биосан, стрептоэколакт;

растительные — хлорофиллипт, фитомастин, раствор сока подорожника, отвар толокнянки.

Для наружной аппликации при мастите рекомендуются препараты: валетер, аникоид, уберзан, ДМСО-90, ихтиоловая, камфорная мази.

Патогенетическая терапия высокоэффективна при остро протекающем мастите, когда не наступили деструктивные изменения тканей, особенно при серозном, катаральном, гнойно-катаральном мастите. Включает в се­бя различные виды блокад (Башкирову, Магда и т.д.). По Д.Д. Логвинову в надвыменное пространство инъециру­ют 150-200 мл 0,5% раствора новокаина. При двустороннем мастите блокаду делают с обеих сторон. Повторные введения через 24-48 часов. В рас­твор новокаина можно вводить антибиотики, а также препарат диофур по 5 мл. Метод внутриаортального введения новокаина при мастите (Логвинову) — 1% раствор новокаина из расчета 0,0015-0,002 г сухого вещества на 1 кг массы животного. Внутривенное лечение мастита раствором новокаина в 0,25% кон­центрации из расчета 0,5-1 мл на 1 кг массы животного. При использовании 0,5-1%-ных растворов новокаина дозу их на 1 кг массы животного снижают до 0,5-0,25 мл. При остром течении мас­тита препарат внутривенно вводят ежедневно в течение 3-4 дней, при подостром — через 1-2 дня. Для патогенетической терапии вместо новокаина можно применять тримекаин, обладающий более длительным анестезирующим действием в дозе 150-200 мл 0,5% или 100мл 1 % раствора.

Физические методы лечения мастита. Холод можно применять толь­ко в фазе артериальной гиперемии (до введения лекарственных веществ в вымя). Пораженную четверть обливают водой холодной (из шланга) или обкладывают жидкой глиной с уксусом (2-3 ст.л. на 1 л.во­ды). Слой глины регулярно смачивают холодной водой. Применение холода не должно продолжаться более 3-4 часов. Тепло назначают в фазе венозной гиперемии на 3-5 день, при ослаблении воспалительной реакции в стадии разрешения воспалительно­го процесса.

Парафинотерапия. На чистую, сухую, выбритую пораженную четверть вымени наносят расплавленный парафин температурой 45°С, а затем накладывают более горячий (80-90°С) слой пара­фина. Толщина парафиновой аппликации должна быть около 1 см. Парафин закрывают полиэтиленовой пленкой, затем ватно-марлевым надвыменником. Длительность процедуры 3-4 ч.

Озокеритотерапия. Нагревают озокерит до 100-110°С и разливают в кюветы, на дне которых расстилают клеенку. Из первого кювета озокерит с температурой 40-45°С накладывают на по­ясницу и крестец, а из второго озокерит с температурой 45-60° С — на пораженную четверть вымени. Для высокопродуктивных коров с нежной кожей вымени применяют озокерит более низкой температуры. На озокерит также накладывают клеенку, а затем ватный надвыменник. Озокерит рекомендуется прикладывать 1 раз в сутки на 5-6 ч.

Квантовая терапия. Квантовая терапия заключается в воздействии на воспаленные доли вымени УФ-облучения, лазерного лу­ча. Лазерное лечение мастита осуществляется 2 способами: путем на­ружного контактного облучения пораженной четверти вымени или отдельных её участков (узлов, индурации). В этом случае облучение про­водят контактным сканирующим методом. Такой способ лечения принято на­зывать лазеротерапией, под которой подразумевают прямое воздействие на патологические органы или участки животного лазерным лучом.

Лечение животных путем воздействия лазерного излучения на БАТ (биологически активные точки) называют лазеропунктурным методом. Для выполнения лазеропунктуры ветеринарный специалист должен знать расположение БАТ на теле животных. При выборе точек для лечения мастита необходимо учитывать не только, какая четверть поражена и их количество, но и форму воспаления вымени. Допускается комбинированный метод лечения маститов: методом лазе­ротерапии и лазеропунктуры. Лучшие результаты лечения бывают, если лазерное лечение сочетается с медикаментозным.

Массаж со­кращает продолжительность заболевания. Его проводят через 3-4 дня после начала заболевания. При серозном мастите массируют снизу вверх, при катаральном — сверху вниз. Обычно массаж применяют 1-2 раза в день, сочетая его с втиранием мазей (камфор­ную, стрептоцидовую, салициловую, йодную, ихтиоловую, норсульфазоловую или прополисную) и линиментов. При гнойном, фибринозном, геморрагическом мастите, гангрене и флегмоне массаж вымени запрещен.

Лечение скрытого мастита. Если обнаружен скрытый мастит, корову нужно перенести на ручное доение, которое проводят без соблюдения кратности доения. Молоко из пораженных четвертей вымени нужно сдаивать в отдельную посуду. Особенность лечения скрытой формы мастита заключается в том, что внутрь каждой пораженной четверти вымени вводят антибиотики с малым сроком выведения: пенициллин — 50-100 тыс. ЕД, стрептомицин — 50 тыс. ЕД. Их предварительно растворяют в 0,5 % растворе новокаина. Эффективны также препараты мастисан А, Б, Е, которые вводят 3 раза с интервалом в 24 ч.

Лечение мастита в период запуска и сухостоя. Наибольший процент клинических и скрытых маститов у коров наблюдается в конце лактации и начале периода сухостоя. Для лечения в этот период широко используют антибиотики длительного действия: мастикур (по 1 тюбику 2 раза с интервалом 10-12 дней) или бициллин (по 300 тыс. ЕД 2 раза через 10-12 дней). Наибольший эффект лечение дает только в том случае, если введенный препарат достигнет места инфицирования в высокой концентрации и сохранится в нем настолько долго, чтобы уничтожить возбудителя мастита. Введение антибиотиков длительного действия перед началом сухостойного периода имеет следующие преимущества:

а) в это время терапевтическая концентрация антибиотиков в молочной железе сохраняется значительно дольше, и препараты находятся в длительном контакте с патогенной микрофлорой;

б) нет потерь молока из-за выбраковки;

в) предотвращается появление новых инфекций, создаются условия для максимальной регенерации поврежденных тканей вымени.

Овцы. Лечение больных маститом овец организуют так, что­бы исключить возможность передачи инфекции от больных овец к здоровым. Приступать к лечению рекомендуется в первые часы заболевания, когда мастит протекает в относительно легкой форме серозного или ка­тарального воспаления. С развитием более тяжелых форм мастита (гнойно-катарального, геморрагического) лечеб­ные меры не всегда дают желаемый результат даже при использовании высокоэффективных средств. Больных маститом овцематок выделяют вместе с ягнятами из отары и помещают в изолятор, где им предоставляют покой и создают улучшенные условия содержания и кормления. Чтобы ускорить освобождение больной молочной железы от патологического секрета и уменьшить распад ее тканей, применяют осторожное сдаивание по 3 раза в сутки. При этом сдаивать секрет надо в отдельный сосуд, содержащий 3—5% раствор карболовой кислоты, хлорамина, креолина или другую дезинфицирующую жидкость. Если сдаивание за­труднено, то для разжижения секрета через сосок вводят 10—20 мл 1—2% теплого раствора соды, вымя слегка встряхивают снизу вверх и, выждав 10—15 мин, проводят сдаивание. Секрет после этого уничтожают.

При серозном, катаральном, гнойно-катаральном, геморрагическом маститах (и в начальной стадии абсцессов) назначают антибиотики и сульфаниламидные препараты. Общую и местную антимикробную терапию целесообразно проводить с учетом вида выделенного возбудителя болезни и его чувствительности к применяемому препарату. Если бактериологическое исследование не про­водится, то назначают одновременно два совместимых антибиотика или антибиотик с сульфаниламидным препа­ратом. Внутримышечно вводят антибиотики из расчета на 1 кг массы животного: бензилпенициллина натриевую или ка­лиевую соль -5000—7000 ЕД, стрептомицина сульфат — 10 мг, эритромицина сульфат —6—8 мг, мономицина — 6—8 мг, гентамицина — 1 мг, тетраолеана — 20 мг. Инъе­цируют препараты с интервалом 8—12 ч в течение 3-5 дней. Для лечения маститов у овец широко используют антибиотики пролонгированного действия: внутримышечно раз в сутки экмоновоциллин-1 или раз в 3-4 дня бициллин-3 (10000—15000 ЕД на 1 кг массы тела). Иногда бициллин-5 в дозе 15000 ЕД на 1 кг массы животного; действие препарата продолжается до четырех недель. Пролонгированным эффектом (до 5-13 дней) обладает 10% суспензия дибиомицина, приготовленная на 30% простерилизованном глицерине или стерильной сыворотке крови лошади или коровы. Суспензию вводят внутримышечно в дозе 0,5—0,7 мл на 1 кг массы животного. Сульфаниламиды (стрептоцид, норсуль­фазол и др.) назначают обычно внутрь в виде порошка по 2—3 г на прием 2—3 раза в сутки – 4-5 дней. При тяжелом течении мастита можно вводить растворимые сульфаниламиды внутривенно, например, норсульфазол натрия в виде 10%-ного стерильного раст­вора в лозе 10—15 мл 2—3 раза в сутки в течение 3— 4 дней. Для глубокой антисептики пораженных тканей молочной железы применяют также внутриаортальные инъекции антибиотиков или растворимых сульфаниламидных препа­ратов (200000—250000 ЕД пе­нициллина или стрептомицина в 15 мл стерильного 0,5%-ного раствора новокаина).

Общую противомикробную терапию целесообразно до­полнять местной терапией, путем введения препаратов через сосковый канал в молочную цистерну больной по­ловины вымени. Предварительно ее сдаивают, верхушку соска протирают 70% спиртом. Затем через сосковый канал вводят пенициллин, стрептомицин, неомицин или другой антибиотик в дозе 50000—100000 ЕД, растворенный в 10 мл 0,5%-ного стерильного теплого раствора новокаина или изотониче­ского раствора хлорида натрия. Из сульфаниламидных препаратов для внутрицистернального введения чаще все­го используют 10—20% раствор норсульфазола натрия в дозе 10 мл. Растворы лекарственных веществ вводят в вымя 1—2 раза в сутки 3—4 дня. Когда чувствительность микрофлоры вы­мени к препаратам не установлена, целесообразно применять внутрицистернально смесь из 2х антибиотиков или комбинированные препараты — мастицид, мастисан-А, -Б, -Е, которые вводят внутривыменно по 5 мл ежедневно в течение 4 дней.

Этиотропную терапию при маститах у овец рекомен­дуется сочетать с методами и средствами патогенетической терапии в виде новокаиновых блокад: короткой блокады нервов вымени по Д. Д. Логвинову или отдаленной — Б. А. Башкирову, или надплевральной блокады по В. В. Мосину. При маститах у овец вначале заболевания и при угрозе развития общего сепсиса положительные результаты дают внутриаортальные инъек­ции растворимых антибиотиков с целью глубокой анти­септики пораженных тканей вымени. Внутриаортальные инъекции раст­вора антибиотиков в комплексе с другими лечебными мерами также способствует купированию воспалитель­ного процесса и более легкому течению болезни. При острых маститах, сопро­вождающихся прогрессирующим отеком вымени, пока­заны внутривенные вливания 10% раствора каль­ция хлорида в дозе 10 мл ежедневно в течение 3 дней. С целью ускорения рассасывания воспалительных отеков и инфильтратов в кожу пораженной половины вымени втирают камфорное масло. После втирания необходимо наложить на вымя утепленную повязку. Полезны также аппликации на вымя нагретого озокерита, парафина и другие виды тепла, особенно при катаральном и гнойно-катаральном маститах со 2-3 дня заболе­вания.

При абсцедирующем мастите применяют хирургиче­ское лечение. Поверхностные абсцессы вскрывают верти­кальным разрезом на месте наибольшей флюктуации гнойника. Удалив гной, орошают полость абсцесса 10— 15% раствором натрия хлорида, 2—3% раство­ром хлорамина, раствором марганцовокислого калия 1:1000 или другими дезинфицирующими растворами. После этого припудривают рану порошком трициллина или смесью антибиотиков с норсульфазолом. Из абсцес­сов, расположенных глубоко в тканях вымени, гной можно удалить с помощью иглы и шприца, после чего вводят в опорожненную полость суспензию бициллина или раст­вор другого антибиотика. При осложнении мастита гангренозным процессом остановить его развитие почти невозможно. Для сохране­ния жизни животного применяют общую противосептическую терапию: вводят внутримышечно антибиотики в больших дозах, внутривенно — жидкость Кадыкова (75— 100 мл), 0,02% раствор фурацилина (100—150 мл), 10% раствор норсульфазола натрия (30—15 мл), внутриаортально — 0,5% раствор новокаина (15 мл) с добавлением к нему пенициллина и стрептомицина (по 100000—150000 ЕД). Внутрь дают стреп­тоцид или другие сульфаниламиды (2—3 г). Омертвев­шую ткань удаляют хирургическим путем или ампутируют всю пораженную половину вымени.

Овец, больных хроническим маститом, сопровождаю­щимся гангренозным распадом или гнойным расплав­лением тканей, надо своевременно выбраковывать, т.к. у них патологический процесс может продолжаться месяцами и в течение этого срока в окружающую сре­ду рассеивается большое количество инфекционного на­чала. Лечебные меры при субклинических маститах у овец недостаточно разработаны. Положительные результаты получены при внутривыменных введениях комплексных препаратов типа мастисан-А, -В и -Е в дозах 5 мл трехкратно через каждые 24 ч.

Свиньи. Лечение должно быть начато как можно раньше — в первые часы заболевания и проводиться с учетом харак­тера воспалительного процесса и состояния организма больного животного. По возможности учитывают также вид и свойства возбудителя мастита. Прежде всего, необходимо предоставить больной сви­номатке покой; ее помещают в отдельный станок, кото­рый предварительно очищают, дезинфицируют, осушают и застилают сухой мягкой подстилкой. При острых ма­ститах для уменьшения секреции молока исключают из рациона на 2—3 дня сочные корма. При сильной отеч­ности вымени ограничивают водопой. Если воспаление молочных желез развивается как вторичная болезнь, то одновременно с лечением мастита принимают меры к ликвидации сопут­ствующего (первичного) заболевания. Для удаления патологического секрета из больных молочных желез применяют сдаивание 3—4 раза в сутки. При послеродовых маститах рекомендуют вводить больной свиномат­ке подкожно или внутримышечно питуитрин Р или гифотоцин в дозе 10—15 ЕД или питуитрин М в дозе 7,5—10 г на 100 кг массы животного. Инъекции делают 2 раза в сутки. Через 10—20 мин после введения гормонального препарата сдаивают мо­локо или к свиноматке подпускают поросят для сосания. Спустя 5—6 минут поросят отнимают от свиноматки и через 20—25 минут их подпускают повторно или сдаивают молоко. Процедуру повторяют 5—6 раз. Указанные гормональные препараты стимулируют сокращения миоэпителиальных клеток альвеол и выводных канальцев молочных желез, способствуй выделению из них секрета и усиливают сокращения мускулатуры матки, бла­годаря чему ускоряется выведение из ее полости остат­ков последа, сгустков крови или экссудата. Для подавления патогенной микрофлоры применяют антибиотики и сульфаниламидные препараты. Внутримы­шечно вводят из расчета на 1 кг массы бензилпенициллина натриевую или калиевую соль, растворен­ную в 0,5% растворе новокаина, по 6000—8000 ЕД через каждые 6—8 ч, стрептомицина сульфат — по 10— 15 мг с интервалом 12 ч, гентамицин— по 1 мг через каждые 6 ч, неомицина сульфат, окситетрациклина гидро­хлорид и др. антибиотики — по 5000— 10 000 ЕД 2 раза в сутки. Курс лечения — 3-4 дня и более, в зависимости от тяжести процесса. Сульфаниламиды дают внутрь с кормом: стрептоцид — по 1—3 г, норсульфазол — по 2—5 г 3 раза в сутки в течение 3-х дней.

Из методов и средств патогенетической терапии, которая способствует нормализации трофики пораженной молочной железы, уменьшению воспалительного отека и болезненности ее тканей, устранению спазма молочных протоков, наиболее часто используют короткую новокаиновую блокаду нервов вымени по Логвинову. Перед введением желательно добавить пенициллин, стрептомицин или другой антибиотик из расчета 4000— 5000 ЕД на 1 мл новокаина. При необходимости блокаду повторяют через 24—48 ч. Высокой лечебной эффективностью при маститах у свиноматок, особенно при наличии сопутствующих забо­леваний, обладает надплевральная новокаиновая блокада по Мосину.

В целях снижения проницаемости сосудов и уменьше­ния развития воспалительного отека в начальных ста­диях мастита показаны внутривенные вливания 10% раствора кальция хлорида в дозе 10—20 мл. Для подня­тия общего тонуса организма, особенно при нарушении деятельности сердечно-сосудистой системы и отеках, вводят внутривенно 40% раствор глюкозы в дозе 30—60 мл, подкожно -20% раствор кофеина в дозе 2,5-5 мл. Лечение может включать также при­менение жаропонижающих средств, например фенилсалицилата по 2—5 г внутрь 2—3 раза в день. Выведению токсинов из организма способствует дача внутрь гексаметилен-тетрамина (уротропина) по 2—5 г 2-3 раза в день. При ослаблении перистальтики кишечника и запорах назначают внутрь каломель в дозе 1 — 1,5 г 2 раза в день. При скоплении каловых масс назначают клизмы с мыльной водой.

Для ускорения рассасывания воспалительных отеков и инфильтратов применяют легкий массаж вымени, иногда в сочетании с втиранием мазей (ихтио­ловую, камфорную, ксероформную мази, стрептоцидную, синтомициновую эмульсии, камфорное масло.). Его делают 2—3 раза в день. При гной­ном, фибринозном и геморрагическом маститах мази и эмульсии наносят на кожу молочной железы без втирания. Одним из недостатков использования мазей и эмульсий является возможность появления расстройства пищеварения у поросят-сосунов. Более трудоемкими, но и более эффективными методами физиотерапии являются аппликации на вымя нагре­того озокерита или парафина. Можно применять также согревающие компрессы, припарки и другие виды тепла. При абсцедирующем мастите прибегают к хирурги­ческому лечению. Поверхностно расположенные абсцес­сы вскрывают, их полости промывают раствором марган­цовки 1:5000, этакридина лактата 1:1000 или 3% раствором перекиси водорода, а затем запол­няют стрептоцидной или синтомициновой эмульсией, ксе­роформной или другой мазью. После вводят внутримышечно антибиотики, внутрь дают сульфаниламиды.

При гангрене вымени проводят общую и местную противомикробную, а также симптоматическую терапию, иногда прибегают к хирургическому вмешательству — удаляют пораженный пакет молочной железы.

Субклинические маститы лечат внутри­мышечными инъекциями антибиотиков в сочетании с инъекциями окситоцина, гифотоцина или питуитрина. В тех хозяйствах, где регистрируются маститы диплококковой этиологии, в комплекс лечебных мер вклю­чают применение противодиплококковой сыворотки. Ее вводят внутримышечно, из расчета 0,5—1 мл на 1 кг массы 1—2 раза с интервалом 48 ч.

Кобылы. При маститах у кобыл лечебную помощь необходимо оказывать как можно раньше. Запоздалое лечение не обеспечивает ожидаемых результатов. При сильной болезненности вымени жеребенка отделя­ют от кобылы и выпаивают молоком, полученным от других кобыл. При отсутствии лактирующих кобыл используют молоко коров. Лечение кобыл начинают с удаления содержимого вымени, для чего производят сдаивание; если невозможно сдоить, применяют катетеризацию. Кобыл, которых доили с использованием доильных аппаратов, при возникнове­нии мастита обязательно переводят на ручное доение. Если сдаиванию препятствуют скопления в молочной цистерне сгустков и хлопьев, то для их разжи­жения внутрицистернально вводят 20—30 мл теплого 1—2% раствора соды, делают лег­кий массаж и через 10-15 мин производят сдаивание, а в целях наиболее полного уда­ления содержимого из вымени за 5-10 мин до выдаивания применяют подкожно окситоцин — 20-40 ЕД или пи­туитрин 15-25 ЕД. После сдаивания в пораженную половину вымени через каждое сосковое отверстие 1—2 раза в день вводят мастисан, мастикур, мастицид, мастицид-2, левомексид, пенэрсин-А, асептол, мастивален, нео-мастаэрозоль, мазь «Ригефен» и другие антимикробные эмульсии и суспензии на жировой основе. Используют также антибиотики: через сосковые каналы 2 — 3 раза в день с помощью тонкого молочного катетера в вымя вводят по 100—200 тыс. ЕД пенициллина со стрептомицином или неомицина с тетрациклином, растворенных в 20 — 40 мл 0,5% раствора новокаина. Внутрицистернально вводят также 1% раствор стрептоцида, 2 — 3% раствор норсульфазола и другие раствори­мые сульфаниламиды. Кроме антибиотиков и сульфа­ниламидных препаратов применяют внутривыменно раст­вор фурацилина 1:5000 и другие антисептические растворы. Растворы вводят в вымя подогретыми до 36— 38 О С по 20—40 мл в каждую пораженную половину вы­мени. Очередное сдаивание после их введения следует производить через 2—4 ч. В кожу вымени также втирают камфорное масло, ихтиоловую, камфорную и другие мази.

При невозможности введения растворов через сосок, а также при наличии высокой температуры тела анти­биотики в дозе 800 тыс.—1 млн. ЕД вводят внутримы­шечно 4 раза в сутки до выздоровления. Эффективны также внутривенные вливания 10% раствора нор­сульфазола или этазола в дозе 100—150 мл ежедневно или через день.

В начальных стадиях мастита для снижения прони­цаемости сосудов внутривенно вводят 100—150 мл 10% раствора кальция хлорида или глюконата кальция в сочетании с 150—200 мл 40% раствора глюкозы. Благоприятное влияние на течение мастита оказывает применение надвыменной блокады (введение 100—150 мл 0,5% раствора новокаина), а также тепла на вы­мя (озокерита, парафина). Блокады повторяют через 48—72 ч. Можно применять надплевральную нозокаиновую блокаду 0,5% раствором по Мосину (однократно из расчета 0,5 мл на 1 кг массы животного). Хороший результат дает внутриаортальная инъекция 0,5% раствора новокаина по Магда и Воронину в дозе 100—150 мл, внутривенное вве­дение (по 250—300 мл 1-2 раза в день) смеси следую­щих лекарств: камфоры -4 г, глюкозы — 60 г, этилового спирта —300 мл, уротропина —10 г, аскор­биновой кислоты—1,5 г, кальция хлорида—10 г, 0,9% раствора хлорида натрия —700 мл. Для активизации иммунобиологической реактивности организма и усиления регенерации тканей следует вводить подкожно или внутримышечно тривитамин (A, D, Е) или тетравит (A, D, Е, F) по 10—15 мл 2—3 раза с интер­валом 5—7 дней. В зимний период полезно облучать больных кобыл ртутно-кварцевой лампой. Созревшие абсцессы вскрывают вертикальными разре­зами так, чтобы не повредить противоположную стенку. После вскрытия абсцесса, остановки кровотечения и уда­ления гноя рану припудривают порошком трициллина или применяют жидкость Оливкова, мазь Виш­невского, эмульсии стрептоцида, синтомицина и др. При необходимости гнойную полость вымени дренажируют. Процесс повторяют ежедневно 3—4 дня. При множественных абсцессах лечение часто оказывается неэффективным.

Крольчихи. Прежде всего изолируют больную маститом самку вместе с крольчатами. С лечебной целью больному животному вводят внутримышечно антибиоти­ки по 15000—20000 ЕД на I кг массы тела 2—3 раза в сутки в течение 4—5 дней. Одновременно делают ко­роткую новокаиновую блокаду вымени — инъецируют в соединительнотканную прослойку между основанием каждого больного пакета молочной железы и брюшной стенкой по 3—5 мл стерильного теплого 0,25—0,5% раствора новокаина, к которому можно добавить пени­циллин или стрептомицин. Эффективна также надплевральная новокаиновая блокада по В.В. Мосину (с обеих сторон инъецируют по 5 мл 0,5% раствора ново­каина)

В начальной стадии заболевания, до появления абсцес­сов, периодически сдаивают секрет из пораженных мо­лочных желез и смазывают их кожу раствором йода, пиоктанином или йод-глицерином. Некоторые кроликово­ды смазывают кожу больного вымени мазями (камфор­ной, прополисовой, ихтиоловой, йод исто-калиевой н др.), однако такое лечение небезопасно для крольчихи, так как она слизывает мазь.

Созревшие абсцессы вскрывают, полости их промы­вают антисептическими растворами и присыпают порош­ком стрептоцида или вводят в рану кусок бинта, обильно пропитанный антисептическим раствором. При развитии флегмоны вымени крольчиху выбраковывают.

источник